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大腸埃希氏菌宿主的培養(yǎng)條件與注意事項及打管說明!
小楊 / 2023-10-29 14:15:49


一、菌種簡介
平臺編號:Bio-72762
規(guī)格:凍干粉
拉丁屬名:Escherichia Coli
中文名稱:大腸埃希氏菌
拉丁名稱:Escherichia coli
來源歷史:←日本
收藏時間:2015-02-13
原始編號:K-12 BW25113
原產(chǎn)國:日本
資源歸類編碼:15131122101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究
特征特性:ilvG基因缺陷型,乙酰乳酸合酶 II(Ahas) 缺陷型。
具體用途:用于纈氨酸抑制實驗。
生物危害程度:四類
培養(yǎng)基編號:CM0002
培養(yǎng)基名稱:營養(yǎng)肉汁瓊脂
培養(yǎng)基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
培養(yǎng)溫度:37℃
需氧類型:好氧
保存方法:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
提供形式:凍干物
用途:研究
注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準)

二、儲存條件
凍干菌種和試管斜面請置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌種請置于-20℃冷凍。 

三、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基編號:CM0002
2、培養(yǎng)基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入 5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
3、需氧類型:好氧
4、培養(yǎng)溫度:37℃

四、注意事項
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時間:細菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、試管斜面菌種請盡快轉(zhuǎn)接,不建議長期存放。
3、初次使用時請按照本說明書推薦條件進行復(fù)活培養(yǎng),如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負責(zé)任。
4、使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲和操作,帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請參閱微生物菌種查詢網(wǎng)網(wǎng)站(www.family998.com)。

五、凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉檫試凍干管表面進行消毒,將管頂端于酒精燈外焰上均勻加熱;立即滴 2-3 滴無菌水于加熱部位,使管壁破裂;再用鑷子或其他適宜工具敲下破裂處。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可)于凍干管中將凍干菌粉全部溶解。將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻,并取 100μL 轉(zhuǎn)接到固體培養(yǎng)基上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在 2-8℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長,需要轉(zhuǎn)接至 2-3 代恢復(fù)活力。
4、復(fù)蘇后的菌種在傳 1-2 代后使用。
5、暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏(特殊除外)。
6、凍干管打開后需一次用完,不能留存。
7、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護設(shè)備中進行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時凍干管應(yīng)遠離面部,保護眼睛。
8、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤上方進行,用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。

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