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鹽反硝化枝芽孢桿菌的儲(chǔ)存與培養(yǎng)及打管說明!
小楊 / 2023-12-26 09:41:09


鹽反硝化枝芽孢桿菌是Virgibacillus屬的微生物,原產(chǎn)地為中國。厚壁菌門芽孢桿菌科細(xì)菌。主要用途為研究。

一、菌種簡介
平臺(tái)編號(hào):Bio-00094
提供形式:凍干物
拉丁屬名:Virgibacilllus Halodenitrificans
中文譯名:鹽反硝化枝芽孢桿菌
拉丁學(xué)名:Virgibacillus halodenitrificans
原始編號(hào):DSM 10037
菌株來源:←DSMZ
保藏人:周宇光
直接來源國家:德國
保藏時(shí)間:10/8/2003
其他保藏編號(hào):=ATCC 49067
生物危害:四類
模式菌株:模式菌株
菌株用途:模式菌株
培養(yǎng)溫度:30℃
培養(yǎng)基:0502    
分離源:硫化泉
用途:模式菌株
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

二、儲(chǔ)存條件
凍干菌種和試管斜面請(qǐng)置于 6-10℃冷藏。 

三、培養(yǎng)條件
營養(yǎng)肉汁瓊脂
蛋白胨 10 克 NaCl 5 克
蒸餾水 1000ml 牛肉提取物 3 克
瓊脂 15 克 pH=7.0

四、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間:細(xì)菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、菌種恢復(fù)培養(yǎng)前,建議將收到的菌種安瓿保存在 6-10°C 的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長,如在說明建議的培養(yǎng)時(shí)間還未長起來,請(qǐng)繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時(shí)或者更長時(shí)間,直至菌種培養(yǎng)完成,有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,一般來說菌種培養(yǎng)穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3、初次使用時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格按照本說明書推薦條件和操作步驟進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng),如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負(fù)責(zé)任。
4、恢復(fù)培養(yǎng)厭氧菌時(shí),在操作過程中應(yīng)嚴(yán)格控制厭氧條件:制作培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)使用厭氧螺口試管,并利用高純氮?dú)馊コ嚬芎团囵B(yǎng)基中的氧氣,使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作,帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請(qǐng)參閱微生物菌種查詢網(wǎng)網(wǎng)站(www.family998.com)。

五、凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無菌水至加熱頂端使之破裂(應(yīng)避免過多水蒸氣影響菌種的復(fù)蘇),用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、用無菌吸管吸取 0.3ml(建議勿超過 0.5ml)適宜的液體培養(yǎng)基(不添加瓊脂),滴入管內(nèi),輕輕振蕩,待安瓿管內(nèi)的菌體溶解呈懸浮狀,在用無菌吸管吸取全部菌懸液接在 1-2 支建議的培養(yǎng)基試管中(不超過 2 支,中國微生物菌種查詢網(wǎng)提供的培養(yǎng)基配方中有瓊脂,請(qǐng)務(wù)必做成試管斜面,配方中沒有瓊脂,試管中液體培養(yǎng)基不超過 5ml),并在建議的條件下靜止培養(yǎng)。凍干管打開后需一次用完,不能留存。另外,安瓿管內(nèi)大部分是用牛奶做保護(hù)劑,里面菌體為少數(shù),復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上,否則可能造成復(fù)蘇不成功。
4、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部,保護(hù)眼睛。
5、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤上方進(jìn)行,用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
6、菌種復(fù)蘇時(shí),請(qǐng)務(wù)必記錄好菌種的編號(hào)和制備批號(hào),如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況,請(qǐng)?jiān)谑盏骄姾?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系,逾期不予受理。

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