唾液乳桿菌的保藏條件與注意事項(xiàng)及打管說(shuō)明！
小楊 / 2024-02-23 09:22:29
唾液乳桿菌，salivarius種Lactobacillus屬益生菌。刺激免疫細(xì)胞分泌抗過(guò)敏相關(guān)細(xì)胞激素濃度的唾液乳桿菌。是革蘭氏染色陽(yáng)性桿菌，不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運(yùn)動(dòng)性，在好氧及厭氧環(huán)境均能生長(zhǎng)，屬于兼性異質(zhì)發(fā)酸性菌株，葡糖代謝時(shí)不產(chǎn)生氣體。
一、菌種簡(jiǎn)介
提供形式：凍干物
拉丁屬名：Lactobacillus Salivariu
拉丁學(xué)名：Lactobacillus salivarius
原始編號(hào)：JCM 1231
菌株來(lái)源：←JCM
保藏人：周宇光
直接來(lái)源國(guó)家：日本
保藏時(shí)間：5/8/1996
其他保藏編號(hào)：=
ATCC 11741 =BCRC 14759 =CCUG 31453 =CIP 103140 =DSM 20555 =LMG 9477 =NRRL B-1949.
生物危害：四類(lèi)
模式菌株：模式菌株
菌株用途：模式菌株
培養(yǎng)溫度：37℃
培養(yǎng)基：0006
分離源：人唾液
用途：模式菌株
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、培養(yǎng)基
MRS 培養(yǎng)基
酪蛋白胨 10 克 牛肉膏 10 克
酵母提取液 5.0 克 葡萄糖 20 克
乙酸鈉 5.0 克 檸檬酸二胺 2.0 克
吐溫 80 1.0 克 磷酸氫二鉀 2.0 克
七水硫酸鎂 0.2 克 七水硫酸錳 0.05 克
碳酸鈣 20.0 克 瓊脂 20.0 克
蒸餾水 1.0 升 PH 6.8
如果要配制液體培養(yǎng)基，則不用加入碳酸鈣和瓊脂
三、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。請(qǐng)勿長(zhǎng)期置于室溫。
四、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間：細(xì)菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、菌種恢復(fù)培養(yǎng)前，建議將收到的菌種安瓿保存在 6-10°C 的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，延遲期較長(zhǎng)，如在說(shuō)明建議的培養(yǎng)時(shí)間還未長(zhǎng)起來(lái)，請(qǐng)繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時(shí)或者更長(zhǎng)時(shí)間，直至菌種培養(yǎng)完成，有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)，一般來(lái)說(shuō)菌種培養(yǎng)穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3、初次使用時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)推薦條件和操作步驟進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類(lèi)型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，我單位不負(fù)責(zé)任。
4、恢復(fù)培養(yǎng)厭氧菌時(shí)，在操作過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制厭氧條件：制作培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)使用厭氧螺口試管，并利用高純氮?dú)馊コ嚬芎团囵B(yǎng)基中的氧氣，使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
五、凍干管打管說(shuō)明書(shū)
1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂（應(yīng)避免過(guò)多水蒸氣影響菌種的復(fù)蘇），用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml（建議勿超過(guò) 0.5ml）適宜的液體培養(yǎng)基(不添加瓊脂)，滴入管內(nèi)，輕輕振蕩，待安瓿管內(nèi)的菌體溶解呈懸浮狀，在用無(wú)菌吸管吸取全部菌懸液接在 1-2 支建議的培養(yǎng)基試管中（不超過(guò) 2 支，單位所提供的培養(yǎng)基配方中有瓊脂，請(qǐng)務(wù)必做成試管斜面，配方中沒(méi)有瓊脂，試管中液體培養(yǎng)基不超過(guò) 5ml），并在建議的條件下靜止培養(yǎng)。
3、凍干管打開(kāi)后需一次用完，不能留存。
4、另外，安瓿管內(nèi)大部分是用牛奶做保護(hù)劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功。
5、打管操作需由專(zhuān)業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類(lèi)的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
6、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤(pán)上方進(jìn)行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
7、菌種復(fù)蘇時(shí)，請(qǐng)務(wù)必記錄好菌種的編號(hào)和制備批號(hào)，否則不予售后如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏骄旰?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理。
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