微生物菌種冷凍干燥保藏法的操作流程與步驟！
小楊 / 2024-03-12 09:40:57
1、目的
1.1理解冷凍干燥保藏菌種的原理
1.2掌握冷凍干燥保藏菌種的方法
2、原理
冷凍干燥保藏菌種法可克服簡(jiǎn)單保藏方法的不足。利用有利于菌種保藏的—切因素，使微生物始終處于低溫、干燥、缺氧的條件下，因而它是迄今為止最有效的菌種保藏法之一。
3、材料
3.1菌株
待保藏的各種菌種。
3.2試劑
2% HCl；牛奶。
3.3器具
安瓿管、標(biāo)簽、長(zhǎng)滴管、脫脂棉、干冰、離心機(jī)、冷凍真空裝置、高頻電火花器。
4、流程
備安瓿管→備脫脂乳→制菌懸液→分裝→預(yù)凍→真空干燥→保藏→活化
5、步驟
5.1準(zhǔn)備安瓿管
安瓿管先用2%HCl浸泡，再水洗多次，烘干。將標(biāo)簽放入安培管內(nèi)，管口塞上棉花，滅菌備用。
5.2制備脫脂乳
用鮮奶經(jīng)處理或使用脫脂奶粉配兌脫脂牛奶，滅菌，并做無(wú)菌試驗(yàn)后備用。
5.3制菌懸液
將無(wú)菌牛奶直接加到待保藏的菌種斜面內(nèi)，用接種環(huán)將菌種刮下，輕輕攪亂使其均勻地懸浮在牛奶內(nèi)成懸浮液。
5.4分裝
用無(wú)菌長(zhǎng)滴管將懸浮液分裝入安瓿管底部，每支安培管的裝量約為0.9毫升。(一般裝入量為安瓿管球部體積的1／3)
5.5預(yù)凍
將分裝好的安瓿管在-25至-40之間的干冰酒精中進(jìn)行預(yù)凍1小時(shí)；或在冰箱冷凍室進(jìn)行預(yù)東。
5.6真空干燥
預(yù)凍以后，將安瓿管放入真空器中，開(kāi)動(dòng)真空泵進(jìn)行干燥。
5.7封管
封管前將安瓿管裝入歧管；真空度抽至0.01毫米汞拄后，再用火焰熔封，封好后，要用高頻火花器檢查各安瓿管的真空情況。如果管內(nèi)呈現(xiàn)灰藍(lán)色光，證明保持著真空。檢查時(shí)高頻電火花器應(yīng)射向安瓿管的上半部。
5.8保藏
做好的安瓿管應(yīng)放置在低溫避光處保藏。
5.9活化
如果要從中取出菌種恢復(fù)培養(yǎng)，可先用75%酒精將管的外壁消毒，然后將安瓿管上部在火焰上燒熱，再滴幾滴無(wú)菌水，使管子破裂。在用接種針直接挑取松散的干燥樣品，在斜面接種。
6、結(jié)果
6.1簡(jiǎn)述真空冷凍干燥保藏菌種的原理。
6.2記錄大腸桿菌斜面作液體石蠟封藏和枯草桿菌作沙土管保藏的要點(diǎn)。
7、思考
7.1菌種保藏中，石蠟油的作用是什么？
7.2經(jīng)常使用的細(xì)菌菌株，使用那種保藏方法比較好？
7.3沙土管法適合保藏那一類(lèi)微生物？
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有Biolog微生物鑒定系統(tǒng)，超低溫冰箱，生物安全柜等儀器設(shè)備可進(jìn)行對(duì)微生物分離、鑒定等常規(guī)的分子實(shí)驗(yàn)研究。對(duì)我國(guó)生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求進(jìn)行積極的面對(duì)社會(huì)乃至國(guó)外收集保藏提供微生物菌種資源。在保證生物安全和保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的前提下，為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供微生物物種資源、基因資源、信息資源和專(zhuān)業(yè)技術(shù)服務(wù)。
除此之外，我們還擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對(duì)購(gòu)買(mǎi)項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇?，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國(guó)內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長(zhǎng)期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：博伊丁假絲酵母的形態(tài)特征與培養(yǎng)方法及使用范圍！
下一篇：豬B淋巴細(xì)胞收到后的處理方法與培養(yǎng)步驟！