食品微生物學(xué)檢驗的基本原則和要求及操作方法！
小楊 / 2024-05-23 09:01:51
一、范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品微生物學(xué)檢驗基本原則和要求。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品微生物學(xué)檢驗。
二、實驗室基本要求
1、檢驗人員
2、環(huán)境與設(shè)施
3、實驗設(shè)備
4、檢驗用品
5、培養(yǎng)基和試劑
6、質(zhì)控菌株
三、實驗室基本要求
1、檢驗人員
應(yīng)具有相應(yīng)的微生物專業(yè)教育或培訓(xùn)經(jīng)歷，具備相應(yīng)的資質(zhì)，能夠理解并正確實施檢驗。
應(yīng)掌握實驗室生物安全操作和消毒知識。
應(yīng)在檢驗過程中保持個人整潔與衛(wèi)生，防止人為污染樣品
應(yīng)在檢驗過程中遵守相關(guān)安全措施的規(guī)定，確保自身安全
有顏色視覺障礙的人員不能從事涉及辨色的實驗。
2、環(huán)境與設(shè)施
①實驗室環(huán)境不應(yīng)影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
②實驗區(qū)域應(yīng)與辦公區(qū)域明顯分開。
③實驗室工作面積和總體布局應(yīng)能滿足從事檢驗工作的需要,實驗室布局宜采用單方向工作程,避免交叉污染。
④實驗室內(nèi)環(huán)境的溫度、濕度、潔凈度及照度、噪聲等應(yīng)符合工作要求。
⑤食品樣品檢驗應(yīng)在潔凈區(qū)域進(jìn)行,潔凈區(qū)域應(yīng)有明顯標(biāo)示。
⑥病原微生物分離鑒定工作應(yīng)在二級或以上生物安全實驗室進(jìn)行。
3、實驗設(shè)備
實驗設(shè)備應(yīng)滿足檢驗工作的需要，常用設(shè)備見A.1。
實驗設(shè)備應(yīng)放置于適宜的環(huán)境條件下，便于維護(hù)清潔、消毒與校準(zhǔn)，并保持整潔與良好的工作狀態(tài)。
實驗設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行檢查和/或檢定(加貼標(biāo)識)維護(hù)和保養(yǎng)，以確保工作性能和操作安全。
實驗設(shè)備應(yīng)有日常監(jiān)控記錄或使用記錄。
4、檢驗用品
檢驗用品應(yīng)滿足微生物檢驗工作的需求，常用檢驗用品見A.2
檢驗用品在使用前應(yīng)保持清潔和/或無菌。
需要滅菌的檢驗用品應(yīng)放置在特定容器內(nèi)或用合適的材料(如專用包裝紙、鋁箔紙等)包裹或加塞，應(yīng)保證滅菌效果。
檢驗用品的儲存環(huán)境應(yīng)保持干燥和清潔，已滅菌與未滅菌的用品應(yīng)分開存放并明確標(biāo)識。
滅菌檢驗用品應(yīng)記錄滅菌的溫度與持續(xù)時間及有效使用期限。
5、培養(yǎng)基和試劑
培養(yǎng)基和試劑的制備和質(zhì)量要求按照GB4789.28的規(guī)定執(zhí)行。
6、質(zhì)控菌株
實驗室應(yīng)保存能滿足實驗需要的標(biāo)準(zhǔn)菌株。
應(yīng)使用微生物菌種保藏專門機(jī)構(gòu)或?qū)I(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)保存的、可溯源的標(biāo)準(zhǔn)菌株。
標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存、傳代按照GB4789.28的規(guī)定執(zhí)行。
對實驗室分離菌株(野生菌株)，經(jīng)過鑒定后，可作為實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制的菌株
四、樣品的采集
1、采樣原則：
樣品的采集應(yīng)遵循隨機(jī)性、代表性的原則。
采樣過程遵循無菌操作程序，防止一切可能的外來污染。
2、采樣方案
2.1根據(jù)檢驗自的、食品特點、批量、檢驗方法、微生物的危害程度等確定采樣方案
2.2采樣類型
二級采樣方案設(shè)有n、c和m值
三級采樣方案設(shè)有n、C、m和M值
n:同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù)
c:最大可允許超出m值的樣品數(shù)。
m:微生物指標(biāo)可接受水平的限量值(三級采樣方案)或最高安全限值(三級采樣方案)
M:微生物指標(biāo)的最高安全限量值
注1:二級采樣方案在n個樣品中
允許有≤c個樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗值大于m值
注2:三級采樣方案在n個樣品中
允許全部樣品中相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗值小于或等于m值;
允許有≤c個樣品其相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗值在m值和M值之間;
不允許有樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗值大于M值。
按采樣方案的結(jié)果判定
按三級采樣方案設(shè)定的指標(biāo):n=5，c=2,m= 100CFU/g,，M= 1000CFU/g
若5個樣品的檢驗結(jié)果均小于或等于m值(≤100CFU/g) √
若≤2個樣品位于m和M之間(100CFU/g<x≤1000CFU/g) √
若3個及以上樣品的檢驗結(jié)果位于m值和M值之間 X
若有任一樣品的檢驗結(jié)果大于M值(> 1000CFU/g ) X
2.3各類食品的采樣方案按食品安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定執(zhí)行。
2.4食品安全事故中食品樣品的采集:
a)由批量生產(chǎn)加.工的食品污染導(dǎo)致的食品安全事故，食品樣品的采集和判定原則按第2條和第3條執(zhí)行，重點采集同批次食品樣品。
b)由餐飲單位或家庭烹調(diào)加工的食品導(dǎo)致的食品安全事故重點采集現(xiàn)場剩余食品樣品,以滿足食品安全事故病因判定和病原確證的要求。
3、各類食品的采樣方法
①預(yù)包裝食品
應(yīng)采集相同批次、獨立包裝、適量件數(shù)的食品樣品，每件樣品的采樣量應(yīng)滿足微生物指標(biāo)檢驗的要求。
獨立包裝小于、等于1000g的固態(tài)食品或小于、等于1000mL的液態(tài)食品，取相同批次的包裝。
獨立包裝大于1000mL的液態(tài)食品,應(yīng)在采樣前搖動或用無菌棒攪拌液體，使其達(dá)到均質(zhì)后采集適量樣品,放入同一個無菌采樣容器內(nèi)作為一件食品樣品；大于1000g的固態(tài)食品，應(yīng)用無菌采樣器從同一包裝的不同部位分別采取適量樣品，放入同一個無菌采樣容器內(nèi)作為一件食品樣品。
②散裝食品或現(xiàn)場制作食品:
用無菌采樣工具從n個不同部位現(xiàn)場采集樣品,放入n個無菌采樣容器內(nèi)作為n件食品樣品。每件樣品的采樣量應(yīng)滿足微生物指標(biāo)檢驗單位的要求。
4、采集樣品的標(biāo)記
應(yīng)對采集的樣品進(jìn)行及時、準(zhǔn)確的記錄和標(biāo)記,內(nèi)容包括采樣人、采樣地點、時間、樣品名稱、來源、 批號、數(shù)量、保存條件等信息。
5、采集樣品的貯存和運輸
應(yīng)盡快將樣品送往實驗室檢驗。
應(yīng)在運輸過程中保持樣品完整。
應(yīng)在接近原有貯存溫度條件下貯存樣品,或采取必要措施防止樣品中微生物數(shù)量的變化。
五、檢驗
1、樣品處理
1.1 實驗室接到送檢樣品后應(yīng)認(rèn)真核對登記,確保樣品的相關(guān)信息完整并符合檢驗要求。
1.2 實驗室應(yīng)按要求盡快檢驗。若不能及時檢驗,應(yīng)采取必要的措施,防止樣品中原有微生物因客 觀條件的干擾而發(fā)生變化。
1.3 各類食品樣品處理應(yīng)按相關(guān)食品安全標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法的規(guī)定執(zhí)行。
2、樣品檢驗
按食品安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定進(jìn)行檢驗。
六、生物安全與質(zhì)量控制
1、實驗室生物安全要求
應(yīng)符合 GB19489的規(guī)定。
2、質(zhì)量控制
實驗室應(yīng)根據(jù)需要設(shè)置陽性對照、陰性對照和空白對照,定期對檢驗過程進(jìn)行質(zhì)量控制。
實驗室應(yīng)定期對實驗人員進(jìn)行技術(shù)考核。
七、記錄與報告
1、記錄
檢驗過程中應(yīng)即時、客觀地記錄觀察到的現(xiàn)象、結(jié)果和數(shù)據(jù)等信息。
2、報告
實驗室應(yīng)按照檢驗方法中規(guī)定的要求,準(zhǔn)確、客觀地報告檢驗結(jié)果。
八、檢驗后樣品的處理
檢驗結(jié)果報告后,被檢樣品方能處理。
檢出致病菌的樣品要經(jīng)過無害化處理。
檢驗結(jié)果報告后,剩余樣品和同批產(chǎn)品不進(jìn)行微生物項目的復(fù)檢。
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