EASYSPIN細菌RNA快速提取試劑盒的提取方法與注意事項！
小楊 / 2024-06-25 08:49:06
一、知識概述
EASYSPIN細菌RNA快速提取試劑盒采用獨特的裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶，然后用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后，RNA在高鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)玻璃纖維素膜，再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟，去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的RNasefreeH20將純凈RNA從玻璃纖維素膜上洗脫。
二、產(chǎn)品特點
1、離心吸附柱內(nèi)玻璃纖維素膜全部采用進口特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好?？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2、不使用有毒的苯酚，氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
3、快速簡捷，單個樣品操作一般可在30分鐘內(nèi)完成。
4、多次過柱漂洗可確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.9-2.0，基本無DNA殘留，可用于RT-PCR，Northern-blot和各種實驗。
三、使用范圍
適用于快速提取細菌總RNA。
四、提取方法
細菌RNA快速提取試劑盒基于獨特的裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶，然后用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后，總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的去蛋白、漂洗的步驟將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的RNaseFreeH2O將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
五、注意事項
1、裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
2、所有離心操作步驟，均可在室溫（15-25℃）下進行。
3、提取細菌RNA需先配制加了溶菌酶或者Lysostaphin的TE（10mMTris-HCl，1mMEDTA），TE中已加入溶菌酶或者Lysostaphin，濃度為1mg/mL。
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