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固體培養(yǎng)基質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)之物理化學(xué)與微生物學(xué)指標(biāo)!
小楊 / 2025-05-07 09:06:45

 

百歐博偉生物:常用固體培養(yǎng)基的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)通常涵蓋物理化學(xué)、微生物學(xué)及無(wú)菌性等多個(gè)方面,以確保培養(yǎng)基的性能和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。以下是主要質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及示例:
 
一、物理化學(xué)指標(biāo)
 
1、pH值
 
不同培養(yǎng)基的pH范圍需符合規(guī)定(如營(yíng)養(yǎng)瓊脂:7.2±0.2;麥康凱瓊脂:7.1±0.2)。
 
檢測(cè)方法:使用校準(zhǔn)后的pH計(jì)測(cè)量滅菌后的培養(yǎng)基。
 
2、凝膠強(qiáng)度
 
瓊脂濃度需適中,確保培養(yǎng)基凝固均勻、無(wú)裂紋(通常瓊脂含量1.5%-2.0%)。
 
檢測(cè)方法:傾注平板后觀察凝固狀態(tài),傾斜45°不流動(dòng)。
 
3、水分含量
 
干燥培養(yǎng)基的水分含量需≤5%,避免結(jié)塊或潮解。
 
4、外觀
 
顏色均勻(如血瓊脂呈暗紅色,SS瓊脂呈淺黃色),無(wú)雜質(zhì)、氣泡或干裂。
 
二、微生物學(xué)指標(biāo)
 
1、生長(zhǎng)率測(cè)試
 
目標(biāo)菌:接種標(biāo)準(zhǔn)菌株(如大腸埃希氏菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923),培養(yǎng)后觀察菌落大小、形態(tài)是否典型。
 
合格標(biāo)準(zhǔn):菌落數(shù)量與理論值差異≤50%,且無(wú)抑制現(xiàn)象。
 
2、選擇性培養(yǎng)基測(cè)試
 
支持目標(biāo)菌生長(zhǎng):如麥康凱瓊脂上大腸埃希氏菌應(yīng)形成紅色菌落。
 
抑制非目標(biāo)菌:如麥康凱瓊脂上金黃色葡萄球菌應(yīng)被抑制。
 
示例:SS瓊脂應(yīng)支持沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)(黑色菌落),抑制大腸埃希氏菌。
 
3、特異性反應(yīng)
 
生化反應(yīng)驗(yàn)證(如巧克力瓊脂上的流感嗜血桿菌需依賴V因子生長(zhǎng))。
 
三、無(wú)菌性檢查
 
抽樣檢測(cè)
 
隨機(jī)抽取3%-5%的培養(yǎng)基平板,置合適溫度培養(yǎng)24-48小時(shí),觀察有無(wú)污染菌生長(zhǎng)。
 
合格標(biāo)準(zhǔn):無(wú)任何微生物生長(zhǎng)。
 
四、穩(wěn)定性與儲(chǔ)存條件
 
1、有效期
 
未開(kāi)封干燥培養(yǎng)基:2-25℃保存,有效期2-3年。
 
已滅菌液體培養(yǎng)基:2-8℃保存,建議1周內(nèi)使用。
 
傾注平板:密封后2-8℃保存≤1個(gè)月,避免干燥。
 
2、復(fù)溶與滅菌驗(yàn)證
 
滅菌后培養(yǎng)基需重新檢測(cè)pH和性能,避免過(guò)熱破壞成分(如血瓊脂避免高溫滅菌)。
 
五、標(biāo)準(zhǔn)菌株與質(zhì)控頻率
 
1、標(biāo)準(zhǔn)菌株
 
使用ATCC或等效機(jī)構(gòu)提供的菌株(如銅綠假單胞菌ATCC 27853用于選擇性測(cè)試)。
 
2、質(zhì)控頻率
 
每批新購(gòu)培養(yǎng)基需檢測(cè);常規(guī)使用中每季度或更換供應(yīng)商時(shí)復(fù)查。
 
六、常見(jiàn)培養(yǎng)基示例
 
培養(yǎng)基類(lèi)型    關(guān)鍵質(zhì)控點(diǎn)
 
營(yíng)養(yǎng)瓊脂      大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)良好,菌落直徑≥1mm。
 
血瓊脂        支持鏈球菌生長(zhǎng)(β-溶血),抑制雜菌;無(wú)菌溶血或變色。
 
巧克力瓊脂    流感嗜血桿菌生長(zhǎng)良好,無(wú)結(jié)晶析出。
 
麥康凱瓊脂    大腸埃希氏菌呈紅色菌落,金黃色葡萄球菌被抑制。
 
SS瓊脂       沙門(mén)氏菌形成黑色中心菌落,大腸埃希氏菌部分或完全抑制。
 
七、記錄與報(bào)告
 
記錄所有質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)(pH、菌株生長(zhǎng)情況、無(wú)菌性結(jié)果等)。
 
不合格批次需標(biāo)識(shí)、隔離并追溯原因。
 
八、總結(jié)
 
固體培養(yǎng)基的質(zhì)控需結(jié)合物理化學(xué)驗(yàn)證、微生物性能測(cè)試及無(wú)菌性檢查,遵循標(biāo)準(zhǔn)操作流程。定期質(zhì)控可確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性,避免因培養(yǎng)基問(wèn)題導(dǎo)致的假陰性/陽(yáng)性結(jié)果。
 
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