微生物檢驗(yàn)常用生化反應(yīng)的原理與實(shí)驗(yàn)方法及應(yīng)用與結(jié)果！
小楊 / 2025-05-07 10:20:35
百歐博偉生物：在微生物檢驗(yàn)中，生化反應(yīng)是鑒定細(xì)菌或其他微生物的重要方法，通過檢測微生物對不同底物的代謝能力（如產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、酶活性等）來區(qū)分其種類。以下是常用的生化反應(yīng)及其原理和應(yīng)用：
一、糖（醇）發(fā)酵試驗(yàn)
1、原理：檢測微生物是否發(fā)酵特定糖（如葡萄糖、乳糖）或醇類產(chǎn)酸或產(chǎn)氣。
2、方法：將菌種接種至含糖培養(yǎng)基（如酚紅肉湯），加入杜氏管觀察產(chǎn)氣。
3、應(yīng)用：
產(chǎn)酸：指示劑（酚紅）變黃色。
產(chǎn)氣：杜氏管內(nèi)有氣泡。
示例：
大腸桿菌（發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣）；
沙門氏菌（不發(fā)酵乳糖）。
二、IMViC試驗(yàn)（用于腸桿菌科鑒定）
1、吲哚試驗(yàn)（Indole test）：
檢測細(xì)菌能否分解色氨酸生成吲哚。
試劑：柯氏試劑（對二甲氨基苯甲醛）。
結(jié)果：液面顯紅色為陽性（如大腸桿菌陽性，產(chǎn)氣腸桿菌陰性）。
2、甲基紅試驗(yàn)（Methyl red test）：
檢測產(chǎn)酸能力（pH ≤4.5）。
試劑：甲基紅指示劑。
結(jié)果：紅色為陽性（如大腸桿菌陽性，產(chǎn)氣腸桿菌陰性）。
3、V-P試驗(yàn)（Voges-Proskauer test）：
檢測細(xì)菌生成乙酰甲基甲醇的能力。
試劑：α-萘酚和KOH。
結(jié)果：紅色為陽性（如產(chǎn)氣腸桿菌陽性，大腸桿菌陰性）。
4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（Citrate utilization）：
檢測能否利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源。
培養(yǎng)基：西蒙氏枸櫞酸鹽培養(yǎng)基。
結(jié)果：變藍(lán)色為陽性（如產(chǎn)氣腸桿菌陽性，大腸桿菌陰性）。
三、氧化酶試驗(yàn)
原理：檢測細(xì)胞色素氧化酶（參與電子傳遞鏈）。
試劑：四甲基對苯二胺（氧化酶試紙或試劑）。
結(jié)果：30秒內(nèi)顯紫色為陽性（如
銅綠假單胞菌陽性，腸桿菌科陰性）。
四、過氧化氫酶試驗(yàn)（觸酶試驗(yàn)）
原理：檢測是否產(chǎn)生過氧化氫酶（分解H?O?為水和氧氣）。
方法：滴加3% H?O?于菌落上。
結(jié)果：產(chǎn)生氣泡為陽性（如葡萄球菌陽性，鏈球菌陰性）。
五、凝固酶試驗(yàn)
方法：菌落與兔血漿混合，37℃孵育。
六、尿素酶試驗(yàn)
原理：檢測細(xì)菌能否分解尿素產(chǎn)氨。
培養(yǎng)基：尿素瓊脂（含酚紅指示劑）。
結(jié)果：變紅色為陽性（如變形桿菌陽性，大腸桿菌陰性）。
七、硫化氫（H?S）試驗(yàn)
原理：檢測細(xì)菌分解含硫氨基酸（如胱氨酸）產(chǎn)生H?S。
培養(yǎng)基：含鐵離子的培養(yǎng)基（如TSI斜面、SIM培養(yǎng)基）。
結(jié)果：黑色沉淀為陽性（如
沙門氏菌可能陽性）。
八、明膠液化試驗(yàn)
原理：檢測細(xì)菌分泌明膠酶的能力。
方法：穿刺接種明膠培養(yǎng)基，4℃冷藏后觀察是否液化。
結(jié)果：明膠液化（呈液態(tài)）為陽性（如
銅綠假單胞菌陽性）。
九、硝酸鹽還原試驗(yàn)