微生物實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿的管理要點(diǎn)與規(guī)范及安全注意事項(xiàng)!
小楊 / 2025-06-10 09:08:21
百歐博偉生物:微生物實(shí)驗(yàn)室的玻璃器皿管理是保障實(shí)驗(yàn)安全、結(jié)果準(zhǔn)確和人員健康的核心環(huán)節(jié)。其管理涉及從采購、使用、清洗、滅菌、儲(chǔ)存到報(bào)廢的全生命周期。以下是一套系統(tǒng)化的管理要點(diǎn):
核心原則:無菌、潔凈、無殘留、無損傷、可追溯
一、采購與驗(yàn)收:
1、材質(zhì)要求:首選耐高溫高壓(121°C以上)的硼硅酸鹽玻璃,具有低膨脹系數(shù)、耐化學(xué)腐蝕、耐熱沖擊性能。
2、規(guī)格與標(biāo)識(shí):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適規(guī)格。新購入器皿應(yīng)有清晰、持久的體積刻度(最好蝕刻)和耐高溫標(biāo)識(shí)。
3、質(zhì)量檢查:驗(yàn)收時(shí)檢查是否有裂紋、氣泡、劃痕、變形或刻度模糊不清。劣質(zhì)玻璃在滅菌或?qū)嶒?yàn)中易破裂,造成危險(xiǎn)。
二、使用:
1、明確用途:不同器皿(培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、移液管、量筒、燒杯等)有特定用途,嚴(yán)禁混用,尤其避免盛裝強(qiáng)腐蝕性或劇毒物質(zhì)后未經(jīng)徹底處理用于微生物實(shí)驗(yàn)。
2、無菌操作:
接觸微生物培養(yǎng)物或無菌區(qū)域的器皿必須預(yù)先滅菌。
開啟滅菌包裝/容器時(shí)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,避免手部或環(huán)境微生物污染。
3、避免污染:
使用過程中防止口、手接觸器皿內(nèi)壁及管口。
移液管必須使用移液器或洗耳球,嚴(yán)禁口吸。
暫時(shí)不用的滅菌器皿應(yīng)及時(shí)蓋好蓋子或封口。
4、安全操作:小心取放,避免碰撞。處理熱玻璃(如剛滅菌后)需使用隔熱手套。
三、污染后處理與清洗:
最關(guān)鍵步驟!目標(biāo)是去除所有有機(jī)物、無機(jī)物殘留及潛在的微生物污染物。
1、初步處理(立即?。?/strong>
含病原微生物的器皿:必須先滅菌(高壓蒸汽滅菌121°C,15-30分鐘)后清洗!嚴(yán)禁直接清洗,以防生物安全風(fēng)險(xiǎn)。
非病原微生物/普通培養(yǎng)物器皿:使用后立即浸泡在含有適量消毒劑(如1%次氯酸鈉溶液、70%乙醇)的水中,防止培養(yǎng)物干涸難以清洗。
2、去除污染物:
倒掉內(nèi)容物(遵循生物安全規(guī)定)。
用刷子(試管刷、瓶刷)蘸取洗滌劑(實(shí)驗(yàn)室專用中性或堿性洗滌劑)徹底刷洗內(nèi)外壁。對于頑固殘留,可浸泡在洗滌劑溶液中過夜。
特殊殘留:
油脂類:用熱堿液或有機(jī)溶劑清洗。
蛋白質(zhì)、核酸等有機(jī)物:考慮使用蛋白酶、核酸酶溶液浸泡。
無機(jī)鹽、金屬離子:用稀酸浸泡后徹底沖洗。
3、強(qiáng)效清洗(必要時(shí)):
重鉻酸鉀洗液(鉻酸洗液):傳統(tǒng)強(qiáng)效氧化洗液,對去除有機(jī)殘留效果極佳。但劇毒、致癌、強(qiáng)腐蝕、污染環(huán)境!使用必須極其謹(jǐn)慎:
僅用于最難清洗的器皿(如比色皿、定量實(shí)驗(yàn)器皿)。
嚴(yán)格防護(hù):耐酸手套、護(hù)目鏡、防護(hù)服、通風(fēng)櫥內(nèi)操作。
器皿需干燥后浸泡(防止稀釋失效)。
浸泡時(shí)間不宜過長(通常數(shù)小時(shí)至過夜)。
回收利用直至顏色變綠失效。
廢棄處理:必須作為危險(xiǎn)化學(xué)廢物嚴(yán)格收集處理,嚴(yán)禁隨意傾倒!
替代方案(推薦):盡量使用環(huán)保型商業(yè)實(shí)驗(yàn)室專用強(qiáng)效清洗劑(如堿性過氧化物清洗劑、含螯合劑的清洗劑)替代鉻酸洗液,效果接近且更安全環(huán)保。
4、徹底沖洗:
用自來水反復(fù)、充分沖洗器皿內(nèi)外壁,至少10次以上,確保無任何洗滌劑或清洗劑殘留(殘留會(huì)影響微生物生長或后續(xù)實(shí)驗(yàn))。
最終漂洗:必須使用去離子水或蒸餾水沖洗2-3次,去除自來水中的離子,防止烘干后留下水漬。
5、干燥:
自然晾干:倒置在潔凈、無塵的瀝水架或烘箱專用托盤上,置于通風(fēng)、防塵處自然晾干。是首選方式,尤其對于不能烘干的器皿(如帶刻度量器)。
烘箱烘干:設(shè)置溫度60-80°C(避免過高溫度導(dǎo)致玻璃應(yīng)力變化或損壞刻度)。適用于耐高溫且需快速干燥的器皿(如試管、培養(yǎng)皿、三角瓶)。確保內(nèi)部完全干燥。
四、滅菌:
1、目的:殺死所有微生物,包括芽孢。
2、方法:
高壓蒸汽滅菌法(首選):121°C, 15 psi, 15-30分鐘(具體時(shí)間根據(jù)裝載量和器皿類型調(diào)整)。適用于絕大多數(shù)耐熱玻璃器皿。
干熱滅菌法:160-180°C, 2小時(shí)以上。適用于不耐濕熱(如帶鋒利邊緣的器皿、粉劑、油劑容器)或要求絕對干燥的器皿(如用于高溫烘干的空瓶)。注意:溫度過高或時(shí)間過長可能損壞玻璃或刻度。
3、包裝:
滅菌前需妥善包裝以保證滅菌后無菌狀態(tài):
培養(yǎng)皿:裝入不銹鋼筒或?qū)S眉埓?塑料盒。
試管、三角瓶:管口/瓶口用透氣性封口膜(如醫(yī)用透氣膠帶、專用滅菌封口紙)、鋁箔或棉塞(需外加牛皮紙包扎)封好。
移液管:尖端塞入脫脂棉(防污染),放入金屬筒或?qū)S眉埓?/div>
4、滅菌驗(yàn)證:定期使用化學(xué)指示卡/膠帶和生物指示劑(如
嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子條)驗(yàn)證滅菌效果。
5、冷卻與取出:滅菌后,讓壓力自然降至零,溫度降至80°C以下再打開鍋門,防止玻璃因驟冷爆裂和蒸汽燙傷。取出時(shí)避免觸碰封口材料內(nèi)側(cè)。
五、儲(chǔ)存:
1、環(huán)境:清潔、干燥、無塵的專用柜或區(qū)域。避免陽光直射。
2、包裝:
保持滅菌時(shí)的包裝狀態(tài)直至使用前打開。
未滅菌的潔凈干燥器皿也應(yīng)加蓋或用潔凈材料覆蓋防塵。
3、狀態(tài)標(biāo)識(shí):儲(chǔ)存區(qū)域或容器上應(yīng)有清晰標(biāo)識(shí)(如“已滅菌 - 無菌” / “已清洗 - 待滅菌” / “潔凈 - 非無菌”)。
4、有效期:對已滅菌物品應(yīng)標(biāo)注滅菌日期,并遵循實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的有效期限(通常1-4周,視包裝和儲(chǔ)存條件而定),過期需重新滅菌。
5、取用原則:遵循“先進(jìn)先出”。
六、檢查與維護(hù):
1、日常檢查:每次使用前后及清洗過程中,仔細(xì)檢查器皿是否有:
裂紋、缺口、星痕:立即淘汰!高壓滅菌時(shí)易爆炸,使用中易破裂。
嚴(yán)重劃痕:影響透明度,易藏污納垢難以清洗滅菌。
變形:可能導(dǎo)致密封不嚴(yán)或受熱不均破裂。
刻度模糊不清:影響定量實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性。
2、清洗效果檢查:清洗干燥后,器皿內(nèi)壁應(yīng)形成均勻水膜(不掛水珠),表明無油脂殘留。掛水珠需重新清洗。
七、報(bào)廢:
1、報(bào)廢標(biāo)準(zhǔn):
有裂紋、缺口、嚴(yán)重劃痕、變形。
刻度嚴(yán)重磨損或模糊無法辨認(rèn)。
經(jīng)多次清洗仍無法去除頑固殘留。
因接觸劇毒或放射性物質(zhì)而無法安全去污。
2、報(bào)廢處理:
普通破損/淘汰器皿:放入專用、堅(jiān)固、有清晰標(biāo)識(shí)(如“碎玻璃”、“銳器”)的耐扎容器中,作為一般實(shí)驗(yàn)室固體廢物處理。
生物污染過的:必須先滅菌,再按普通碎玻璃處理。
化學(xué)污染過的:評(píng)估污染物性質(zhì),按危險(xiǎn)化學(xué)廢物要求處理(如含重金屬、劇毒物)。
放射性污染過的:按放射性廢物管理規(guī)定處理。
嚴(yán)禁混入普通生活垃圾!
八、記錄與管理:
1、建立SOP:制定詳細(xì)的《玻璃器皿清洗滅菌操作規(guī)程》、《玻璃器皿管理規(guī)程》等標(biāo)準(zhǔn)操作程序。
2、使用記錄:關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)建議記錄重要器皿的使用情況(如用于何種實(shí)驗(yàn)、是否接觸特殊物質(zhì))。
3、滅菌記錄:詳細(xì)記錄每次滅菌的日期、設(shè)備編號(hào)、程序參數(shù)、裝載物品、操作者、化學(xué)/生物指示劑結(jié)果。
4、維護(hù)與校準(zhǔn):定期對清洗設(shè)備(如洗瓶機(jī)、超聲波清洗機(jī))、滅菌設(shè)備(高壓鍋、烘箱)進(jìn)行維護(hù)和校準(zhǔn)。
5、培訓(xùn):對所有涉及玻璃器皿操作、清洗、滅菌、管理的人員進(jìn)行充分培訓(xùn),確保其掌握安全操作、清洗滅菌要點(diǎn)、生物安全防護(hù)和廢物處理要求。
安全注意事項(xiàng):
生物安全:處理污染器皿始終是最高優(yōu)先級(jí),嚴(yán)格遵循生物安全等級(jí)要求,務(wù)必先消毒/滅菌后清洗。
化學(xué)安全:使用腐蝕性清洗劑(酸、堿、洗液)時(shí),必須在通風(fēng)櫥內(nèi)操作,佩戴耐化學(xué)腐蝕手套、護(hù)目鏡、防護(hù)服。
物理安全:小心輕放,防止割傷;處理熱玻璃使用隔熱手套;使用耐扎容器處理碎玻璃。
個(gè)人防護(hù):清洗、滅菌、處理破損器皿時(shí),始終佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備(實(shí)驗(yàn)服、手套、護(hù)目鏡/面罩)。
總結(jié):
微生物實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿的有效管理是一個(gè)系統(tǒng)工程,需要實(shí)驗(yàn)室全體人員的高度重視和嚴(yán)格執(zhí)行。核心在于徹底的清洗、可靠的滅菌、規(guī)范的儲(chǔ)存和嚴(yán)格的檢查報(bào)廢。遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(SOP)、強(qiáng)化人員培訓(xùn)、完善記錄管理并始終將安全(生物安全、化學(xué)安全、物理安全)放在首位,是保障實(shí)驗(yàn)室高效、安全運(yùn)行和實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的基石。
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