如何正確使用生物安全柜以確保其防護用途的有效發(fā)揮？
小楊 / 2025-08-01 10:20:04
百歐博偉生物：正確使用生物安全柜是確保其防護功能（保護人員、環(huán)境、樣品）有效發(fā)揮的核心，需嚴格遵循“操作前準備→操作中規(guī)范→操作后處理”的全流程標準，同時結合設備特性和實驗風險控制要求。以下是詳細操作要點：
一、操作前：做好準備，確保設備處于正常狀態(tài)
1、檢查設備狀態(tài)，確認功能正常
外觀與安裝檢查：確保生物安全柜放置平穩(wěn)（遠離門窗、通風口、走動通道等氣流擾動源），前窗玻璃密封良好，工作臺面無破損、無雜物（如無關儀器、紙張）。
核心功能測試：
啟動設備，觀察風機運行是否正常（無異常噪音）；
檢查氣流指示燈（如有）或通過“煙霧測試”（用煙霧發(fā)生器在柜前窗邊緣檢測氣幕是否完整）確認進氣氣流和垂直氣流穩(wěn)定（氣幕可阻止柜內氣體外溢，垂直氣流保護樣品）；
確認 HEPA 過濾器狀態(tài)（通過設備顯示屏或定期檢測報告，確保未堵塞、未破損，一般建議每年由專業(yè)人員檢測一次）。
消毒準備：用 75% 酒精或合適消毒劑（避免使用腐蝕性試劑，如含氯消毒劑可能損壞 HEPA 過濾器）擦拭工作臺面、內側壁、前窗玻璃內側及柜內配件（如支架、移液器架），作用 10-15 分鐘；如需強化消毒，可開啟紫外燈照射 30 分鐘（注意：紫外燈僅用于表面消毒，不能替代化學消毒，且照射時人員需遠離）。
2、準備實驗用品，減少操作中干擾
提前將實驗所需物品（試劑、耗材、儀器等）一次性放入柜內，避免操作中頻繁開關前窗或伸手進出（減少氣流擾動）；
物品擺放遵循“分區(qū)原則”：
清潔區(qū)（靠后）：放置未使用的無菌耗材（如培養(yǎng)皿、吸管）；
操作區(qū)（中間）：作為主要操作臺面，空間預留充足（至少保留 1/3 面積避免遮擋氣流）；
污染區(qū)（靠前）：放置已使用的污染物品（如廢液缸、帶菌培養(yǎng)皿），避免污染清潔物品；
避免放置產生氣流擾動的設備（如離心機、攪拌器），若必須使用，需遠離前窗和出風口。
二、操作中：規(guī)范動作，維持氣流穩(wěn)定和防護效果
1、控制前窗高度，維持氣幕完整性
前窗開啟高度需嚴格遵循設備標識（一般 Ⅱ 級生物安全柜前窗最大開啟高度為 20-25cm），過高會破壞氣幕，導致柜內污染氣體外溢；過低則影響操作，且可能因氣流不暢導致局部污染。
2、保持規(guī)范操作姿勢，減少氣流擾動
手臂伸入柜內時，需緩慢從氣幕下方（前窗開口）垂直進入，避免快速移動或在氣幕處“揮臂”（防止氣流被打亂）；
操作時手臂不要交叉或頻繁進出柜外，不要將頭伸入柜內觀察，面部與前窗保持至少 30cm 距離；
避免在柜內進行劇烈操作（如搖晃試管、傾倒大量液體），防止產生氣溶膠（微小液滴懸浮在空氣中），若需振蕩或離心，需在柜內完成并靜置片刻（讓氣溶膠沉降）后再開蓋。
3、避免污染擴散，保護樣品和環(huán)境
操作銳器（針頭、刀片）時需格外小心，避免劃傷（劃傷可能導致病原體通過傷口感染），使用后立即放入專用銳器盒（置于污染區(qū)，避免打開蓋子時氣溶膠溢出）；
若發(fā)生液體泄漏，立即停止操作：用吸水紙覆蓋泄漏區(qū)域，倒入適量消毒劑（覆蓋范圍大于泄漏面積），靜置 10-15 分鐘后再用鑷子（避免直接接觸）將吸水紙移入專用垃圾袋，并用消毒劑再次擦拭臺面；
實驗中產生的污染廢棄物（如培養(yǎng)物、廢液、污染耗材）需在柜內密封后再移出（如用雙層垃圾袋封裝），避免帶出柜外。
4、保護樣品不受污染
無菌操作（如細胞培養(yǎng)）時，瓶口 / 管口需朝向垂直氣流方向（避免外界雜菌落入），開蓋后需在火焰附近（如酒精燈，注意遠離易燃試劑）短暫灼燒瓶口，再進行移液；
避免在柜內使用易產生塵埃的物品（如普通紙張，可用防水紙質或塑料記錄板），防止塵埃污染樣品。
三、操作后：徹底清潔，確保設備和環(huán)境安全
1、及時消毒，清除殘留污染
實驗結束后，不要立即關閉設備，讓風機繼續(xù)運行 5-10 分鐘（將柜內殘留氣溶膠全部過濾排出）；
用 75% 酒精或消毒劑再次擦拭柜內所有表面（包括前窗內側、工作臺面、角落），特別是污染區(qū)和操作區(qū)；
移出所有物品，分類處理廢棄物（污染物品按生物安全等級要求滅菌后再丟棄），清潔后的無菌耗材放回指定位置。
2、關閉設備，記錄使用狀態(tài)
確認消毒完成后，關閉前窗至“關閉”位置，再關閉風機電源；如需下次使用，可保留紫外燈開啟（無人時）進行持續(xù)消毒；
填寫使用記錄，注明實驗內容、使用時間、設備運行狀態(tài)（如是否有異常）及消毒情況，便于后續(xù)維護和追溯。
3、定期維護，保障長期有效
日常使用中若發(fā)現(xiàn)異常（如風機噪音、氣流不穩(wěn)定、前窗密封不良），立即停止使用并聯(lián)系專業(yè)人員檢修；
遵循設備說明書，定期由專業(yè)機構進行性能檢測（如氣流速度、HEPA 過濾器完整性、泄漏率等），一般每年 1 次；HEPA 過濾器使用壽命約 5-8 年（根據使用頻率和污染程度），達到壽命或檢測不合格時需及時更換。
四、關鍵原則總結
生物安全柜的防護效果依賴“設備正常運行 + 規(guī)范操作”的雙重保障，核心原則是：減少氣流擾動、避免污染擴散、確保消毒徹底。無論是處理低風險的細胞培養(yǎng)，還是高風險的病原微生物，都需嚴格遵循上述流程——任何一個環(huán)節(jié)的疏漏（如操作中頻繁開關前窗、泄漏后未及時消毒）都可能導致防護失效，引發(fā)人員感染或環(huán)境風險。
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