離心前必須平衡樣品:對稱放置的離心管重量差≤0.1g,避免離心時產(chǎn)生劇烈震動損壞儀器或?qū)е聵悠沸孤?/div>
選擇合適的離心轉(zhuǎn)頭和轉(zhuǎn)速:轉(zhuǎn)頭需匹配離心機型號,轉(zhuǎn)速不可超過轉(zhuǎn)頭最大耐受值(查看轉(zhuǎn)頭標簽)。
啟動前確認蓋子扣緊,運行中禁止打開蓋子或觸碰離心機;結(jié)束后待轉(zhuǎn)頭完全停止(轉(zhuǎn)速顯示為 0)再打開,避免樣本飛濺。
離心含生物危害樣本(如病原體)時,需使用密封離心管和防漏轉(zhuǎn)頭,操作后對轉(zhuǎn)頭和腔室用含氯消毒劑擦拭消毒。
3、培養(yǎng)箱
啟動前檢查溫度、濕度(如 CO?培養(yǎng)箱需檢查 CO?濃度)是否符合設(shè)定值,定期(每周)用 75% 酒精擦拭內(nèi)壁,避免霉菌或細菌污染。
放置培養(yǎng)皿 / 瓶時避免堆疊過密,保證氣流循環(huán);取出樣本后及時關(guān)閉門,減少溫度波動。
長期不用時,清空內(nèi)部物品,斷電并保持干燥,防止內(nèi)部部件銹蝕。
4、水浴鍋
加水至水位線以上(避免干燒損壞加熱管),使用去離子水或蒸餾水(減少水垢)。
設(shè)定溫度后等待穩(wěn)定(通常 ±0.5℃)再放入樣品,避免直接接觸加熱管(防止局部過熱導致樣品變性)。
實驗結(jié)束后關(guān)閉電源,倒出余水并清潔內(nèi)壁,定期(每月)用檸檬酸溶液去除水垢。
(二)高風險儀器操作規(guī)范
包括生物安全柜、高壓蒸汽滅菌器、PCR 儀等,需嚴格遵循“屏障防護”和“消毒滅菌”原則。
1、生物安全柜(BSC)
操作前:開啟風機 3-5 分鐘,紫外消毒 30 分鐘(確保無人員暴露),檢查氣流指示燈(正常為綠色)。
操作中:手臂緩慢進出,避免快速移動破壞氣流;樣本和試劑放置在工作臺中央(遠離出風口);禁止在柜內(nèi)書寫或放置無關(guān)物品。
操作后:關(guān)閉紫外,開啟風機 30 分鐘;用 75% 酒精擦拭臺面、側(cè)壁及玻璃門;記錄使用時間和消毒情況。
注:不同等級 BSC(Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ 級)適用場景不同,Ⅱ 級最常用,需定期(每年)檢測氣流速度和密封性。
2、高壓蒸汽滅菌器
裝載:物品體積不超過滅菌器容積的 80%,玻璃器皿瓶口朝上(避免液體溢出),滅菌袋留有縫隙(便于蒸汽穿透)。
運行:根據(jù)物品類型設(shè)置參數(shù)(如生物廢棄物 121℃、30 分鐘,敷料 132℃、4 分鐘);排氣階段需緩慢放氣(避免液體暴沸)。
結(jié)束:待壓力降至 0MPa、溫度<80℃時再打開艙門;取出物品時戴隔熱手套,避免燙傷;定期(每月)用生物指示劑(如
嗜熱脂肪芽孢桿菌)驗證滅菌效果。
3、PCR 儀
操作前:用 75% 酒精清潔樣品槽(避免核酸污染),檢查加熱模塊是否平整(防止樣品管接觸不良)。
加樣:在生物安全柜內(nèi)進行,避免氣溶膠污染;樣品管蓋緊,離心后放入儀器(防止液體掛壁)。
運行:設(shè)置程序后確認無誤再啟動,避免中途開蓋;結(jié)束后立即取出樣品,或 4℃保存(防止產(chǎn)物降解)。
二、防護規(guī)范
防護需構(gòu)建“個人 - 環(huán)境 - 應(yīng)急”三級屏障,降低生物危害(如病原體、毒素)、化學危害(如消毒劑、試劑)和物理危害(如燙傷、刺傷)風險。
(一)個人防護裝備(PPE)
根據(jù)實驗風險等級(生物安全等級 1-4 級,BSL-1 至 BSL-4)選擇,最低要求如下:
1、基礎(chǔ)防護(BSL-1/2):
實驗室外套:長袖、防水材質(zhì),袖口收緊(避免袖口接觸樣品);
手套:一次性丁腈或乳膠手套(接觸生物樣本必戴,每操作 1 小時或污染后立即更換);
護目鏡 / 面罩:在移液、離心、消毒等可能產(chǎn)生飛濺的操作中佩戴;
鞋套:進入 BSL-2 及以上實驗室需穿,避免鞋底污染。
2、高級防護(BSL-3/4):
額外配備正壓防護服(BSL-4)、呼吸防護器、專用防護靴等,需經(jīng)專業(yè)培訓后使用。
(二)實驗室環(huán)境防護
1、分區(qū)管理:
明確劃分清潔區(qū)(辦公區(qū)、試劑準備區(qū))、半污染區(qū)(實驗操作區(qū))、污染區(qū)(樣本處理區(qū)、廢棄物暫存區(qū)),各區(qū)物品不可交叉使用。
污染區(qū)設(shè)置生物危害標識(??),限制無關(guān)人員進入。
2、清潔與消毒:
臺面:每日實驗結(jié)束后用 75% 酒精或 1000mg/L 含氯消毒劑擦拭;
儀器表面:離心機、生物安全柜等使用后立即消毒;
地面:每周用含氯消毒劑拖地 1-2 次,有泄漏時立即處理。
注:不同污染物需選對應(yīng)消毒劑(如病毒用含氯消毒劑,細菌用酒精)。
3、廢棄物處理:
生物廢棄物:放入紅色專用高壓袋,滅菌后交由專業(yè)機構(gòu)處理;
銳器(針頭、刀片):放入防刺穿銳器盒,滿 3/4 時密封處理;
化學廢棄物:分類倒入對應(yīng)試劑回收桶(如酸、堿、有機溶劑分開),禁止混合。
(三)應(yīng)急處理
1、生物暴露(如皮膚接觸病原體、針刺傷):
針刺傷:立即擠壓傷口擠出少量血液,用肥皂水沖洗 5 分鐘,再用 75% 酒精消毒,報告實驗室負責人并記錄暴露源,必要時就醫(yī)(如接種疫苗)。
皮膚接觸:用肥皂水沖洗 15 分鐘,若有傷口需擴大沖洗范圍,消毒后就醫(yī)。
2、化學灼傷(如接觸強酸、強堿):
酸灼傷:立即用大量清水沖洗,再用 5% 碳酸氫鈉溶液中和;
堿灼傷:用大量清水沖洗,再用 2% 硼酸溶液中和;
處理后及時就醫(yī),保留致傷化學品信息。
3、泄漏處理:
少量泄漏(如試管打碎):戴手套和護目鏡,用吸水紙覆蓋,倒上消毒劑(如含氯消毒劑)靜置 30 分鐘,再清理碎片(放入銳器盒),消毒臺面。
大量泄漏(如生物安全柜內(nèi)樣本溢出):撤離人員,關(guān)閉通風,30 分鐘后穿防護服進入,用消毒凝膠覆蓋泄漏區(qū)域,按上述步驟處理,報告負責人。
三、核心原則總結(jié)
“不熟不操作”:任何儀器必須經(jīng)培訓合格后使用,禁止擅自操作。
“防護優(yōu)先”:實驗前檢查 PPE 是否完好,環(huán)境是否符合安全要求。
“及時記錄”:儀器使用、消毒、故障及暴露事件需詳細記錄,便于追溯。
遵循以上規(guī)范可最大限度降低實驗室風險,保障實驗人員安全和實驗結(jié)果可靠性。
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