細菌在培養(yǎng)基上的生長特性是微生物鑒定與臨床診斷的核心依據(jù)?
小楊 / 2025-09-04 10:29:03
百歐博偉生物:細菌在培養(yǎng)基上的生長特性是微生物鑒定、分類及臨床診斷的核心依據(jù),主要通過菌落形態(tài)(宏觀特征)和菌體形態(tài)與排列(微觀特征)體現(xiàn),同時受培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)條件(溫度、氧氣、時間)的顯著影響。以下從宏觀和微觀兩個維度,結合關鍵影響因素與典型實例,系統(tǒng)解析細菌的生長特性:
一、宏觀生長特性:菌落形態(tài)(Colony Morphology)
菌落是細菌在固體培養(yǎng)基表面(或內部)經(jīng)大量繁殖形成的、肉眼可見的單個細菌群體。不同細菌的菌落具有獨特形態(tài),是鑒別細菌的重要“肉眼指標”,核心觀察維度包括以下 6 項:
1、菌落大?。⊿ize)
定義:指菌落的直徑或面積,通常以毫米(mm)為單位,受細菌繁殖速度、培養(yǎng)時間影響。
分類與實例:
大菌落:直徑>5mm,如
枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis),培養(yǎng) 24 小時后菌落可達 6-8mm;
中等菌落:直徑 2-5mm,最常見類型,如
大腸埃希菌(Escherichia coli)、
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus);
小菌落:直徑<2mm,如
結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,因生長緩慢,培養(yǎng) 7-14 天后菌落僅 1-2mm)、淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)。
2、菌落形狀(Shape)
定義:指菌落的平面輪廓,由細菌的運動能力、擴散特性及群體生長方式?jīng)Q定。
常見類型及實例:
形狀類型 特征描述 典型細菌舉例
圓形(Circular) 輪廓規(guī)則,呈正圓形 大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌
不規(guī)則形(Irregular) 輪廓不整齊,邊緣凹凸不平 枯草芽孢桿菌、炭疽芽孢桿菌
絲狀(Filamentous) 呈絨毛狀或棉絮狀,似真菌 放線菌(如鏈霉菌)、結核分枝桿菌
蔓延狀(Spreading) 沿培養(yǎng)基表面擴散生長,無明顯邊緣 變形桿菌(Proteus spp.,有鞭毛易擴散)
臍狀(Umbilicate) 菌落中心凹陷,似肚臍 肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)
3、菌落邊緣(Margin)
定義:指菌落外周的輪廓細節(jié),需結合放大鏡或低倍鏡觀察,比“形狀”更精細。
常見類型:
整齊(Entire):邊緣光滑、清晰,如
大腸埃希菌;
鋸齒狀(Serrate):邊緣呈鋸齒樣凸起,如
銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa);
卷發(fā)狀(Curled):邊緣呈波浪或卷發(fā)樣,如
炭疽芽孢桿菌;
樹枝狀(Dendritic):邊緣呈樹枝分叉狀,少見,如某些放線菌。
4、菌落表面(Surface)
定義:指菌落表面的質地、光澤及是否有特殊結構(如褶皺、黏液),反映細菌的分泌物特性。
常見類型及實例:
光滑(Smooth,S 型):表面濕潤、有光澤,呈黏液狀或半透明,多數(shù)致病性細菌(如
肺炎鏈球菌、
大腸埃希菌)的典型形態(tài)(S 型菌落致病性更強);
粗糙(Rough,R 型):表面干燥、無光澤,呈顆粒狀或褶皺狀,多為細菌變異株(如卡介苗,由牛分枝桿菌減毒形成,菌落粗糙);
黏液狀(Mucoid,M 型):表面黏稠、呈拉絲狀,如肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,有厚莢膜,分泌大量黏液)。
5、菌落顏色與透明度
顏色:多數(shù)細菌菌落為白色或乳白色(如葡萄球菌、鏈球菌),部分細菌因產(chǎn)生色素呈特殊顏色:
金黃色:金黃色葡萄球菌(產(chǎn)生脂溶性金黃色色素,不擴散至培養(yǎng)基);
綠色:銅綠假單胞菌(產(chǎn)生水溶性綠膿素,擴散至培養(yǎng)基使周圍變綠);
紅色:黏質沙雷菌(產(chǎn)生水溶性靈菌紅素,菌落及周圍培養(yǎng)基呈紅色)。
透明度:按透光性可分為透明(如
大腸埃希菌,透過菌落可看清下方文字)、半透明(如鏈球菌)、不透明(如葡萄球菌,無法透過菌落看清文字)。
6、菌落隆起度(Elevation)
定義:指菌落垂直于培養(yǎng)基表面的高度,反映細菌在培養(yǎng)基表面及內部的生長趨勢。
常見類型:
扁平(Flat):菌落與培養(yǎng)基表面幾乎平齊,如
枯草芽孢桿菌;
隆起(Raised):菌落明顯高于培養(yǎng)基表面,如
大腸埃希菌;
臍狀凹陷(Umbonate):菌落中心凸起、邊緣扁平,或中心凹陷,如肺炎鏈球菌。
二、微觀生長特性:菌體形態(tài)與排列
通過革蘭染色或特殊染色(如芽孢染色、莢膜染色)后,在光學顯微鏡下觀察細菌的個體形態(tài)及群體排列,是進一步鑒別細菌的關鍵,核心特征包括:
1、菌體基本形態(tài)(3 類核心類型)
球菌(Coccus):菌體呈球形或橢圓形,直徑 0.5-1μm,按分裂方向和排列方式分類:
葡萄球菌:沿多個平面分裂,排列成不規(guī)則簇狀(似葡萄),如
金黃色葡萄球菌;
鏈球菌:沿一個平面分裂,排列成鏈狀(長短不一),如化膿性鏈球菌;
雙球菌:沿一個平面分裂后兩兩排列,如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌;
四聯(lián)球菌 / 八疊球菌:沿兩個 / 三個垂直平面分裂,分別排列成四聯(lián)狀或立方體狀(少見)。
桿菌(Bacillus):菌體呈桿狀或圓柱形,長短、粗細差異大,常見形態(tài):
短桿菌:菌體短粗(長寬接近),如大腸埃希菌(長 2-3μm,寬 0.5-1μm);
長桿菌:菌體細長,如枯草芽孢桿菌(長 3-5μm,寬 0.5-1μm);
棒狀桿菌:菌體一端或兩端膨大,呈棒狀,如白喉棒狀桿菌;
分枝桿菌:菌體有分枝狀凸起,如結核分枝桿菌。
螺形菌(Spiral bacterium):菌體呈彎曲狀,按彎曲程度分類:
弧菌:菌體呈弧形(1 個彎曲),如霍亂弧菌(呈 “逗點狀”);
螺菌:菌體呈螺旋狀(2-6 個彎曲),如鼠咬熱螺菌;
螺旋體:菌體細長、彎曲呈螺旋狀,且有軸絲(可運動),如梅毒螺旋體(需暗視野顯微鏡觀察)。
2、特殊結構的生長表現(xiàn)
部分細菌在培養(yǎng)基上生長時,會形成特殊結構,可通過染色觀察,輔助鑒定:
芽孢(Spore):某些革蘭陽性桿菌(如
枯草芽孢桿菌、
炭疽芽孢桿菌)在營養(yǎng)缺乏時形成的休眠體,芽孢染色后呈綠色(菌體呈紅色),且芽孢的位置(菌體頂端、中部、末端)和大小(是否大于菌體)具有鑒別意義(如破傷風梭菌的芽孢位于菌體頂端,呈“鼓槌狀”);
莢膜(Capsule):某些細菌(如
肺炎克雷伯菌、
腦膜炎奈瑟菌)分泌的黏液狀物質,莢膜染色后呈“透明暈圈”(菌體呈紫色,莢膜無色),有莢膜的細菌菌落通常為黏液狀(M 型);
鞭毛(Flagellum):有鞭毛的細菌(如
變形桿菌、
銅綠假單胞菌)運動能力強,在培養(yǎng)基上易形成蔓延狀菌落,或通過“動力試驗”(半固體培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng),有鞭毛細菌沿穿刺線擴散生長,無鞭毛細菌僅沿穿刺線生長)判斷。
三、影響細菌生長特性的關鍵因素
細菌的生長特性并非固定不變,受培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)條件影響顯著,實際鑒定中需嚴格控制條件:
1、培養(yǎng)基類型
基礎培養(yǎng)基(如營養(yǎng)瓊脂):提供基本營養(yǎng),適合多數(shù)細菌生長,菌落形態(tài)為“標準形態(tài)”(如大腸埃希菌在營養(yǎng)瓊脂上呈圓形、光滑、乳白色菌落);
鑒別培養(yǎng)基(如麥康凱瓊脂):含特殊指示劑或抑制劑,可區(qū)分不同細菌,如大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,在麥康凱瓊脂上呈紅色菌落,而沙門菌不發(fā)酵乳糖,呈無色菌落;
選擇培養(yǎng)基(如 SS 瓊脂):抑制雜菌生長,僅允許目標菌生長,如 SS 瓊脂抑制革蘭陽性菌,僅革蘭陰性菌(如沙門菌、志賀菌)生長,且因不發(fā)酵乳糖呈無色菌落;
特殊培養(yǎng)基(如羅氏培養(yǎng)基):針對營養(yǎng)需求特殊的細菌,如結核分枝桿菌需在含蛋黃、甘油的羅氏培養(yǎng)基上生長,菌落呈粗糙、菜花狀。
2、培養(yǎng)條件
溫度:多數(shù)細菌為中溫菌(35-37℃),培養(yǎng)后菌落形態(tài)穩(wěn)定;低溫菌(如
李斯特菌,20-25℃)或高溫菌(如
枯草芽孢桿菌,37-42℃)需調整溫度,否則生長緩慢或形態(tài)異常;
氧氣:需氧菌(如葡萄球菌)在有氧環(huán)境下菌落飽滿;厭氧菌(如
破傷風梭菌)需在無氧環(huán)境下生長,菌落通常較小、質地致密;兼性厭氧菌(如大腸埃希菌)有氧或無氧環(huán)境均可生長,但有氧時菌落更大;
培養(yǎng)時間:多數(shù)細菌培養(yǎng) 18-24 小時后菌落形態(tài)成熟(如
大腸埃希菌),但慢生長菌(如
結核分枝桿菌)需培養(yǎng) 7-14 天,菌落才逐漸顯現(xiàn);培養(yǎng)時間過長(如超過 48 小時)可能導致菌落融合、干燥,形態(tài)失真。
四、典型細菌生長特性實例(輔助理解)
為更直觀掌握生長特性的應用,列舉 3 種臨床常見細菌的典型表現(xiàn):
細菌名稱 培養(yǎng)基類型 菌落形態(tài)(宏觀) 菌體形態(tài)與排列(微觀) 關鍵鑒別點
金黃色葡萄球菌 營養(yǎng)瓊脂 圓形(直徑 2-3mm)、光滑、金黃色、不透明,邊緣整齊 革蘭陽性球菌,呈葡萄狀排列 金黃色色素、葡萄狀排列
大腸埃希菌 麥康凱瓊脂 圓形(直徑 2-3mm)、光滑、紅色、半透明,邊緣整齊 革蘭陰性短桿菌,散在排列 發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸(紅色菌落)、短桿菌形態(tài)
銅綠假單胞菌 營養(yǎng)瓊脂 圓形(直徑 2-3mm)、扁平、綠色、表面濕潤,邊緣鋸齒狀 革蘭陰性桿菌,散在排列,有鞭毛 綠膿素(培養(yǎng)基變綠)、鋸齒狀邊緣
五、總結
細菌在培養(yǎng)基上的生長特性是“宏觀菌落形態(tài) + 微觀菌體特征”的綜合體現(xiàn),具有種屬特異性(如葡萄球菌的葡萄狀排列、銅綠假單胞菌的綠色菌落),是微生物鑒定的“基礎工具”。實際應用中,需結合培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)條件(溫度、氧氣、時間)標準化操作,再通過菌落大小、形狀、顏色、邊緣及菌體形態(tài)、排列的綜合判斷,最終實現(xiàn)細菌的初步鑒別(如需精準鑒定,還需結合生化反應、分子生物學方法)。這一特性不僅用于臨床感染的診斷(如通過菌落形態(tài)初步判斷致病菌),也廣泛應用于食品衛(wèi)生檢測(如鑒別食品中的有害細菌)、環(huán)境微生物監(jiān)測等領域。
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