微生物實(shí)驗(yàn)中玻璃器皿清洗后的消毒處理方法及適用場(chǎng)景!
小楊 / 2025-11-27 10:16:09
百歐博偉生物:微生物實(shí)驗(yàn)中玻璃器皿清洗后需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、器皿用途及污染風(fēng)險(xiǎn),選擇合適的消毒或滅菌處理方式,核心是殺滅可能殘留的微生物(包括細(xì)菌、真菌、病毒、芽孢等),避免實(shí)驗(yàn)污染或結(jié)果干擾。以下是常見的消毒處理方法及適用場(chǎng)景:
一、滅菌處理(適用于需無菌環(huán)境的實(shí)驗(yàn))
滅菌是指徹底殺滅所有微生物(包括芽孢),適用于直接接觸培養(yǎng)物、無菌試劑或需嚴(yán)格無菌操作的器皿(如培養(yǎng)皿、試管、吸管、三角燒瓶、接種環(huán)等)。常見滅菌方法:
1、高壓蒸汽滅菌
原理:在 121℃、103.4kPa(1.05kg/cm²)壓力下,維持 20-30 分鐘,利用飽和蒸汽的高溫高壓殺滅包括芽孢在內(nèi)的所有微生物。
適用器皿:大多數(shù)玻璃器皿(如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、吸管等),尤其適合帶橡膠塞、棉塞的器皿(需用透氣紙包裹,避免蒸汽無法穿透)。
注意:
滅菌前器皿需完全干燥,避免滅菌后殘留水分導(dǎo)致污染;
吸管、移液管需單獨(dú)包裝(如用紙包裹或放入專用滅菌盒),防止滅菌后二次污染;
滅菌后需待壓力降至零再打開鍋蓋,避免器皿因驟冷炸裂。
2、干熱滅菌
原理:在干燥空氣環(huán)境中,160-180℃下維持 2-3 小時(shí),通過高溫氧化作用殺滅微生物(芽孢需 160℃以上持續(xù) 2 小時(shí))。
適用器皿:耐高溫、干燥的玻璃器皿(如培養(yǎng)皿、試管、載玻片、蓋玻片、玻璃涂布棒等),尤其適合無法耐受潮濕的器皿(如帶刻度的精密器皿,避免高壓蒸汽導(dǎo)致刻度模糊)。
注意:
器皿需洗凈干燥,避免殘留有機(jī)物碳化;
堆放時(shí)留有空隙,保證熱空氣流通;
溫度不可超過 180℃(否則玻璃易變形或產(chǎn)生裂痕)。
3、灼燒滅菌
原理:直接用火焰(如酒精燈火焰)灼燒,瞬間高溫殺滅微生物。
適用器皿:小件玻璃器皿(如接種環(huán)、接種針、玻璃刮鏟等),通常用于實(shí)驗(yàn)操作過程中的臨時(shí)滅菌,而非清洗后的批量處理。
二、消毒處理(適用于非無菌要求或低風(fēng)險(xiǎn)實(shí)驗(yàn))
消毒是指殺滅或抑制病原微生物(但不一定殺滅芽孢),適用于僅需降低微生物數(shù)量、無需嚴(yán)格無菌的器皿(如用于樣品前處理的燒杯、量筒、漏斗等,或非培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的輔助器皿)。常見消毒方法:
1、化學(xué)消毒
適用場(chǎng)景:用于不耐高溫或無需徹底滅菌的器皿,或作為滅菌前的預(yù)處理。
常用試劑及操作:
75% 酒精:浸泡器皿 30 分鐘以上,可殺滅細(xì)菌繁殖體、真菌和部分病毒,適用于表面消毒;
2% 來蘇爾(甲酚皂溶液):浸泡 1-2 小時(shí),對(duì)細(xì)菌繁殖體效果好,適用于污染較輕的器皿;
0.1% 新潔爾滅:浸泡 30 分鐘,對(duì)革蘭氏陽性菌效果顯著,常用于一般清潔器皿的消毒。
注意:化學(xué)消毒后需用無菌水沖洗去除殘留試劑,避免影響實(shí)驗(yàn)。
2、紫外線消毒
原理:波長(zhǎng) 254nm 的紫外線可破壞微生物 DNA,抑制其繁殖(但穿透力弱,僅作用于表面)。
適用器皿:清洗后、滅菌前的器皿表面消毒,或存放無菌器皿的超凈臺(tái)、無菌柜內(nèi)環(huán)境消毒(需將器皿開蓋或敞口,確保紫外線照射到內(nèi)部)。
注意:需照射 30 分鐘以上,且不能替代滅菌(無法殺滅芽孢和深層微生物)。
三、不同器皿的消毒處理選擇
器皿類型 常見用途 推薦消毒/滅菌方式
培養(yǎng)皿、試管 微生物培養(yǎng)、菌液儲(chǔ)存 高壓蒸汽滅菌(121℃,20-30 分鐘)或干熱滅菌(160℃,2 小時(shí))
吸管、移液管 移取菌液、試劑 高壓蒸汽滅菌(單獨(dú)包裝)或干熱滅菌
載玻片、蓋玻片 顯微觀察(如染色、涂片) 干熱滅菌(160℃,2 小時(shí))或 75% 酒精浸泡后晾干
接種環(huán)、玻璃刮鏟 接種、涂布 灼燒滅菌(實(shí)驗(yàn)時(shí)即時(shí)處理)
燒杯、量筒 配制非無菌試劑、樣品處理 若接觸樣品需滅菌(高壓/干熱),否則可紫外線消毒或沸水浸泡
四、總結(jié)
直接參與微生物培養(yǎng)、接種或無菌操作的器皿,必須進(jìn)行滅菌處理(首選高壓蒸汽滅菌或干熱滅菌);
僅用于輔助操作(如稱量、稀釋非無菌樣品)的器皿,可根據(jù)污染風(fēng)險(xiǎn)選擇消毒處理;
消毒/滅菌后需妥善存放,避免二次污染,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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