食品微生物指標(biāo)檢測方法的具體分類及技術(shù)支持與細(xì)節(jié)！
小楊 / 2026-01-12 10:15:22
百歐博偉生物：食品微生物指標(biāo)的檢測方法可分為傳統(tǒng)培養(yǎng)檢測法、快速檢測法和分子生物學(xué)檢測法三大類，不同方法適用于不同的檢測場景、指標(biāo)類型和效率需求，以下是具體分類及技術(shù)細(xì)節(jié)：
一、傳統(tǒng)培養(yǎng)檢測法
這是食品微生物檢測的經(jīng)典方法，也是國家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的仲裁方法，核心原理是通過人工培養(yǎng)基模擬微生物生長條件，實(shí)現(xiàn)微生物的分離、計(jì)數(shù)和鑒定。
1、菌落總數(shù)測定
原理：將食品樣品稀釋后，涂布于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基表面，36℃±1℃培養(yǎng) 48h±2h，統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)量，換算為每克（或每毫升）樣品中的菌落形成單位（CFU/g/mL）。
操作步驟：樣品均質(zhì)→梯度稀釋→平板涂布→恒溫培養(yǎng)→菌落計(jì)數(shù)。
適用場景：所有食品的衛(wèi)生狀況篩查，是最基礎(chǔ)的微生物指標(biāo)檢測。
2、大腸菌群計(jì)數(shù)/鑒定
多管發(fā)酵法（國標(biāo)仲裁法）
原理：利用大腸菌群發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特性，分初發(fā)酵、復(fù)發(fā)酵、證實(shí)試驗(yàn)三步。初發(fā)酵使用乳糖膽鹽培養(yǎng)基，36℃±1℃培養(yǎng) 24h±2h，觀察產(chǎn)氣情況；產(chǎn)氣樣品轉(zhuǎn)接伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB） 平板，挑取典型菌落進(jìn)行復(fù)發(fā)酵驗(yàn)證。
適用場景：各類食品的糞便污染指示檢測。
平板計(jì)數(shù)法
原理：直接將稀釋樣品涂布于結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA） 平板，36℃±1℃培養(yǎng) 24h±2h，統(tǒng)計(jì)紫紅色、帶有沉淀環(huán)的典型菌落。
優(yōu)勢：操作更簡便，計(jì)數(shù)結(jié)果更直觀。
3、致病菌分離鑒定
增菌培養(yǎng)：針對食品中致病菌含量低、雜菌干擾多的特點(diǎn)，先使用選擇性增菌培養(yǎng)基富集目標(biāo)菌。例如：
沙門氏菌用緩沖蛋白胨水（BPW）預(yù)增菌，再用四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）選擇性增菌；
金黃色葡萄球菌用7.5% 氯化鈉肉湯增菌。
分離培養(yǎng)：將增菌液涂布于選擇性鑒別培養(yǎng)基，挑取典型菌落。例如：
沙門氏菌用沙門氏菌 - 志賀氏菌瓊脂（SS 瓊脂），
金黃色葡萄球菌用血瓊脂平板（觀察溶血現(xiàn)象）和甘露醇高鹽瓊脂。
生化鑒定：通過 API 20E 等生化鑒定試劑盒，檢測菌株的糖發(fā)酵、酶活性等特征，最終確認(rèn)菌種。
4、霉菌和酵母計(jì)數(shù)
原理：使用馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA） 或孟加拉紅培養(yǎng)基（含氯霉素抑制細(xì)菌生長），25℃±1℃培養(yǎng) 5d±1d，統(tǒng)計(jì)霉菌和酵母的菌落數(shù)。
注意：霉菌菌落形態(tài)多樣，需區(qū)分霉菌與酵母菌落，避免計(jì)數(shù)混淆。
二、快速檢測法
這類方法在保證準(zhǔn)確性的前提下，大幅縮短檢測時(shí)間（通常幾小時(shí)內(nèi)出結(jié)果），適用于大批量樣品的快速篩查和現(xiàn)場檢測。
1、免疫層析法（膠體金法）
原理：基于抗原 - 抗體特異性結(jié)合，將目標(biāo)致病菌的抗體固定在檢測試紙條上，樣品中的目標(biāo)菌抗原與抗體結(jié)合后，通過膠體金顆粒顯色判斷結(jié)果。
優(yōu)勢：操作簡單，無需專業(yè)儀器，10-30 分鐘出結(jié)果，適合基層實(shí)驗(yàn)室或現(xiàn)場抽檢。
2、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）
原理：將抗體包被在酶標(biāo)板孔內(nèi)，樣品中的目標(biāo)抗原與抗體結(jié)合后，加入酶標(biāo)記的二抗，通過酶催化底物顯色，用酶標(biāo)儀檢測吸光度值，實(shí)現(xiàn)定性或定量分析。
適用場景：致病菌、霉菌毒素的批量檢測。
優(yōu)勢：靈敏度高，可同時(shí)檢測多個樣品，檢測時(shí)間縮短至 2-6 小時(shí)。
3、微生物快速檢測紙片法
原理：將培養(yǎng)基和指示劑固定在濾紙片上，樣品接種后，微生物生長代謝會改變紙片顏色或產(chǎn)生特定圈暈，根據(jù)反應(yīng)結(jié)果判斷是否超標(biāo)。
常見類型：大腸菌群檢測紙片、菌落總數(shù)檢測紙片等。
優(yōu)勢：便攜、成本低，適合食品生產(chǎn)企業(yè)的在線質(zhì)量控制。
三、分子生物學(xué)檢測法
這類方法基于微生物的核酸序列特異性，靈敏度和特異性極高，是目前精準(zhǔn)度最高的檢測技術(shù)，多用于疑難樣品鑒定和微量致病菌檢測。
1、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）法
原理：提取樣品中微生物的 DNA，設(shè)計(jì)目標(biāo)菌的特異性基因引物，通過 PCR 儀擴(kuò)增靶基因片段，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳觀察特異性條帶，判斷是否存在目標(biāo)菌。
衍生技術(shù)：實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qPCR），在 PCR 反應(yīng)中加入熒光探針，通過實(shí)時(shí)檢測熒光信號強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)菌的定量分析，檢測時(shí)間可縮短至 1-2 小時(shí)。
優(yōu)勢：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可檢測到 10 CFU/g 以下的微量致病菌，能區(qū)分死菌和活菌（需結(jié)合前處理）。
2、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）法
原理：在等溫條件下（60-65℃），通過特異性引物和鏈置換 DNA 聚合酶，快速擴(kuò)增靶基因，擴(kuò)增產(chǎn)物可通過肉眼觀察渾濁度或熒光染料顯色判斷結(jié)果。
優(yōu)勢：無需昂貴的 PCR 儀，等溫條件下 1 小時(shí)內(nèi)完成檢測，適合現(xiàn)場快速檢測。
3、基因芯片法
原理：將多種致病菌的特異性探針固定在芯片表面，樣品核酸經(jīng)標(biāo)記后與芯片雜交，通過掃描芯片熒光信號，可同時(shí)檢測多種目標(biāo)微生物。
適用場景：多菌種高通量篩查，如食源性致病菌的廣譜檢測。
四、其他特殊檢測方法
商業(yè)無菌檢測：針對罐頭、真空包裝食品，通過保溫培養(yǎng)法（30-35℃培養(yǎng) 10 天，25℃培養(yǎng) 10 天），觀察樣品是否出現(xiàn)脹罐、異味、渾濁等變質(zhì)現(xiàn)象，結(jié)合鏡檢判斷是否符合商業(yè)無菌要求。
流式細(xì)胞術(shù)：通過熒光染料標(biāo)記微生物細(xì)胞，利用流式細(xì)胞儀快速計(jì)數(shù)，可區(qū)分活菌和死菌，檢測速度可達(dá)每秒數(shù)千個細(xì)胞。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對購買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇?，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：不只是修復(fù)：干細(xì)胞從單兵作戰(zhàn)到團(tuán)隊(duì)協(xié)作的修復(fù)模式！
下一篇：微生物實(shí)驗(yàn)室超凈工作臺和生物安全柜的適用場景及區(qū)別！