微生物學(xué)實驗室器皿清洗和消毒的具體操作流程及注意事項！
小楊 / 2026-01-16 09:36:01
百歐博偉生物：微生物學(xué)實驗室的器皿清洗和消毒是確保實驗結(jié)果準確性、防止交叉污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。不同類型的器皿（如玻璃、塑料、金屬）和污染程度（如含菌量、有機物殘留）需采用不同的處理方法。以下是具體的操作流程和注意事項：
一、器皿清洗：去除殘留污染物
清洗的核心是徹底去除器皿表面的有機物（如培養(yǎng)基、菌液、細胞碎片）、無機物和微生物殘留，為后續(xù)消毒/滅菌奠定基礎(chǔ)。
1、預(yù)處理（減少污染物附著）
立即處理：實驗后及時清洗器皿，避免污染物（尤其是蛋白質(zhì)、瓊脂）干涸后難以去除。
含瓊脂的器皿（如培養(yǎng)皿、試管）：先用溫水浸泡使瓊脂軟化，倒出后再清洗。
含菌液的器皿（如三角燒瓶、移液管）：先用自來水沖洗去除大部分菌液，避免直接丟棄導(dǎo)致堵塞或污染。
危險污染物處理：若器皿接觸過致病菌、病毒或放射性物質(zhì)，需先進行高壓滅菌滅活（121℃，20min），再按常規(guī)清洗（避免直接接觸導(dǎo)致感染）。
2、分類清洗方法
（1）玻璃器皿（可重復(fù)使用）
普通玻璃器皿（燒杯、量筒、試管等）
初洗：用自來水沖洗表面可見污物，若有殘留（如油漬），可用軟毛刷蘸肥皂水刷洗。
精洗：用去離子水或蒸餾水沖洗 2~3 次，去除自來水中的礦物質(zhì)殘留。
干燥：倒置在烘箱中（80~120℃）烘干，或自然晾干（避免灰塵污染）。
精密玻璃器皿（移液管、血球計數(shù)板、比色杯等）
移液管：先用自來水沖洗，再用鉻酸洗液（強氧化性，去除有機物）浸泡數(shù)小時，取出后用自來水徹底沖洗至無洗液殘留（避免腐蝕），最后用蒸餾水沖洗、烘干。
血球計數(shù)板：禁止用毛刷或硬物刷洗，需用擦鏡紙蘸蒸餾水輕輕擦拭，自然晾干（防止刻度磨損）。
比色杯：避免接觸指紋和劃痕，用蒸餾水沖洗后倒置晾干，禁用超聲波清洗（可能損壞光學(xué)性能）。
（2）塑料器皿（一次性或可重復(fù)使用）
一次性塑料器皿（培養(yǎng)皿、吸頭、采樣管）：通常為無菌包裝，使用后若未污染危險微生物，可直接按醫(yī)療廢棄物處理；若污染，需先滅菌再丟棄。
可重復(fù)塑料器皿（如某些離心管、培養(yǎng)瓶）：
用中性洗滌劑（避免使用強酸強堿，防止腐蝕塑料）浸泡后輕柔刷洗。
自來水沖洗后，用蒸餾水漂洗，60~80℃低溫烘干（高溫可能導(dǎo)致塑料變形）。
（3）金屬器皿（接種環(huán)、鑷子、剪刀等）
先用自來水沖洗去除表面污物，若有有機物殘留，可用 75% 酒精擦拭后灼燒（接種環(huán)直接火焰灼燒滅菌，同時去除殘留），無需復(fù)雜清洗（金屬耐腐蝕性強，但需避免長期接觸強酸）。
3、清洗效果檢查
玻璃器皿洗凈標準：倒置時內(nèi)壁均勻附著一層水膜，無掛珠、無污漬；塑料器皿表面無殘留洗滌劑泡沫。
二、消毒與滅菌：殺滅微生物
清洗后的器皿需根據(jù)用途進行消毒（殺滅病原微生物）或滅菌（殺滅所有微生物，包括芽孢）。微生物實驗室器皿多需滅菌（尤其與培養(yǎng)基、純培養(yǎng)接觸的器皿）。
1、常用滅菌方法
（1）高壓蒸汽滅菌（最常用，適用于耐高溫、耐濕器皿）
適用范圍：玻璃試管、三角燒瓶、培養(yǎng)皿（玻璃）、金屬工具、培養(yǎng)基等。
操作：
將洗凈干燥的器皿放入滅菌籃，玻璃器皿管口朝上（避免積水），培養(yǎng)皿疊放不宜過緊（便于蒸汽穿透）。
滅菌參數(shù)：121℃，103.4kPa（1.05kg/cm²），維持 20~30min（含大量有機物或體積較大時需延長時間）。
滅菌后：待壓力降至 0 后緩慢放氣，取出器皿在無菌操作臺或烘箱中烘干（避免二次污染）。
（2）干熱滅菌（適用于耐高溫、怕濕或需干燥的器皿）
適用范圍：玻璃移液管、載玻片、試管塞（棉塞、硅膠塞）、金屬工具等。
操作：
器皿放入干熱滅菌箱，間距 1~2cm，便于空氣流通。
滅菌參數(shù)：160~170℃，維持 2~3h（180℃則需 30min），溫度不可過高（避免玻璃變形、棉塞碳化）。
滅菌后：自然冷卻至 60℃以下再取出（防止玻璃驟冷炸裂）。
（3）火焰滅菌（快速滅菌，適用于金屬工具）
適用范圍：接種環(huán)、接種針、鑷子尖端等。
操作：將工具在酒精燈火焰上灼燒至紅熱（約 5~10s），冷卻后使用（避免燙死微生物）。
（4）紫外線消毒（表面消毒，輔助滅菌）
適用范圍：無菌操作臺內(nèi)的器皿表面、移液槍等不耐高溫的工具。
操作：紫外線燈（波長 254nm）照射 30min 以上，注意紫外線穿透力弱，需直接照射表面，且對人體有傷害（操作時需離開）。
2、消毒與滅菌的區(qū)別及選擇
消毒：僅殺滅病原微生物（如 75% 酒精擦拭桌面、塑料器皿表面），用于非無菌操作的輔助清潔。
滅菌：殺滅所有微生物（包括芽孢），是微生物培養(yǎng)、分離等實驗的核心要求，必須嚴格執(zhí)行（如培養(yǎng)基、接種工具、培養(yǎng)器皿）。
三、注意事項
分類處理：不同污染程度的器皿分開清洗（如致病菌污染的器皿需先滅菌，再單獨清洗）。
避免損壞：玻璃器皿輕拿輕放，避免碰撞；塑料器皿遠離高溫和有機溶劑（如酒精過量可能導(dǎo)致變形）。
化學(xué)試劑安全：使用鉻酸洗液、強酸強堿時需戴手套和護目鏡，避免直接接觸皮膚和衣物。
滅菌效果驗證：定期用滅菌指示卡（如高壓蒸汽滅菌指示卡變色是否達標）或生物指示劑（如
枯草芽孢桿菌孢子）驗證滅菌效果。
通過規(guī)范的清洗和滅菌流程，可最大限度減少實驗污染風(fēng)險，確保微生物實驗結(jié)果的可靠性。
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