為指導(dǎo)和規(guī)范無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)開(kāi)展無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)，結(jié)合近年來(lái)在無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)GMP認(rèn)證檢查和跟蹤檢查中發(fā)現(xiàn)無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的缺陷情況，國(guó)家食品藥品監(jiān)管總局食品藥品審核查驗(yàn)中心組織起草了《無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌原料藥）》（征求意見(jiàn)稿）和《無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌制劑）》（征求意見(jiàn)稿），現(xiàn)向社會(huì)公開(kāi)征求意見(jiàn)，請(qǐng)于2017年5月31日前將意見(jiàn)和建議反饋我中心。
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無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌制劑）
（征求意見(jiàn)稿）
國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局
食品藥品審核查驗(yàn)中心
二〇一六年十月
目錄
1. 目的
2. 定義
3. 范圍
4. 原則
5. 無(wú)菌制劑生產(chǎn)工藝及模擬范圍
6. 模擬試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)及實(shí)施過(guò)程要求
6.1. 無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的前提條件
6.2. 基于風(fēng)險(xiǎn)的方案設(shè)計(jì)
6.3. 模擬介質(zhì)的選擇與評(píng)價(jià)
6.4. 灌裝數(shù)量及模擬持續(xù)時(shí)間
6.5. 容器裝量
6.6. 模擬試驗(yàn)方法的選擇
6.7. 最差條件的選擇
6.8. 干預(yù)
6.9. 容器規(guī)格
6.10. 培養(yǎng)與觀察
6.11. 計(jì)數(shù)與數(shù)量平衡
6.12. 環(huán)境（包括人員）監(jiān)控
6.13. 人員因素
6.14. 不同劑型應(yīng)考慮的特殊因素
6.15. 方案的實(shí)施
7. 可接受標(biāo)準(zhǔn)與結(jié)果評(píng)價(jià)
8. 污染調(diào)查及糾正措施
9. 模擬試驗(yàn)的周期與再驗(yàn)證
10. 無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的局限性
11. 術(shù)語(yǔ)
12. 參考文獻(xiàn)
無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌制劑）
1.目的
為指導(dǎo)和規(guī)范無(wú)菌制劑生產(chǎn)企業(yè)開(kāi)展無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)，充分評(píng)價(jià)無(wú)菌制劑產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程的無(wú)菌保障水平，確保無(wú)菌制劑的安全性，依據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010版）及附錄，制定本指南。
2.定義
本指南所述的無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)，是指采用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或其他介質(zhì)，模擬制劑生產(chǎn)中無(wú)菌操作的全過(guò)程，評(píng)價(jià)該工藝無(wú)菌保障水平的一系列活動(dòng)。
3.范圍
3.1. 本指南涵蓋了無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的基本要求、不同工藝模式的相應(yīng)要求、試驗(yàn)的基本流程等內(nèi)容，適用于無(wú)菌制劑的無(wú)菌工藝驗(yàn)證。
3.2. 本指南所述條款是在現(xiàn)有無(wú)菌工藝技術(shù)基礎(chǔ)上提出的相關(guān)要求，旨在規(guī)范企業(yè)開(kāi)展無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)活動(dòng)。在科學(xué)的基礎(chǔ)上，鼓勵(lì)新技術(shù)、新設(shè)備的引入，進(jìn)一步提高無(wú)菌制劑的無(wú)菌保障水平。
4.原則
在對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)工藝充分認(rèn)知和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)累積的基礎(chǔ)上，應(yīng)結(jié)合工藝、設(shè)備、人員和環(huán)境等要素定期開(kāi)展無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)，以確認(rèn)無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程的可靠性，同時(shí)也為企業(yè)及時(shí)識(shí)別風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而改進(jìn)無(wú)菌控制措施提供數(shù)據(jù)支持。開(kāi)展無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)應(yīng)遵循以下原則：
4.1. 對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程實(shí)施風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，識(shí)別生產(chǎn)過(guò)程風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，評(píng)估結(jié)果應(yīng)在試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)時(shí)給予考慮。
4.2. 應(yīng)充分考慮硬件裝備水平與無(wú)菌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)性，結(jié)合無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程所涉及到的工藝、設(shè)備、人員以及操作時(shí)限等因素針對(duì)性開(kāi)展模擬試驗(yàn)。盡可能模擬實(shí)際無(wú)菌生產(chǎn)全過(guò)程。應(yīng)特別關(guān)注“開(kāi)放”操作、人工干預(yù)等高風(fēng)險(xiǎn)過(guò)程。
4.3. 如在同一生產(chǎn)線生產(chǎn)不同劑型和容器規(guī)格的產(chǎn)品，應(yīng)考慮模擬試驗(yàn)方案對(duì)各產(chǎn)品無(wú)菌工藝過(guò)程的適用性。應(yīng)對(duì)有顯著差異的無(wú)菌工藝過(guò)程開(kāi)展模擬試驗(yàn)。
5.無(wú)菌制劑生產(chǎn)工藝及模擬范圍
無(wú)菌生產(chǎn)工藝通常包含：經(jīng)除菌過(guò)濾或其他方法獲取無(wú)菌藥液或無(wú)菌粉末，在無(wú)菌條件下進(jìn)行液體灌裝或粉末分裝，容器密封。凍干制劑在液體灌裝的基礎(chǔ)上增加了冷凍干燥過(guò)程。
無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)應(yīng)從無(wú)菌操作的第一步開(kāi)始，直至無(wú)菌產(chǎn)品完全密封結(jié)束。如果在產(chǎn)品制備階段采用了無(wú)菌工藝，此部分工藝也應(yīng)作為模擬驗(yàn)證的一部分。對(duì)于全過(guò)程無(wú)菌生產(chǎn)（如配制后不能除菌過(guò)濾）的產(chǎn)品，無(wú)菌工藝模擬還應(yīng)涵蓋原液配制、半成品配制等無(wú)菌操作過(guò)程。企業(yè)應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的起始工序。
6.模擬試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)及實(shí)施過(guò)程要求
模擬試驗(yàn)是一個(gè)系統(tǒng)性工程，通過(guò)模擬無(wú)菌生產(chǎn)工藝全過(guò)程，證實(shí)生產(chǎn)過(guò)程中無(wú)菌保障措施的有效性。應(yīng)從以下幾方面關(guān)注模擬試驗(yàn)的設(shè)計(jì)與實(shí)施：
6.1. 無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的前提條件
在無(wú)菌工藝模擬實(shí)驗(yàn)之前應(yīng)確認(rèn)與無(wú)菌工藝相關(guān)的支持性系統(tǒng)和滅菌系統(tǒng)的驗(yàn)證已完成，并達(dá)到了可接受的標(biāo)準(zhǔn)。
6.1.1. 工藝設(shè)備、公用系統(tǒng)和輔助設(shè)施已按照預(yù)期完成了安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)及與無(wú)菌生產(chǎn)有關(guān)的性能確認(rèn)。
6.1.2. 已對(duì)工藝設(shè)備、公用系統(tǒng)、輔助設(shè)施的滅菌方法完成了相應(yīng)的驗(yàn)證。物料及廠房、設(shè)施所使用消毒劑及消毒方式完成了相關(guān)的驗(yàn)證。
6.1.3. 已經(jīng)完成了藥液及與產(chǎn)品接觸的氣體、設(shè)備組件及容器的滅菌（除菌）方法驗(yàn)證。
6.1.4. 無(wú)菌生產(chǎn)區(qū)域的氣流及環(huán)境達(dá)到了設(shè)計(jì)要求，并能穩(wěn)定運(yùn)行。
6.1.5. 根據(jù)無(wú)菌生產(chǎn)工藝要求建立了相關(guān)受控操作文件。
6.1.6. 參與無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的人員接受了藥品GMP、無(wú)菌操作、微生物知識(shí)以及實(shí)施模擬試驗(yàn)的培訓(xùn)。
6.1.7. 進(jìn)入無(wú)菌潔凈區(qū)的全部人員通過(guò)了更衣程序的確認(rèn)，并采用文件或其他措施，確認(rèn)了每位參與者可進(jìn)入的區(qū)域和其所允許的無(wú)菌操作項(xiàng)目。
6.2. 基于風(fēng)險(xiǎn)的方案設(shè)計(jì)
模擬試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)應(yīng)結(jié)合無(wú)菌生產(chǎn)工藝，盡量與實(shí)際無(wú)菌操作過(guò)程保持一致，以求試驗(yàn)結(jié)果真實(shí)反映生產(chǎn)過(guò)程的無(wú)菌保障水平。
6.2.1. 無(wú)菌生產(chǎn)工藝的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
無(wú)菌生產(chǎn)工藝的設(shè)計(jì)基于對(duì)產(chǎn)品特性、工藝技術(shù)和無(wú)菌保證措施的認(rèn)知和經(jīng)驗(yàn)的累積。設(shè)計(jì)模擬試驗(yàn)方案前應(yīng)對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程開(kāi)展系統(tǒng)性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以充分識(shí)別無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程中潛在風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)。
6.2.2. 模擬試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)考察和評(píng)估高風(fēng)險(xiǎn)的無(wú)菌操作過(guò)程。無(wú)菌生產(chǎn)工藝的暴露操作是影響最終產(chǎn)品無(wú)菌特性的重要環(huán)節(jié)，如設(shè)備（或管道）的無(wú)菌連接、無(wú)菌容器的轉(zhuǎn)運(yùn)和更換、灌裝等關(guān)鍵操作。模擬試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)應(yīng)考察以上過(guò)程無(wú)菌保證措施的有效性。
6.2.3. 證實(shí)無(wú)菌操作人員能滿足無(wú)菌生產(chǎn)要求，是實(shí)施模擬試驗(yàn)的目的之一。進(jìn)行模擬試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)結(jié)合工藝過(guò)程中的“開(kāi)放”環(huán)節(jié)，重點(diǎn)考察有人員參與的關(guān)鍵操作，評(píng)價(jià)人員無(wú)菌操作素養(yǎng)和防護(hù)措施的可靠性。
6.3. 模擬介質(zhì)的選擇與評(píng)價(jià)
6.3.1. 模擬介質(zhì)的選擇
應(yīng)結(jié)合被模擬產(chǎn)品的特點(diǎn)以及模擬介質(zhì)的可過(guò)濾性、澄清度、滅菌方式等選擇合適的模擬介質(zhì)。不應(yīng)選擇明顯具有抑菌性的模擬介質(zhì)，以確保模擬試驗(yàn)結(jié)果的可信度。通常可采用的模擬介質(zhì)包括促進(jìn)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基和安慰劑。
6.3.2 培養(yǎng)基的選擇
6.3.2.1 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）是一種廣譜性培養(yǎng)基，特別對(duì)無(wú)菌工藝環(huán)境中源自人體的細(xì)菌、芽孢和真菌有良好的促生長(zhǎng)效果，是無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)常用的培養(yǎng)基。
6.3.2.2 如果產(chǎn)品需充入惰性氣體、儲(chǔ)存在無(wú)氧條件，無(wú)菌操作在嚴(yán)格的厭氧環(huán)境中進(jìn)行時(shí)（即氧氣濃度低于0.1%），應(yīng)考慮采用厭氧培養(yǎng)基，如硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基（FTM）。在厭氧的無(wú)菌工藝環(huán)境監(jiān)控中反復(fù)發(fā)現(xiàn)厭氧微生物或在產(chǎn)品無(wú)菌檢查中發(fā)現(xiàn)厭氧微生物時(shí)，需評(píng)估增加厭氧培養(yǎng)基。
6.3.2.3 用于模擬抑菌性產(chǎn)品的培養(yǎng)基，需評(píng)估抑菌性產(chǎn)品殘存對(duì)其促生長(zhǎng)能力及模擬試驗(yàn)結(jié)果的影響。
6.3.2.4 對(duì)于包含動(dòng)物來(lái)源成分的培養(yǎng)基，應(yīng)考慮培養(yǎng)基引入外源性病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。如BSE（可傳染性海綿腦病）/TSE（瘋牛?。┑娘L(fēng)險(xiǎn)。
6.3.3 培養(yǎng)基的配制
6.3.3.1. 模擬試驗(yàn)的培養(yǎng)基應(yīng)在控制區(qū)域進(jìn)行準(zhǔn)備。需注意培養(yǎng)基粉塵在環(huán)境中的擴(kuò)散，以及設(shè)備表面的殘留引發(fā)的微生物滋生。通常按照最終培養(yǎng)濃度3%的要求配制培養(yǎng)基。配制后的培養(yǎng)基應(yīng)盡快滅菌或除菌過(guò)濾。
6.3.3.2. 培養(yǎng)基在模擬試驗(yàn)前應(yīng)恢復(fù)至室溫，即用型無(wú)菌液體培養(yǎng)基儲(chǔ)存條件和使用條件可遵循生產(chǎn)商要求。
6.3.4. 培養(yǎng)基的除菌與滅菌
6.3.4.1. 除菌過(guò)濾
在培養(yǎng)基選擇階段應(yīng)考慮其過(guò)濾性。由于培養(yǎng)基的特性與藥液有差異，培養(yǎng)基除菌過(guò)濾的濾器型號(hào)可與產(chǎn)品使用的過(guò)濾器不同。如因顆粒或生物負(fù)載較大等原因引起除菌過(guò)濾器的堵塞時(shí)，可增加預(yù)過(guò)濾步驟。
需考慮降低非無(wú)菌培養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌生長(zhǎng)的風(fēng)險(xiǎn)，以避免微生物生長(zhǎng)導(dǎo)致培養(yǎng)基過(guò)濾性能降低。針對(duì)以上情況應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并采取合理應(yīng)對(duì)措施。
6.3.4.2. 濕熱滅菌
6.3.4.2.1.采用在線滅菌或滅菌釜濕熱滅菌方式時(shí)，應(yīng)考慮避免受熱不均勻或滅菌不充分現(xiàn)象。應(yīng)對(duì)該滅菌方式進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和驗(yàn)證。
6.3.4.2.2.滅菌過(guò)程應(yīng)遵循生產(chǎn)商推薦的滅菌時(shí)間和溫度的建議，并對(duì)滅菌過(guò)程予以確認(rèn)。確保滅菌后培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)能力，避免過(guò)度滅菌使培養(yǎng)基碳化造成其促生長(zhǎng)性能的降低。為避免過(guò)度加熱可采用濕熱滅菌與除菌過(guò)濾聯(lián)合使用的方式，但均應(yīng)進(jìn)行促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)。
6.3.4.3. 輻照滅菌
使用輻照滅菌的培養(yǎng)基粉末，應(yīng)在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行無(wú)菌配制等操作。輻照滅菌過(guò)程應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證，并在產(chǎn)品質(zhì)量報(bào)告中體現(xiàn)驗(yàn)證中所用的菌種和劑量等信息。
6.3.5. 培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)
6.3.5.1. 應(yīng)在無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)前及14天培養(yǎng)后按照現(xiàn)行中國(guó)藥典方法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)。
6.3.5.2. 促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)使用的菌種包括：白色念珠菌（CMCC98001）、黑曲霉（CMCC98003）、枯草芽孢桿菌（CMCC63501）、金黃色葡萄球菌（CMCC26003）、銅綠假單胞菌（CMCC10104）和生孢梭菌（CMCC64941）等。除標(biāo)準(zhǔn)菌株之外，還應(yīng)考慮加入環(huán)境和無(wú)菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。促生長(zhǎng)試驗(yàn)接種量應(yīng)不大于100CFU，按照中國(guó)藥典要求培養(yǎng)，以證明培養(yǎng)基能夠支持微生物的生長(zhǎng)。
6.3.6. 其它模擬介質(zhì)的選擇及評(píng)價(jià)
6.3.6.1. 其它模擬介質(zhì)的選擇
無(wú)菌粉末產(chǎn)品及特殊劑型產(chǎn)品，如懸濁液、軟膏/乳膏/乳液/凝膠等，在無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)中會(huì)使用其它模擬介質(zhì)，如安慰劑、賦形劑等。應(yīng)根據(jù)劑型特點(diǎn)、生產(chǎn)工藝及設(shè)備選擇適當(dāng)?shù)哪M介質(zhì)。
模擬介質(zhì)的流動(dòng)性應(yīng)類似于被模擬產(chǎn)品，易于進(jìn)行灌裝/分裝等工藝操作。模擬介質(zhì)還應(yīng)具有易于滅菌，無(wú)抑菌性，易溶解等特性。常用模擬介質(zhì)有聚乙二醇、乳糖、甘露醇、氯化鈉、凡士林等。模擬介質(zhì)的滅菌過(guò)程應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證并提供相關(guān)報(bào)告，其內(nèi)容包括滅菌方式對(duì)模擬介質(zhì)特性有無(wú)不良影響，滅菌后的無(wú)菌性。模擬介質(zhì)的包裝形式應(yīng)與被模擬物的包裝形式一致。
6.3.6.2. 其它模擬介質(zhì)的評(píng)價(jià)
在使用模擬介質(zhì)前應(yīng)對(duì)其適用性進(jìn)行確認(rèn)，包括無(wú)菌試驗(yàn)、抑菌試驗(yàn)、溶解度試驗(yàn)等。抑菌試驗(yàn)通常使用枯草芽孢桿菌（CMCC63501）和白色念珠菌（CMCC98001）。除此之外，還應(yīng)考慮加入環(huán)境和無(wú)菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。無(wú)菌模擬介質(zhì)由無(wú)菌注射用水分散，然后加入到無(wú)菌培養(yǎng)基中，達(dá)到模擬工藝選用的濃度范圍。然后在每份培養(yǎng)基中接種10-100CFU。陽(yáng)性對(duì)照接種到不含無(wú)菌模擬介質(zhì)的試管中，在20-25℃培養(yǎng)7天所有試管應(yīng)明顯渾濁。
6.4. 灌裝數(shù)量及模擬持續(xù)時(shí)間
6.4.1. 無(wú)菌工藝模擬灌裝數(shù)量應(yīng)足以保證評(píng)價(jià)的有效性及完成模擬方案中設(shè)計(jì)的各種干預(yù)活動(dòng)。應(yīng)通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估對(duì)所設(shè)計(jì)的灌裝數(shù)量、持續(xù)時(shí)間、模擬方式、預(yù)期收率作出合理說(shuō)明。
6.4.2. 生產(chǎn)批量小于5000支，模擬灌裝批量至少與生產(chǎn)批量相同；產(chǎn)品的生產(chǎn)批量在5000支至10000支，模擬灌裝數(shù)量應(yīng)與產(chǎn)品實(shí)際的生產(chǎn)批量相當(dāng)；大規(guī)模生產(chǎn)，即產(chǎn)品的生產(chǎn)批量大于10000支，最低模擬灌裝數(shù)量應(yīng)不得低于10000支，且一般不低于產(chǎn)品實(shí)際生產(chǎn)批量的10%。如采用密封性生產(chǎn)設(shè)備，經(jīng)評(píng)估可適當(dāng)降低模擬數(shù)量。
6.5. 容器裝量
容器中培養(yǎng)基灌裝量應(yīng)考慮適宜微生物生長(zhǎng)的需要和容器內(nèi)表面覆蓋的要求，灌裝量不必與產(chǎn)品相同，通常應(yīng)能達(dá)到容器體積的1/3～1/2，即可保證產(chǎn)品通過(guò)倒置和旋轉(zhuǎn)接觸到所有內(nèi)表面并有足夠的氧氣支持微生物的生長(zhǎng)，以利于對(duì)培養(yǎng)基的觀察。
6.6. 模擬試驗(yàn)方法的選擇
大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)，模擬試驗(yàn)方法可采用以下幾種方式：
6.6.1. 培養(yǎng)基與空瓶切換
模擬試驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間和實(shí)際生產(chǎn)相當(dāng)，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實(shí)際批量，模擬試驗(yàn)在培養(yǎng)基灌裝和空瓶運(yùn)行間切換。在正常生產(chǎn)條件下應(yīng)模擬灌裝足夠數(shù)量的培養(yǎng)基瓶子，以保證能夠準(zhǔn)確反映實(shí)際生產(chǎn)的污染風(fēng)險(xiǎn)。在灌裝培養(yǎng)基期間應(yīng)模擬所有類型和規(guī)定數(shù)量的干預(yù)。模擬試驗(yàn)應(yīng)包含生產(chǎn)的初始、結(jié)束階段和干預(yù)發(fā)生的時(shí)刻。在不灌裝培養(yǎng)基期間，灌裝線穿插運(yùn)行空容器。該方式能全面評(píng)估人員、操作和生產(chǎn)環(huán)境。
6.6.2. 培養(yǎng)基與無(wú)菌注射用水切換
模擬試驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間和實(shí)際生產(chǎn)相當(dāng)，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實(shí)際批量，模擬驗(yàn)證在培養(yǎng)基灌裝和注射用水灌裝間切換。此種方式比實(shí)際生產(chǎn)更復(fù)雜，同時(shí)存在注射用水稀釋部分培養(yǎng)基導(dǎo)致促生長(zhǎng)性能下降的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)通過(guò)促生長(zhǎng)試驗(yàn)證明其有效性。
6.6.3. 培養(yǎng)基灌裝與設(shè)備空轉(zhuǎn)的切換
模擬試驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間和實(shí)際生產(chǎn)相當(dāng)，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實(shí)際批量，模擬試驗(yàn)在培養(yǎng)基灌裝和設(shè)備空轉(zhuǎn)運(yùn)行間切換。應(yīng)模擬足夠數(shù)量的培養(yǎng)基產(chǎn)品，以保證能夠準(zhǔn)確反映實(shí)際生產(chǎn)的污染風(fēng)險(xiǎn)。在灌裝培養(yǎng)基期間應(yīng)模擬所有類型和規(guī)定數(shù)量的干預(yù)。模擬試驗(yàn)應(yīng)包含生產(chǎn)的初始、結(jié)束階段和干預(yù)發(fā)生的時(shí)刻，在不灌裝培養(yǎng)基期間灌裝線繼續(xù)空轉(zhuǎn)運(yùn)行，模擬正常生產(chǎn)操作狀態(tài)。該方式也能全面評(píng)估人員、操作和生產(chǎn)環(huán)境。
6.6.4. 生產(chǎn)結(jié)束后模擬
在一批產(chǎn)品生產(chǎn)結(jié)束后，不經(jīng)拆卸、清潔、消毒、滅菌等工作，直接進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝。此方式仍應(yīng)對(duì)設(shè)備組裝、啟動(dòng)和開(kāi)始灌裝進(jìn)行模擬，并有足量的培養(yǎng)基沖洗產(chǎn)品管路以除去殘留的產(chǎn)品，并通過(guò)足夠的試驗(yàn)證明培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)特性。對(duì)微生物生長(zhǎng)有抑制性的產(chǎn)品，應(yīng)對(duì)接觸產(chǎn)品表面的所有部件進(jìn)行更換。
6.7. 最差條件的選擇
最差條件并不是指人為創(chuàng)造的超出允許范圍的生產(chǎn)狀況和環(huán)境。為了確認(rèn)無(wú)菌工藝風(fēng)險(xiǎn)控制的有效性，應(yīng)通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并結(jié)合無(wú)菌生產(chǎn)工藝、設(shè)備裝備水平、人員數(shù)量和干預(yù)等因素來(lái)設(shè)計(jì)模擬試驗(yàn)最差條件。包括但不限于以下方面：
6.7.1. 人員
應(yīng)充分考慮人員及其活動(dòng)對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)工藝帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)，如模擬生產(chǎn)過(guò)程的最多人數(shù)，當(dāng)操作人員數(shù)量減少可能導(dǎo)致其它方面污染風(fēng)險(xiǎn)增加時(shí)，則此類條件也視為最差條件之一。參與人員應(yīng)包括日常參與到無(wú)菌生產(chǎn)的全部人員，如生產(chǎn)操作、取樣、環(huán)境監(jiān)測(cè)和設(shè)備設(shè)施維護(hù)人員，同時(shí)應(yīng)考慮以上人員交叉作業(yè)、班次輪換、更衣、夜班疲勞狀態(tài)等因素。
6.7.2. 工藝時(shí)間
應(yīng)適當(dāng)考慮模擬實(shí)際生產(chǎn)操作過(guò)程中房間、設(shè)備、物料消毒或滅菌后放置的最長(zhǎng)時(shí)間及最長(zhǎng)的工藝保留時(shí)限等，如設(shè)備設(shè)施、分裝容器、無(wú)菌器具滅菌后最長(zhǎng)的放置時(shí)間等。
6.7.3. 灌裝速度
模擬試驗(yàn)應(yīng)涵蓋產(chǎn)品實(shí)際灌裝速度范圍，基于無(wú)菌風(fēng)險(xiǎn)的角度分析評(píng)價(jià)灌裝速度對(duì)工藝過(guò)程及其他方面的影響程度，如采用最慢的灌裝速度、最大的容器用以模擬最長(zhǎng)暴露時(shí)間；也應(yīng)考慮采用最快的灌裝速度、最小的容器，用以模擬最大操作強(qiáng)度/難度。
6.7.4. 環(huán)境
模擬試驗(yàn)挑戰(zhàn)的最差環(huán)境應(yīng)考慮選擇單批產(chǎn)品無(wú)菌生產(chǎn)周期末端、間歇式生產(chǎn)的空調(diào)系統(tǒng)重新開(kāi)啟后或連續(xù)生產(chǎn)期間周期性滅菌最長(zhǎng)的時(shí)間間隔。無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)期間的環(huán)境及器具的消毒處理應(yīng)依據(jù)正常生產(chǎn)期間的消毒方法進(jìn)行，避免消毒劑的過(guò)度使用。
6.7.5. 如是再驗(yàn)證，應(yīng)考慮挑戰(zhàn)無(wú)菌生產(chǎn)周期的末端。日常生產(chǎn)中，針對(duì)微生物污染事件而制定了糾正措施。在模擬試驗(yàn)時(shí)，可對(duì)糾正措施的有效性給予確認(rèn)。
6.8. 干預(yù)
6.8.1. 概念
干預(yù)是指由操作人員按照相關(guān)規(guī)定參與無(wú)菌工藝生產(chǎn)的所有操作活動(dòng)。干預(yù)可分為固有的干預(yù)和糾正性干預(yù)。固有干預(yù)是指常規(guī)和有計(jì)劃的無(wú)菌操作，如裝載膠塞，環(huán)境監(jiān)控，設(shè)備安裝等；糾正性干預(yù)則是指對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程的糾正或調(diào)整，如生產(chǎn)過(guò)程中清除破碎的瓶子，排除卡住的膠塞，更換部件、設(shè)備故障排除、手工加塞等。
6.8.2. 原則
應(yīng)對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程中各種允許的干預(yù)活動(dòng)進(jìn)行文件化管理，明確規(guī)定正常生產(chǎn)中允許的干預(yù)活動(dòng)。模擬試驗(yàn)中干預(yù)設(shè)計(jì)應(yīng)與實(shí)際的生產(chǎn)活動(dòng)保持一致，模擬試驗(yàn)不應(yīng)挑戰(zhàn)不合理的干預(yù)，以證明其合理性。在模擬試驗(yàn)方案中應(yīng)制定干預(yù)清單和實(shí)施計(jì)劃，模擬試驗(yàn)時(shí)逐一實(shí)施并記錄。
6.8.3. 模擬類型及頻次
6.8.3.1. 無(wú)菌模擬試驗(yàn)方案中應(yīng)明確規(guī)定固有干預(yù)、糾正性干預(yù)（如維修、故障停機(jī)、設(shè)備調(diào)試）的頻次、類型及復(fù)雜程度（如簡(jiǎn)單干預(yù)：倒瓶剔除等；復(fù)雜干預(yù)：灌裝機(jī)泵及針頭裝配、設(shè)備故障維修等）。
6.8.3.2. 固有干預(yù)及經(jīng)常發(fā)生的糾正性干預(yù)一般應(yīng)在每次模擬中都實(shí)施，偶發(fā)性的干預(yù)可周期性地模擬，如無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程意外暫?；蛑貑ⅰo(wú)菌狀態(tài)下設(shè)備、設(shè)施偶發(fā)故障排除等。
6.8.3.3. 模擬試驗(yàn)應(yīng)設(shè)計(jì)并實(shí)施足夠數(shù)量的糾正性干預(yù)，干預(yù)頻次的設(shè)計(jì)應(yīng)考慮生產(chǎn)過(guò)程按比例覆蓋模擬試驗(yàn)的全過(guò)程。
6.8.3.4. 對(duì)于無(wú)菌取樣、調(diào)整裝量和重復(fù)密封過(guò)程，均應(yīng)考慮在分裝的前、中、后階段進(jìn)行。
6.8.4. 人員
實(shí)施干預(yù)的人員（應(yīng)包括操作、維修人員等）應(yīng)經(jīng)過(guò)相關(guān)的培訓(xùn)和考核，并能按規(guī)定的程序?qū)嵤└鞣N干預(yù)。標(biāo)準(zhǔn)化的、簡(jiǎn)單的固有干預(yù)可由部分操作人員實(shí)施并據(jù)此評(píng)價(jià)其他人。對(duì)于復(fù)雜操作，如裝配灌裝機(jī)等，每個(gè)從事人員都應(yīng)在驗(yàn)證過(guò)程中模擬，操作條件不應(yīng)優(yōu)于日常生產(chǎn)的操作條件。
6.8.5. 干預(yù)后產(chǎn)品（容器）的處理
實(shí)際工藝中如明確規(guī)定受干預(yù)影響的產(chǎn)品（容器）應(yīng)從生產(chǎn)線上剔除，在模擬試驗(yàn)時(shí)也可剔除。模擬試驗(yàn)時(shí)產(chǎn)生的這類產(chǎn)品（容器）可不培養(yǎng)，但不培養(yǎng)的容器應(yīng)予以記錄并評(píng)估其合理性。如在干預(yù)發(fā)生前已經(jīng)密封，在日常生產(chǎn)中按規(guī)定不需要剔除的產(chǎn)品，模擬試驗(yàn)時(shí)也應(yīng)保留、培養(yǎng)并納入評(píng)估。
6.8.6. 記錄
模擬試驗(yàn)過(guò)程中的所有干預(yù)必須記錄。糾正性干預(yù)記錄的內(nèi)容至少應(yīng)包括糾正性干預(yù)的類型、位置、次數(shù)；固有干預(yù)記錄至少包括干預(yù)內(nèi)容和發(fā)生頻率。
6.9. 容器規(guī)格
一條灌裝線上有多種規(guī)格容器時(shí)，應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估選擇模擬的容器。一般選擇最小和/或最大尺寸的容器進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝模擬試驗(yàn)。當(dāng)使用特定的容器/膠塞組合存在特別的操作問(wèn)題，如卡瓶、卡塞，即增加干預(yù)的情況，建議單獨(dú)對(duì)其進(jìn)行工藝模擬驗(yàn)證。通常采用透明的容器代替不透明或棕色的容器。
6.10.培養(yǎng)與觀察
6.10.1. 培養(yǎng)前的容器檢查
模擬試驗(yàn)中密封缺陷產(chǎn)品的剔除工藝應(yīng)采用日常生產(chǎn)的剔除工藝。除密封缺陷的產(chǎn)品外，其他外觀缺陷、灌裝量異常的模擬產(chǎn)品也應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)。
6.10.2. 培養(yǎng)條件
6.10.2.1. 在培養(yǎng)前，一般應(yīng)對(duì)模擬灌裝產(chǎn)品進(jìn)行顛倒、輕搖以使培養(yǎng)基接觸所有內(nèi)表面。培養(yǎng)時(shí)間至少14天，可選擇兩個(gè)溫度進(jìn)行培養(yǎng)：在20℃-25℃培養(yǎng)至少7天，然后在30℃-35℃培養(yǎng)至少7天。如選擇其他培養(yǎng)計(jì)劃，應(yīng)有試驗(yàn)數(shù)據(jù)支持所選培養(yǎng)條件的適用性。在整個(gè)培養(yǎng)期間應(yīng)連續(xù)監(jiān)控培養(yǎng)溫度。
6.10.2.2. 如實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，分裝容器內(nèi)需要填充惰性氣體，在模擬試驗(yàn)過(guò)程應(yīng)考慮用無(wú)菌空氣替代。替代空氣應(yīng)通過(guò)與惰性氣體相同的管道系統(tǒng)以確保完全模擬惰性氣體的使用過(guò)程。如必須采用惰性氣體用以模擬厭氧無(wú)菌工藝（氧氣濃度低于0.1%）及培養(yǎng)厭氧微生物，應(yīng)確認(rèn)惰性氣體與培養(yǎng)基的組合支持相應(yīng)微生物的生長(zhǎng)。
6.10.3. 培養(yǎng)后的檢查
培養(yǎng)結(jié)束后，應(yīng)對(duì)所有模擬灌裝產(chǎn)品逐支進(jìn)行無(wú)菌性檢查，通常應(yīng)在合適的照度下進(jìn)行目視觀察。
在培養(yǎng)期間，應(yīng)定期觀察培養(yǎng)基的培養(yǎng)情況，如在培養(yǎng)期間發(fā)現(xiàn)異常情況時(shí)應(yīng)做進(jìn)一步調(diào)查。
如在培養(yǎng)后檢查中發(fā)現(xiàn)密封缺陷的灌裝產(chǎn)品，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑蛘{(diào)查并采取糾正措施。
當(dāng)灌裝不透明的容器，應(yīng)考慮將轉(zhuǎn)移至透明容器觀察的可能性，以確保陽(yáng)性容器的發(fā)現(xiàn)。
6.11.計(jì)數(shù)與數(shù)量平衡
為保證模擬試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)對(duì)各個(gè)階段的模擬灌裝產(chǎn)品進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)：包括灌裝、培養(yǎng)前檢查、培養(yǎng)后檢查的數(shù)量等。數(shù)量應(yīng)平衡，如發(fā)現(xiàn)不平衡，應(yīng)調(diào)查原因并判斷本次模擬試驗(yàn)是否有效。
6.12.環(huán)境（包括人員）監(jiān)控
6.12.1. 環(huán)境監(jiān)控方案設(shè)計(jì)
應(yīng)通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定日常生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控的各要素，如取樣點(diǎn)、取樣對(duì)象、取樣頻率、警戒和糾偏標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)施方法等。
模擬試驗(yàn)時(shí)應(yīng)與日常生產(chǎn)的環(huán)境監(jiān)控方案為基礎(chǔ)，模擬生產(chǎn)狀況，包括采樣儀器、耗材的轉(zhuǎn)移、消毒等，任何異于日常環(huán)境監(jiān)控的情況都應(yīng)有說(shuō)明和記錄。
與實(shí)際生產(chǎn)工藝相比，模擬實(shí)驗(yàn)中的環(huán)境監(jiān)控應(yīng)考慮增加額外的監(jiān)測(cè)環(huán)節(jié)。
6.12.2. 環(huán)境監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)處理
環(huán)境（包括人員）監(jiān)控的數(shù)據(jù)結(jié)果用于評(píng)估模擬生產(chǎn)過(guò)程中的環(huán)境條件是否適宜于生產(chǎn)。當(dāng)模擬試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)可用于進(jìn)行根本原因的調(diào)查。
模擬試驗(yàn)時(shí)發(fā)生的環(huán)境偏差并不是模擬試驗(yàn)成功的否決條件，是否通過(guò)試驗(yàn)取決于調(diào)查的結(jié)果。環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果異常時(shí)，即使試驗(yàn)結(jié)果成功，也應(yīng)進(jìn)行必要的調(diào)查和糾正。即使最終決定在環(huán)境監(jiān)控結(jié)果超出糾偏標(biāo)準(zhǔn)時(shí)無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)依然通過(guò)，也不意味著日常生產(chǎn)可以在同等環(huán)境偏差的條件下進(jìn)行。
6.13.人員因素
所有被授權(quán)在生產(chǎn)時(shí)進(jìn)入無(wú)菌灌裝間的人員，包括觀察人員和維修人員，每年至少參加一次成功的無(wú)菌工藝模擬實(shí)驗(yàn)，方可參與正常生產(chǎn)的無(wú)菌操作。
模擬試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)、實(shí)施及微生物污染調(diào)查應(yīng)有具備微生物方面專業(yè)知識(shí)的人員參與。
6.14.不同劑型應(yīng)考慮的特殊因素
6.14.1. 凍干制劑
6.14.1.1. 凍干過(guò)程的進(jìn)箱、凍干、出箱操作是凍干制劑無(wú)菌工藝一部分，因此應(yīng)在無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)中模擬產(chǎn)品的凍干操作過(guò)程。冷凍可能使培養(yǎng)基捕獲的微生物受損，影響其生長(zhǎng)，因此方案設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)給予考慮和評(píng)估。如影響明顯，則不推薦模擬冷凍過(guò)程。模擬凍干時(shí)，必須考慮真空度、維持時(shí)間及溫度。一定溫度下的真空度會(huì)使培養(yǎng)基沸騰，應(yīng)避免這種情況的發(fā)生。
6.14.1.2. 模擬凍干操作過(guò)程有以下兩種模式，企業(yè)應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估設(shè)計(jì)模擬的方式。
6.14.1.2.1. 縮短維持時(shí)間模式
即培養(yǎng)基灌裝到容器中，半壓塞，將容器轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)內(nèi),在凍干機(jī)箱體內(nèi)部分抽真空，維持真空狀態(tài)的時(shí)間短于實(shí)際凍干周期，然后箱體破空（可依據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)計(jì)破空次數(shù)），在凍干機(jī)內(nèi)完全壓塞。
此模式關(guān)注了風(fēng)險(xiǎn)最大的裝載和壓塞操作，但模擬凍干的時(shí)間較短，可能導(dǎo)致污染風(fēng)險(xiǎn)低于正常生產(chǎn)。
6.14.1.2.2. 全程維持時(shí)間模式
即培養(yǎng)基灌裝到容器中，半壓塞，將容器轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)內(nèi),模擬正常的生產(chǎn)的凍干時(shí)間，在凍干機(jī)箱體內(nèi)全部或部分抽真空，箱體破空，在凍干機(jī)內(nèi)完全壓塞，轉(zhuǎn)移至下道工序密封。
此種模式為全程模擬，和實(shí)際生產(chǎn)一致。但應(yīng)關(guān)注長(zhǎng)時(shí)間真空可能導(dǎo)致培養(yǎng)基水分揮發(fā)過(guò)度，可能降低微生物回收率，且較為費(fèi)時(shí)。
6.14.1.3. 應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估設(shè)計(jì)模擬試驗(yàn)時(shí)培養(yǎng)基在凍干機(jī)內(nèi)放置的位置。
6.14.1.4. 抽真空后，通常應(yīng)采用無(wú)菌空氣代替惰性氣體平衡腔室壓力，以利于TSB培養(yǎng)基支持微生物的生長(zhǎng)。
6.14.2. 懸濁液
6.14.2.1. 懸濁液用于不溶性無(wú)菌產(chǎn)品，如一些抗生素、疫苗和皮質(zhì)激素。懸濁液模擬應(yīng)包含懸濁液使用的工藝及相應(yīng)的無(wú)菌操作。
6.14.2.2. 模擬程序應(yīng)該包括懸濁液生產(chǎn)的特征步驟，如賦形劑的滅菌，無(wú)菌粉末的加入和懸濁液的混合等。與液體制劑模擬差別最大之處在于無(wú)菌條件下，將無(wú)菌模擬介質(zhì)粉末加入到液體制劑過(guò)程。
6.14.2.3. 懸濁液的無(wú)菌操作與溶液制劑的無(wú)菌操作方法類似，但由于懸濁液劑型配制的步驟，會(huì)相應(yīng)增加攪拌器、緩沖罐、管路以及相應(yīng)的無(wú)菌操作等特別之處。上述步驟均應(yīng)在模擬試驗(yàn)中體現(xiàn)。
6.14.3. 軟膏/乳膏/乳液/凝膠
6.14.3.1. 無(wú)菌軟膏/乳膏/乳液/凝膠與溶液或懸濁液產(chǎn)品無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)類似。模擬過(guò)程應(yīng)涵蓋實(shí)際操作的工藝。盡量采用被模擬產(chǎn)品的工藝和無(wú)菌操作方式。可增加增稠劑等模擬介質(zhì)使其更接近被模擬產(chǎn)品特性。
6.14.3.2. 無(wú)菌軟膏的模擬通常不同于西林瓶或安瓿瓶的設(shè)備上進(jìn)行。模擬的基本方法是類似于其他劑型的。
6.14.3.3. 對(duì)于軟膏/乳膏/乳液/凝膠產(chǎn)品的模擬特點(diǎn)在于容器的檢查時(shí)，模擬介質(zhì)的轉(zhuǎn)出觀察需要特別注意。
6.14.4. 粉末制劑（無(wú)菌粉末分裝）
6.14.4.1. 無(wú)菌產(chǎn)品配方中加入其他無(wú)菌物質(zhì)的過(guò)程應(yīng)被模擬，例如混合、研磨、分裝以及其他工序。
6.14.4.2. 粉末灌裝設(shè)備與液體灌裝設(shè)備差異很大，模擬時(shí)常包含液體和/或粉末兩種無(wú)菌工藝操作。
6.14.4.3. 陰性對(duì)照
如粉末模擬試驗(yàn)用到無(wú)菌液體和無(wú)菌模擬介質(zhì)粉末兩種工藝操作，可采用單獨(dú)模擬一些液體容器作為陰性對(duì)照。
粉末無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)中模擬介質(zhì)的模擬可能引起塵埃粒子檢測(cè)數(shù)據(jù)超標(biāo)，可參考實(shí)際生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，記錄與分析粒子粒徑，分析粉末灌裝時(shí)是否會(huì)引起塵埃粒子監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)浮動(dòng)。
6.14.5. 其他劑型
其它一些不常見(jiàn)的劑型，如吸入劑、氣霧劑和植入劑等，可參考本指南提供的設(shè)計(jì)理念，以滿足這些劑型的具體要求。
6.15.方案的實(shí)施
應(yīng)依據(jù)方案，建立詳細(xì)的用于實(shí)施模擬試驗(yàn)的批記錄。批記錄的格式應(yīng)與產(chǎn)品的批生產(chǎn)記錄格式相同，包括所有與試驗(yàn)相關(guān)信息和操作人員確認(rèn)簽字及原始記錄等。方案及批記錄應(yīng)得到質(zhì)量管理部門的批準(zhǔn)，驗(yàn)證實(shí)施過(guò)程除了嚴(yán)格按照方案及批記錄的要求執(zhí)行外，還應(yīng)關(guān)注以下幾方面的因素：
6.15.1. 產(chǎn)品容器、膠塞、接觸產(chǎn)品的設(shè)備和部件應(yīng)按SOP準(zhǔn)備。
6.15.2. 為了便于偏差調(diào)查，可對(duì)完成密封后的模擬產(chǎn)品包裝單元進(jìn)行編號(hào)，每一組編號(hào)應(yīng)能追溯到無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的時(shí)間及相應(yīng)的操作。
6.15.3. 應(yīng)對(duì)無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行相應(yīng)的過(guò)程監(jiān)控，確保過(guò)程符合方案和批記錄的要求。應(yīng)詳細(xì)準(zhǔn)確記錄模擬試驗(yàn)中實(shí)施的各種干預(yù)，可采取觀察或錄像（電子采集）等技術(shù)對(duì)模擬生產(chǎn)的關(guān)鍵過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)記錄。
6.15.4. 無(wú)菌工藝模擬結(jié)束，應(yīng)對(duì)所有與培養(yǎng)接觸的設(shè)備、容器、部件及環(huán)境進(jìn)行有效清潔，防止培養(yǎng)基殘留造成微生物滋生。
6.15.5. 模擬試驗(yàn)的結(jié)果、評(píng)估和結(jié)論應(yīng)形成書面報(bào)告并經(jīng)質(zhì)量管理部門批準(zhǔn)。根據(jù)實(shí)施記錄，為通過(guò)模擬驗(yàn)證的人員頒發(fā)確認(rèn)書并規(guī)定有效期限。
7.可接受標(biāo)準(zhǔn)與結(jié)果評(píng)價(jià)
無(wú)菌工藝模擬實(shí)驗(yàn)可接受標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)遵循現(xiàn)行GMP無(wú)菌藥品附錄中的有關(guān)規(guī)定。
7.1出現(xiàn)任何陽(yáng)性均應(yīng)進(jìn)行徹底、規(guī)范的調(diào)查；在科學(xué)評(píng)估的基礎(chǔ)上采取適當(dāng)?shù)募m偏措施。
7.2. 采用良好設(shè)計(jì)且受控的無(wú)菌灌裝系統(tǒng)，特別是自動(dòng)化的系統(tǒng)如吹灌封、隔離器等，污染率可大幅度降低。
7.3. 即使每次模擬試驗(yàn)的污染率都符合可接受標(biāo)準(zhǔn)，如果連續(xù)進(jìn)行的模擬試驗(yàn)批中反復(fù)出現(xiàn)陽(yáng)性意味著無(wú)菌生產(chǎn)工藝存在系統(tǒng)性問(wèn)題，必須得到有效解決。
8.污染調(diào)查及糾正措施
8.1. 無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)存在污染，即意味著無(wú)菌保證可能存在問(wèn)題，出現(xiàn)的任何污染樣品均應(yīng)視為偏差并徹底調(diào)查，并為改進(jìn)無(wú)菌工藝提供數(shù)據(jù)支持。污染調(diào)查流程及方法應(yīng)在方案中明確規(guī)定。
8.2. 可通過(guò)查看無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的錄像或現(xiàn)場(chǎng)記錄，還原模擬試驗(yàn)過(guò)程中人員操作行為、干預(yù)及設(shè)備運(yùn)行等真實(shí)狀況。對(duì)無(wú)菌工藝模擬實(shí)驗(yàn)實(shí)施過(guò)程相關(guān)的所有記錄進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，并關(guān)注各種偏差、驗(yàn)證、變更等。
8.3. 所有偏離原始驗(yàn)證狀態(tài)情況均應(yīng)逐一評(píng)估并說(shuō)明。檢查所有相關(guān)人員的培訓(xùn)和資質(zhì)確認(rèn)記錄。
8.4. 應(yīng)對(duì)模擬試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的微生物進(jìn)行鑒別，以便開(kāi)展污染途徑調(diào)查，并列入企業(yè)微生物菌種庫(kù)。
8.5. 調(diào)查的關(guān)鍵是查找污染來(lái)源，結(jié)合調(diào)查需要，應(yīng)制定一個(gè)完整的取樣和微生物鑒別計(jì)劃，調(diào)查過(guò)程應(yīng)有記錄并歸檔。調(diào)查結(jié)果應(yīng)形成書面報(bào)告并得到質(zhì)量管理部門的批準(zhǔn)
8.6. 如調(diào)查找到明確的原因，應(yīng)制定糾正預(yù)防措施，并再次進(jìn)行模擬試驗(yàn)，以證明措施的有效性。如調(diào)查無(wú)法找到根本原因，應(yīng)對(duì)生產(chǎn)工藝過(guò)程的無(wú)菌控制開(kāi)展系統(tǒng)性評(píng)估，在現(xiàn)有模擬試驗(yàn)方案的基礎(chǔ)上增加取樣點(diǎn)和頻次，以獲得更多數(shù)據(jù)支持原因調(diào)查，同時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加試驗(yàn)批次。
9.模擬試驗(yàn)的周期與再驗(yàn)證
9.1. 新建無(wú)菌生產(chǎn)線，在正式投產(chǎn)之前，每班次應(yīng)當(dāng)連續(xù)進(jìn)行3次合格的模擬試驗(yàn)，在無(wú)菌生產(chǎn)工藝中一條生產(chǎn)線存在多臺(tái)相同功能設(shè)備時(shí)，應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定相關(guān)驗(yàn)證次數(shù)，但每臺(tái)設(shè)備應(yīng)至少經(jīng)過(guò)一次模擬試驗(yàn)。
9.2. 正常生產(chǎn)期間應(yīng)當(dāng)按照每條生產(chǎn)線每班次每半年進(jìn)行一次試驗(yàn)，每次至少一批。對(duì)于因其它原因停產(chǎn)一定周期的生產(chǎn)線，在恢復(fù)正式生產(chǎn)前應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌工藝模擬實(shí)驗(yàn)。
9.3. 空氣凈化系統(tǒng)、生產(chǎn)用設(shè)備、無(wú)菌生產(chǎn)工藝及人員重大變更，或設(shè)備的重大維修后，應(yīng)通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定無(wú)菌工藝模擬再試驗(yàn)的批次數(shù)。
9.4. 應(yīng)充分評(píng)估生產(chǎn)線的風(fēng)險(xiǎn)，在發(fā)現(xiàn)設(shè)施、人員、環(huán)境或工藝的持續(xù)監(jiān)測(cè)出現(xiàn)不良趨勢(shì)或無(wú)菌不合格時(shí)，也應(yīng)考慮再次進(jìn)行模擬試驗(yàn)。
10. 無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)的局限性
10.1.成功的無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)是允許正式生產(chǎn)的必要條件，但應(yīng)注意其局限性。
10.2.以現(xiàn)行藥品GMP法規(guī)要求為準(zhǔn)則，評(píng)價(jià)無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程的法規(guī)符合性，低于規(guī)范要求的無(wú)菌工藝過(guò)程，不能通過(guò)模擬試驗(yàn)來(lái)證實(shí)其無(wú)菌控制的合理性。
10.3.雖然可通過(guò)培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)來(lái)評(píng)估無(wú)菌生產(chǎn)工藝的可靠性。但當(dāng)產(chǎn)品無(wú)菌檢查出現(xiàn)陽(yáng)性時(shí)，不能以模擬灌裝試驗(yàn)結(jié)果，排除生產(chǎn)過(guò)程所帶來(lái)的污染可能性。
11. 術(shù)語(yǔ)
無(wú)菌生產(chǎn)工藝：物料、器具經(jīng)過(guò)滅菌處理，并在無(wú)菌防護(hù)下加工獲得最終產(chǎn)品，且產(chǎn)品裝入其最終容器后不再進(jìn)行任何滅菌處理。
無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)：正常生產(chǎn)的灌裝程序，用模擬介質(zhì)代替產(chǎn)品，來(lái)模擬無(wú)菌生產(chǎn)的試驗(yàn)過(guò)程。
TSB（Tryptone SoyBroth Medium）：胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，用于真菌和需氧菌培養(yǎng)。
FTM（FluidThioglycollate Medium）：液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基，用于厭氧菌和需氣菌培養(yǎng)。
最差狀況: 一組條件，包括工藝限度和環(huán)境限度，也包括那些可能引起工藝或產(chǎn)品失敗的機(jī)會(huì)，但這些條件不一定會(huì)引起產(chǎn)品或工藝失敗。
好氧微生物:微生物能在新陳代謝中利用氧作為最終的電子接受體，只有在有氧的存在下微生物才能夠生長(zhǎng)。
厭氧微生物:微生物在新陳代謝中，不能利用氧作為最終的電子接受體，只有在缺氧的存在下微生物才能夠生長(zhǎng)。
CFU:菌落形成的個(gè)體,有單一或多個(gè)細(xì)胞形成的可見(jiàn)結(jié)果的微生物生長(zhǎng)體。
陽(yáng)性:在培養(yǎng)之后，測(cè)試的樣品出現(xiàn)可以明顯發(fā)現(xiàn)的微生物生長(zhǎng)。
班次：工作和生產(chǎn)的預(yù)訂周期，通常少于12小時(shí)，工人進(jìn)行換班。
12.參考文獻(xiàn)
PDA technical Report No.22 Revised ProcessSimulation for Aseptically Filled Products
PDA technical Report No.28 Revised ProcessSimulation Testing for Sterile Bulk Pharmaceutical Chemicals;
PDA technical Report No. 44 Quality riskmanagement for aseptic processes.
PIC/S Recommendation on the Validation ofProcesses;
ICH Q9 Quality Risk Management
WHO-GMP 技術(shù)報(bào)告937
中國(guó)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》(2010版)及附錄
《中華人民共和國(guó)藥典》（2015版）中國(guó)醫(yī)藥科技出版社