中國微生物菌種查詢網(wǎng)菌種保藏的重要意義就在于盡可能保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定,確保菌種不死亡、不變異、不被污染,以達(dá)到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。下面給大家介紹一種簡單有效的保存方法液體石蠟覆蓋保藏法。
液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。它原理是在長好的斜面菌上覆蓋滅菌的液體石蠟,達(dá)到菌體與空氣隔絕,使菌處于生長和代謝停止?fàn)顟B(tài),同時石蠟油還防止水分蒸發(fā),在低溫下達(dá)到較長期的保藏菌種的目的。保藏溫度要求在-4-4℃下,液體石蠟法適用于不產(chǎn)孢子的菌種。具體的操作方法:
1、將液體石蠟分裝于三角燒瓶內(nèi),塞上棉塞,并用牛皮紙包扎,1.05kg/cm,121℃滅菌30分鐘,然后放在40℃溫箱中,使水汽蒸發(fā)掉,備用。
2、將需要保藏的ATCC菌種,在最適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng),使得到健壯的菌體或孢子。
3、用滅菌吸管吸取滅菌的液體石蠟,注入已長好菌的斜面上,其用量以高出斜面頂端1cm為準(zhǔn),使菌種與空氣隔絕。
4、將試管直立,置低溫或室溫下保存(有的微生物在室溫下比冰箱中保存的時間還要長)。
這方法不但實用且效果好,又簡單,還不需特殊設(shè)備,更不需經(jīng)常移種。像ATCC菌種 霉菌、放線菌、芽孢細(xì)菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1-2年,一般無芽孢細(xì)菌也可保藏1年左右,甚至用一般方法很難保藏的腦膜炎球菌,在37℃溫箱內(nèi),亦可保藏3個月之久。