
一、轉(zhuǎn)基因檢測概述
近年來,轉(zhuǎn)基因產(chǎn)業(yè)迅猛發(fā)展。轉(zhuǎn)基因技術(shù)在全球范圍內(nèi)引起了極大的關(guān)注,轉(zhuǎn)基因成分,尤其是轉(zhuǎn)基因作物,關(guān)乎人體健康和生態(tài)環(huán)境,備受世人關(guān)注,并且引發(fā)了一系列倫理道德問題,因此對于轉(zhuǎn)基因成分的檢測極其重要,轉(zhuǎn)基因檢測不可或缺。
目前,為方便政府對轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行監(jiān)管,世界上已有50余個國家都對轉(zhuǎn)基因食品實施標(biāo)識管理制度。因此,標(biāo)識制度與分析檢測技術(shù)的關(guān)系十分密切:一方面轉(zhuǎn)基因檢測水平為制度建立提供科學(xué)依據(jù),另一方面標(biāo)識制度的監(jiān)管需要通過分析檢測技術(shù)實現(xiàn)。
二、轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)方法
早期的轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)主要包括:轉(zhuǎn)基因成分篩查法、目的基因檢測法和蛋白質(zhì)檢測法等。其中,成分篩查法只能檢測出轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中的通用元件,特異性不高,易出現(xiàn)假陽性結(jié)果;在外源DNA相同時,目的基因檢測無法區(qū)分不同的轉(zhuǎn)化事件;蛋白質(zhì)檢測則存在依賴于大型儀器、制備抗體等缺點(diǎn)。鑒于此,以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reac-tion, PCR)為依托的功能核酸檢測技術(shù)已經(jīng)成為轉(zhuǎn)基因檢測的主流。
核酸檢測技術(shù)是通過核酸擴(kuò)增將物質(zhì)的遺傳物質(zhì)進(jìn)行擴(kuò)增,通過特定引物對所需要的DNA或RNA進(jìn)行合成,如能成功合成,則代表所要得到的DNA或者RNA是存在的。轉(zhuǎn)基因檢測既是對轉(zhuǎn)入的特定基因進(jìn)行檢測,通過引物將特定的啟動子和終止子合成,并在之后檢測中表現(xiàn)出來,所使用的方法通常是凝膠PCR、RTPCR、LAMP、NASBA等。
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