一、背景
大鼠血管內(nèi)皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。
小腸內(nèi)柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。血管內(nèi)皮細胞除了吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織等，還參與集體免疫活動，包括：①血管收縮及血管舒張，從而控制血壓；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動脈硬化；④血管生成；⑤炎癥及腫脹（浮腫）；⑥內(nèi)皮細胞亦控制一些物質(zhì)，如白血球進出血管。大鼠血管內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
二、應用
用于α-亞麻酸改善高血壓胰島素抵抗大鼠血管內(nèi)皮細胞損傷的作用和機制研究：
高血壓是臨床上最常見的心血管疾病之一。具有發(fā)病率高和致死率高等特點。最近的研究發(fā)現(xiàn)，高血壓人群大多數(shù)都伴有體內(nèi)代謝的異常，包括高血糖，高胰島素血，高血脂，肥胖，糖耐量減低等癥狀。代謝紊亂加重高血壓血管病變，促進血管內(nèi)皮損傷。
人們認為胰島素抵抗是高血壓代謝失調(diào)的基礎因素，由此將胰島素抵抗和高血壓聯(lián)系在了一起。近些年來，大量研究證據(jù)表明胰島素抵抗和高血壓互為因果相互影響加重了血管內(nèi)皮損傷，導致血管結(jié)構(gòu)功能的異常，引起組織和靶器官的損害。因此對高血壓降壓治療的同時，改善胰島素抵抗可以顯著保護血管內(nèi)皮細胞減輕內(nèi)皮損傷，為高血壓病的預防和治療提供了新的思路。
α-亞麻酸是一種植物來源的多不飽和脂肪酸，與來其他源于海產(chǎn)品提取物的EPA和DHA一樣，均屬于ω-3多不飽和脂肪酸的一種。但是與EPA和DHA相比，它又具有價格低廉，可獲得性廣泛的優(yōu)勢。大量的研究發(fā)現(xiàn)膳食中添加α-亞麻酸可以預防和治療多種心血管疾病。α-亞麻酸具有降低血脂，降低血壓，減輕炎癥，抗血小板聚集，抑制血栓形成等多種生理作用。內(nèi)皮細胞對胰島素的敏感性增強促進了胰島素誘導的血管舒張功能。HE染色顯示，α-亞麻酸的膳食干預可以減輕果糖喂養(yǎng)組造成的平滑肌增生，中膜增厚等動脈血管組織學病理改變。Westernblot檢測示：與正常對照組相比，IRS-1蛋白磷酸化水平在果糖喂養(yǎng)組明顯升高，α-亞麻酸可以明顯降低IRS-1的磷酸化程度。而Akt蛋白磷酸化水平在果糖喂養(yǎng)組較正常對照組明顯降低，而α-亞麻酸顯著提高了Akt的磷酸化水平。
結(jié)論：α-亞麻酸對高血壓胰島素抵抗大鼠血管內(nèi)皮依賴的舒張功能具有明顯改善作用，還可以增強內(nèi)皮對胰島素的敏感性，胰島素介導的IRS-1/Akt信號轉(zhuǎn)導通路可能參與其中。α-亞麻酸干預后可以降低AngⅡ誘導內(nèi)皮細胞的MDA的增高，增加SOD、CAT和NO的表達，顯著降低AngⅡ誘導的內(nèi)皮細胞凋亡水平。α-亞麻酸+angII組中p-Akt表達增高，IRS-1蛋白磷酸化水平及caspase3的表達降低。給予p-Akt抑制劑LY294002處理后能夠明顯減弱α-亞麻酸的抗凋亡作用，細胞凋亡率和下游信號分子caspase3表達升高。結(jié)論：α-亞麻酸可以抑制AngⅡ誘導的內(nèi)皮凋亡，p-Akt及下游caspase3共同參與了這一作用的實現(xiàn)。
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