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實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基的應(yīng)用!百歐博偉生物
小楊 / 2020-10-28 08:55:55


一、背景

實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。

培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。

                                                      

培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置,最好現(xiàn)配現(xiàn)用。

天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外,也適于用來(lái)進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。

合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng),但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢,一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)進(jìn)行有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測(cè)定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。

半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。

二、應(yīng)用

用于實(shí)驗(yàn)室微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究:

按照用途可以將實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基分為以下幾種:

1、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基(加富培養(yǎng)基)

在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如血液、血清、酵母浸膏或生長(zhǎng)因子等。用以培養(yǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求高的微生物,如培養(yǎng)百日咳桿菌需要含有血液的培養(yǎng)基。

2、基礎(chǔ)培養(yǎng)基

含有一般細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖需要的基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是上面提及的天然培養(yǎng)基中的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基可作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。

3、鑒別培養(yǎng)基

是一類含有某種特定化合物或試劑的培養(yǎng)基。某種微生物在這種培養(yǎng)基上培養(yǎng)后,它所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與這種特定的化合物或試劑能發(fā)生某種明顯的特征性反應(yīng),根據(jù)這一特征性反應(yīng)可以將某種微生物與其他中微生物區(qū)別開來(lái)。主要用于不同類型微生物的快速鑒定,如用來(lái)檢查細(xì)菌能否產(chǎn)生硫化氫的醋酸鉛培養(yǎng)基。

4、選擇培養(yǎng)基

利用微生物對(duì)某種或某些化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同,在培養(yǎng)基中加入這類物質(zhì),抑制不需要的微生物生長(zhǎng),而利用所需分離的微生物生長(zhǎng),從而達(dá)到分離或鑒別某種微生物的目的,如分離真菌的馬丁氏培養(yǎng)基。既有選擇作用又有鑒別作用的培養(yǎng)基,如鑒別腸道桿菌的遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基。

微生物的生長(zhǎng)繁殖除需要一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外,還要求適當(dāng)?shù)腜H范圍。不同微生物對(duì)PH的要求不一樣,霉菌酵母菌的培養(yǎng)基的PH是偏酸性的,而細(xì)菌或放線菌的培養(yǎng)基的PH為中性或微堿性的。所以配制培養(yǎng)基時(shí),都要根據(jù)不同微生物對(duì)象用稀酸或稀堿將培養(yǎng)基的PH調(diào)到合適的范圍。但配制PH低的瓊脂培養(yǎng)基時(shí),如預(yù)先調(diào)好PH并在高壓蒸汽下滅菌,則瓊脂因水解不能凝固,因此,應(yīng)將培養(yǎng)基的成分和瓊脂分開滅菌后再混合,或在中性PH條件下滅菌后,再調(diào)整PH。

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