微生物培養(yǎng)基：孟加拉紅培養(yǎng)基的成分分析！
小楊 / 2024-03-28 09:12:21
微生物培養(yǎng)基是微生物檢測(cè)中的重要組成部分。在過(guò)去實(shí)驗(yàn)室往往是自制培養(yǎng)基使用，但是隨著社會(huì)的發(fā)展，現(xiàn)在大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)完全用商品化培養(yǎng)基代替了自制，這樣一來(lái)大大減少了工作量并且保證了質(zhì)量的穩(wěn)定。但是我們作為使用者，依然需要對(duì)培養(yǎng)基的基本成分的作用機(jī)理進(jìn)行了解。
微生物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
微生物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要以相對(duì)應(yīng)的有機(jī)物與無(wú)機(jī)物的形式存在。這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按照它們?cè)谖⑸餀C(jī)體中的生理作用不同，區(qū)分成碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水六大類(lèi)。
其中，化能異養(yǎng)型微生物的能源和碳源都來(lái)自于有機(jī)物，利用有機(jī)物的氧化分解產(chǎn)生能量進(jìn)行生長(zhǎng)。
化能自養(yǎng)型微生物以二氧化碳為碳源，利用無(wú)機(jī)化合物氧化過(guò)程中釋放出的能量進(jìn)行生長(zhǎng)。
孟加拉紅培養(yǎng)基的成分分析
霉菌酵母菌計(jì)數(shù)常用的培養(yǎng)基是孟加拉紅（虎紅）培養(yǎng)基，其中加入了一定量的氯霉素可有有效地抑制絕大多數(shù)細(xì)菌菌落的生長(zhǎng)。
以檢測(cè)霉菌酵母菌的孟加拉紅培養(yǎng)基為例：
對(duì)于具體成分的分析：
1、瓊脂(agar)：一種多糖分子化合物,(C12H18O9)n，膠體，冷卻至40℃開(kāi)始逐漸凝固，在微生物培養(yǎng)基中被用作凝固劑，來(lái)改變培養(yǎng)基的物理性狀(固體或半固體)，其本身不被細(xì)菌分解利用，也無(wú)營(yíng)養(yǎng)作用。
2、水分，微生物需水量隨種類(lèi)不同而不同，而它們的繁殖與培養(yǎng)基中的水分活性有關(guān)，水分活性越低，繁殖越差，一旦水分活性低于某種水平時(shí)，整個(gè)繁殖就停止。因此配置培養(yǎng)基時(shí)，水分與培養(yǎng)基配比要準(zhǔn)確，傾注平板的量不宜過(guò)少。
3、為避免培養(yǎng)基PH變化對(duì)微生物生長(zhǎng)造成影響，需要在培養(yǎng)基中加入緩沖劑。培養(yǎng)基的pH必須控制在合適的范圍內(nèi)，以滿足不同類(lèi)型微生物的需要。
例如，酵母菌和霉菌生長(zhǎng)所需的適宜pH在3.8～6.0范圍，但是，隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被逐漸分解，微生物不停的生長(zhǎng)繁殖和代謝，培養(yǎng)基的pH會(huì)開(kāi)始變化，因此，為了維持培養(yǎng)基pH的相對(duì)恒定，通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑，如上述的磷酸二氫鉀。磷酸二氫鉀呈弱酸性，當(dāng)培養(yǎng)基中堿性物質(zhì)積累導(dǎo)致OH-濃度增加時(shí)，OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物，培養(yǎng)基pH就不會(huì)過(guò)度升高。
4、注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比（如碳氮比），營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿足微生物正常生長(zhǎng)所需，濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用。以葡萄糖為例，低濃度時(shí)，隨著劑量的增加甚至可以干擾某些抑菌劑的抑菌作用，但是高濃度時(shí)，反而會(huì)起到抑菌效果。
5、抑菌成分的抑菌作用并非百分之百，因?yàn)楸仨毧紤]到高濃度的抑菌劑的效果會(huì)“不分?jǐn)澄?rdquo;，所以在這種情況下采用抑制非目標(biāo)菌的劑量往往不會(huì)最優(yōu)。
孟加拉紅培養(yǎng)基中的氯霉素，并不能完全抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，少量種類(lèi)的細(xì)菌會(huì)在孟加拉紅培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，并且會(huì)通過(guò)孟加拉紅的染色成為粉紅色，外觀上與酵母菌無(wú)異。所以當(dāng)我們檢測(cè)食品時(shí)發(fā)現(xiàn)了“酵母菌”，請(qǐng)不要忘記做鏡檢確認(rèn)。
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