柱孢綠僵菌的培養(yǎng)特性與繁殖方式及主要用途！
小楊 / 2024-04-08 08:47:47
柱孢綠僵菌(Metarhizium cylindrosporae)是蟬成蟲(chóng)流行病的主要病原。該菌是一種蟲(chóng)生真菌，有望成為無(wú)公害的殺蟲(chóng)農(nóng)藥。
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：培養(yǎng)物
拉丁屬名：Metarhizium Cylindrosporae
拉丁屬名：Metarhizium
種名加詞：cylindrosporae Q. T. Chen & H. L. Guo
收藏時(shí)間*：2006-6-23
來(lái)源歷史：日本森林綜合研究所轉(zhuǎn)福建省林業(yè)科學(xué)研究院
原產(chǎn)國(guó)：日本
資源歸類編碼：15151916103
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；教學(xué)
具體用途：生物防治
生物危害程度：四類
致病對(duì)象：動(dòng)物
分離基物：大褐蜩
采集地區(qū)：口永良部島
培養(yǎng)基信息：培養(yǎng)基編號(hào): -- 培養(yǎng)基名稱: SDAY
培養(yǎng)溫度：25
資源保護(hù)類型：培養(yǎng)物
保藏方法：定期移植法
共享方式：資源交換性共享
提供形式：斜面培養(yǎng)物
實(shí)物狀態(tài)：有實(shí)物
用途：生物防治
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、菌屬特征
菌落初期白色，茸狀。產(chǎn)孢階段菌落中間呈一叢叢具不同程度綠色的分生孢子堆。菌落顏色由綠色變灰綠直至黑色或保持其原來(lái)綠色，或者呈翡翠綠色。基質(zhì)反面色澤呈淡褐色，少數(shù)菌種可呈赭色。分生孢子梗單生或聚集，呈分生孢子梗座，緊密排列，帚狀分枝或輪生體。帚狀枝層次不復(fù)雜，1-2層，其頂端分枝，末端為瓶狀小梗，以向基式產(chǎn)生分生孢子。分生孢子單細(xì)胞，鏈狀連接。分生孢子以粘液粘成平行排列的柱狀孢子鏈柱，老培養(yǎng)體柱狀孢子鏈柱潰散為菱形或其他不規(guī)則形狀的分生孢子團(tuán)塊。分生孢子長(zhǎng)形互長(zhǎng)橢圓形，無(wú)色，成雄時(shí)呈淡綠色至橄欖綠色，形體一般較青霉屬孢子為大。本屬系昆蟲(chóng)寄生菌。
本屬菌應(yīng)同時(shí)具有下列五方面特征：
（1）菌落初期白色，產(chǎn)孢子階段呈不同程度綠色；
（2）分生孢子梗單生或者聚集，呈分生孢子梗座；
（3）分生孢子以粘液粘成平行排列的柱狀孢子團(tuán)塊；
（4）分生孢子長(zhǎng)形至長(zhǎng)橢圓形；
（5）屬于昆蟲(chóng)寄生菌。
三、培養(yǎng)特性
發(fā)育的最適溫度約24℃-26℃之間，在10℃-30℃之間仍可正常發(fā)育；分生孢子一般在60℃左右即能很快喪失發(fā)芽能力。此菌在pH4.7-10之間可以正常發(fā)育，但最適pH為6.9-7.4。雖然綠僵菌可以在無(wú)機(jī)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，但培養(yǎng)基中含有機(jī)氮源比含無(wú)機(jī)氨源對(duì)它的生長(zhǎng)更為適宜；綠僵菌對(duì)碳源則無(wú)特殊需要。在干燥情況下綠菌的分生孢子可以保存3年以上。
四、繁殖方式
蟲(chóng)菌體以裂殖和芽殖繁殖。
五、分布區(qū)域
大多分布在熱帶和亞熱帶地區(qū)。
金龜子綠僵菌為世界分布的廣譜性蟲(chóng)生真菌。
六、下屬品種
2009年Bischoff等對(duì)綠僵菌分類地位進(jìn)行了研究，綠僵菌屬共含12個(gè)種，分別為金龜子綠僵菌（M. anisopliae）、黃綠綠僵（M. flavoviride）、白色綠僵菌（M. ablum）、棕色綠僵菌（M. brunneum）、貴州綠僵菌（M. guizhouense）、平沙綠僵菌（M. pingshaense）、柱孢綠僵菌（M. cylindrosporum）、蝗綠僵菌（M. acridum）、大孢綠僵菌（M. majus）、耐寒綠僵菌（M. frigidum）、鱗翅目綠僵菌（M. lepidiotae）和球孢綠僵菌（M. globosum）。其中黃綠綠僵菌又包括4個(gè)變種，即黃綠綠僵菌小孢變種（M. f. minus）、黃綠綠僵菌大孢變種（M. f. flavoviride）、黃綠綠僵菌新西蘭變種（M. f. novazealandicum）和黃綠綠僵菌癭綿蚜變種（M. f. pemphogum）。
白色綠僵菌（Metarhizium ablum Petch）分生孢子擬卵形或橢圓形，菌落產(chǎn)孢前形成菌絲段（菌體）而不是由菌絲體組成的膨大團(tuán)塊，孢子灰棕色。該菌是葉蟬的專性寄生菌。
金龜子綠僵菌（ Metarhizium anisopliae Sorokin）在PDA培養(yǎng)基及察氏培養(yǎng)基上菌落絨毛狀至棉絮狀，初為白色，產(chǎn)孢時(shí)橄欖綠色。菌絲具分隔和分枝，透明，直徑為15-20μm，分生孢子梗很難與菌絲區(qū)別，直徑約2pm，其末端產(chǎn)生瓶形小梗，（8-16）μm×（1.5-2.2）μm。從瓶梗的末端以向基式連續(xù)形成長(zhǎng)串鏈的分生孢子。分生孢子單細(xì)胞，長(zhǎng)橢圓形到圓柱形，兩端鈍截形或鈍圓，大小變化較大，（5-9）μm×（2-4.5）μm。單個(gè)存在時(shí)色亮，成堆時(shí)成橄欖綠色，脫落的孢子常聚成菱形孢子團(tuán)狀或殼狀結(jié)構(gòu)。
Tulloch將該菌分為兩個(gè)變種，即小孢變種和大孢變種。小孢變種即原變種分生孢子小，（5-8）μm×（3-4）pm，世界性分布，寄主廣泛，至少寄生8個(gè)目200余種昆蟲(chóng)及一些螨類和線蟲(chóng)。在生物防治中具有重要價(jià)值，已開(kāi)發(fā)為真菌殺蟲(chóng)劑，并已在巴西等國(guó)家注冊(cè)。大孢變種分生孢子大，（10-16）rm×（3-4）μm，較少見(jiàn)，寄主范圍較窄。
黃綠綠僵菌（ Metarhizium flavoviride）在察氏培養(yǎng)基上，菌落呈黃綠色，培養(yǎng)2周菌落直徑達(dá)55mm。分生孢子梗疏松輪狀分枝，其上著生1-2個(gè)瓶梗，瓶梗桿狀，頂部尖，大小為（7.2-12.5）μm×（1.8-3.0）μm。分生孢子單胞，卵圓形，具不同的端部，大小為（7.2-9.3）μm×（3-4）μm，在瓶梗上形成向基性的鏈。
七、感染過(guò)程
綠僵菌對(duì)寄主昆蟲(chóng)的感染與其它蟲(chóng)菌基本上相同。綠僵菌的分生孢子很容易附著于寄主昆蟲(chóng)皮膚的節(jié)間處，當(dāng)遇到適宜的溫濕度，分生孢子即行萌發(fā)，產(chǎn)生芽管，并形成菌絲。菌絲可分泌能夠溶解幾丁質(zhì)的酶，溶解昆蟲(chóng)體壁。并借助菌對(duì)寄主侵入產(chǎn)生的壓力，使菌絲侵入寄主的表皮，進(jìn)而逐步向內(nèi)侵染，侵入昆蟲(chóng)的脂肪組織和肌肉。菌絲在昆蟲(chóng)體內(nèi)繁殖，進(jìn)而導(dǎo)致昆蟲(chóng)死亡。當(dāng)寄主昆蟲(chóng)被綠僵菌初感時(shí)，在體壁可見(jiàn)到黃褐色的斑點(diǎn)，由于受到綠僵菌毒素的作用，昆蟲(chóng)開(kāi)始表現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)障礙的現(xiàn)象。幼蟲(chóng)取食停止，對(duì)刺激的反應(yīng)降低，最終死亡。死亡后的尸體僵化，蟲(chóng)體內(nèi)的菌絲開(kāi)始向體外伸延，蟲(chóng)尸很快被一層白色菌絲所包被，之后一、二日，在菌絲上形成分生孢子梗和分生孢子，則變?yōu)榫G色或暗綠色。
八、主要用途
綠僵菌寄主范圍廣，可寄生8目30科200余種害蟲(chóng)。主要用于防治金龜子、象甲、金針蟲(chóng)、蛾蝶幼蟲(chóng)、蝽和蚜蟲(chóng)等害蟲(chóng)。綠僵菌有金龜綠僵菌和黃綠綠僵菌等變種，生產(chǎn)上主要用金龜綠僵菌變種的制劑來(lái)防治害蟲(chóng)，如地下害蟲(chóng)、蛀干害蟲(chóng)、桃小食心蟲(chóng)、椰心葉甲、飛蝗、甘藍(lán)小菜蛾、菜青蟲(chóng)和番茄棉鈴蟲(chóng)，以及小水體中的蚊幼蟲(chóng)孑孓等衛(wèi)生性害蟲(chóng)。生產(chǎn)上常用劑型有粉劑（每克含孢量23億-28億個(gè)或50億以上）、10%顆粒劑和20%殺蝗綠僵菌油懸浮劑。
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