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小鼠腎系膜細(xì)胞試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠的腎系膜細(xì)胞。小鼠腎系膜細(xì)胞試劑盒提供了的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率高。此外，小鼠腎系膜細(xì)胞試劑盒還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以程度地降低所培養(yǎng)的小鼠原代腎系膜細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。

 

小鼠腎系膜細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的腎系膜細(xì)胞組織細(xì)胞。

 

 

（1）小鼠腎系膜細(xì)胞組織解離液

 

（2）小鼠腎系膜細(xì)胞組織處理緩沖液

 

（3）小鼠腎系膜細(xì)胞成纖維抑制劑

 

（4）小鼠腎系膜組織洗液

 

（5）小鼠腎系膜細(xì)胞生長因子及血清

 

（6）小鼠腎系膜細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

 

（7）小鼠腎系膜組織預(yù)備液。

 

 

腎小球系膜細(xì)胞又稱間充質(zhì)細(xì)胞、血管系膜細(xì)胞、球內(nèi)系膜細(xì)胞、毛細(xì)血管間細(xì)胞或深部內(nèi)皮細(xì)胞。腎小球系膜細(xì)胞是一種腎小球固有細(xì)胞，位于腎小球毛細(xì)血管袢之間，鄰接內(nèi)皮細(xì)胞或基底膜，形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞突起可深至內(nèi)皮細(xì)胞和基底膜之間，或經(jīng)內(nèi)皮細(xì)胞之間伸入毛細(xì)血管腔內(nèi)。腎小球系膜細(xì)胞具有分泌細(xì)胞基質(zhì)、產(chǎn)生細(xì)胞因子、支撐腎小球毛細(xì)血管叢、吞噬和清除大分子物質(zhì)以及類似平滑肌細(xì)胞收縮的功能。

 

腎小球系膜細(xì)胞呈星形，有多個(gè)突起，有豐富的細(xì)胞質(zhì)。位于腎小球的中軸區(qū)，分布于毛細(xì)血管簇中的毛細(xì)血管之間。主要功能包括維持腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)的完整性，調(diào)節(jié)腎小球?yàn)V過率，分泌多種細(xì)胞生長因子如轉(zhuǎn)化生長因子β、血小板源性生長因子以及腎素等生物活性物質(zhì)，從而發(fā)揮多種生物學(xué)功能。入球小動脈與出球小動脈在進(jìn)出腎小球處與腎小球系膜細(xì)胞相連接，因此腎小球系膜細(xì)胞的收縮活動可增強(qiáng)小動脈的收縮作用，從而控制腎小球內(nèi)血液分流。小鼠腎系膜細(xì)胞屬于血管周細(xì)胞，位于腎小球毛細(xì)血管袢之間。其中，系膜細(xì)胞有多種生理功能包括和分泌系膜基質(zhì)，胞吞和加工血漿大分子，通過系膜細(xì)胞收縮和分泌血管活性激素控制腎小球血流動力學(xué)。腎系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)，如IgA腎病，狼瘡性腎炎，糖尿病腎病以及在腎小球硬化過程中細(xì)胞外基質(zhì)增加。在培養(yǎng)中細(xì)胞增殖和基質(zhì)合成/降解是通過細(xì)胞因子和生長因子調(diào)控的，因此細(xì)胞培養(yǎng)是研究系膜擴(kuò)張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。

 

雖然腎系膜組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用小鼠腎系膜細(xì)胞試劑盒中提供的腎系膜組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的腎系膜組織片能使得腎系膜組織中腎系膜細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎系膜細(xì)胞分離開來。

 

 

 

糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病特有而嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥,也是西方國家終末腎病(end stage renal defailure,ESRD)產(chǎn)生并最終依靠腎透析維持生命的主要原因。大量研究顯示,在糖尿病腎病早期腎組織中即見到單核巨噬細(xì)胞浸潤、核因子κB(NF-κB)等炎癥因子產(chǎn)生增加,提示糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展與炎癥有密切關(guān)聯(lián),而NF-κB在炎癥反應(yīng)中具有重要作用。在所有炎癥反應(yīng)中均可以發(fā)現(xiàn)NF-κB活性增高,當(dāng)抑制其活性以后炎癥的病理過程則被阻止。

 

泛素化修飾在對高糖誘導(dǎo)的NF-κB信號的活化中有重要調(diào)節(jié)作用。然而NF-κB信號的調(diào)節(jié)機(jī)制復(fù)雜,泛素化修飾是一個(gè)動態(tài)平衡過程,NF-κB信號通路也受到去泛素化修飾的調(diào)節(jié)。在眾多調(diào)節(jié)NF-κB信號去泛素化酶中,去泛素化酶圓柱瘤蛋白(cylindromatosis,CYLD)是NF-κB信號的主要負(fù)性調(diào)控因子和炎癥抑制因子之一。

 

通過觀察高糖刺激后小鼠腎系膜細(xì)胞CYLD、總IKBα、p-IKBα、p-NF-κB p65、IKKγ、MCP-1、IL-6、IL-8表達(dá)變化,然后分別沉默和過表達(dá)CYLD基因,檢測高糖誘導(dǎo)的NF-κB通路中總的IKBα、p-IKBα、IKKγ、p-NF-κB p65及下游炎癥因子MCP-1、IL-6、IL-8的表達(dá),探討去泛素化酶CYLD在糖尿病腎病NF-KB信號通路激活中的調(diào)控作用。

 

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