沃氏葡萄球菌：用于食醋釀造及產(chǎn)酸和纖維素酶
小楊 / 2024-07-10 08:52:57
沃氏葡萄球菌是Staphylococcus屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。革蘭陽性球菌，直徑0.5~1.5μm，成單，雙，短鏈或不規(guī)則葡萄狀排列。主要用途為研究；分析檢測，具體用途為致病菌檢測芯片研發(fā)。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Staphylococcus Warneri
拉丁名稱：Staphylococcus warneri
來源歷史：←北京工商大學(xué)
收藏時(shí)間：2018/1/22
原始編號：B8#47.CS
原產(chǎn)國：中國
資源歸類編碼：15131315101
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究
特征特性：化能異養(yǎng)；嗜溫；趨酸，好氧。CYC瓊脂37℃培養(yǎng)2天， 菌落呈圓形，乳白色 ，表面光滑，濕潤。菌體球形，單個(gè)、成對或鏈狀排列，革蘭氏陽性。
具體用途：用于食醋釀造，產(chǎn)酸 、纖維素酶。
生物危害程度：四類
培養(yǎng)基編號：CM0002
培養(yǎng)基名稱：營養(yǎng)肉汁瓊脂
培養(yǎng)基成分：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。
培養(yǎng)溫度：37℃
需氧類型：好氧
分離基物：山西老陳醋醋醅
采集地：中國河北省定州市
保存方法：-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享
提供形式：凍干物
用途：用于食醋釀造，產(chǎn)酸 、纖維素酶。
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基：營養(yǎng)肉汁瓊脂
2、培養(yǎng)基配方：牛肉膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃，15min。
3、培養(yǎng)溫度：37℃
4、培養(yǎng)時(shí)間：24-48h
三、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2、干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4、過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
五、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1、凍干首次活化，干粉要全部用完，不能保留，參考“開管說明”用無菌吸管吸取0.3ml~0.5ml的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解，吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過2支斜面或平板；若接種液體培養(yǎng)基，則試管中液體培養(yǎng)基不超過5ml為宜） ；
2、復(fù)蘇后，微生物菌種應(yīng)保藏于建議的溫度、清潔和干燥的地方，室溫放置時(shí)間過長會導(dǎo)致菌種衰退。
3、初次使用時(shí)請按照本說明書推薦條件進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，
百歐博偉生物不負(fù)責(zé)任。
4、使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
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