二倍體細胞培養(yǎng)法
二倍體細胞培養(yǎng)法與一般培養(yǎng)相同,關(guān)鍵在于傳代,其傳代程序為:
1. 吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中。
2. 用溫BSS沖洗1次。
3. 用0.25%溫胰蛋白酶消化,加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可;作用1~5分鐘。
4. 待細胞附著松動、細胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大,便終止消化。為防止細胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液(新舊培養(yǎng)液按2:1新舊混合)。
5. 輕輕反復吹打制成單個細胞懸液。
6. 按一分為二比例接種培養(yǎng)。