小鼠骨髓瘤細胞的核心應用與培養(yǎng)指南及相關研究！
小楊 / 2025-03-26 09:19:05
小鼠骨髓瘤細胞是生物醫(yī)學研究中常用的一類細胞系，尤其在單克隆抗體生產(chǎn)（如雜交瘤技術）中發(fā)揮關鍵作用。
以下是關于小鼠骨髓瘤細胞的詳細介紹：
1、背景與特點
來源：
小鼠骨髓瘤細胞源自小鼠B淋巴細胞系的惡性腫瘤（漿細胞瘤），具有無限增殖能力。
缺陷特性：大多數(shù)骨髓瘤細胞系（如SP2/0、NS0）經(jīng)過誘變處理，缺乏HGPRT酶（次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶），無法通過“補救途徑”合成DNA，因此在HAT培養(yǎng)基中會死亡。這一特性被用于篩選雜交瘤細胞。
2、常用的小鼠骨髓瘤細胞系
SP2/0-Ag14：最常用，源自BALB/c小鼠，HGPRT缺陷，與脾細胞融合后用于生產(chǎn)單克隆抗體。
NS0/1：同樣缺乏HGPRT酶，但部分細胞系需添加膽固醇或脂類輔助生長。
P3X63Ag8.653：早期常用，現(xiàn)逐漸被SP2/0取代。
3、核心應用：雜交瘤技術
原理：將
小鼠骨髓瘤細胞（無限增殖能力）與免疫后的小鼠脾細胞（分泌特定抗體）融合，形成雜交瘤細胞，既能無限增殖，又能分泌單一抗體。
篩選過程：
使用HAT培養(yǎng)基（含次黃嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶），骨髓瘤細胞因缺乏HGPRT酶死亡，未融合的脾細胞無法長期存活，只有雜交瘤細胞存活。
通過有限稀釋法篩選單克隆雜交瘤細胞株。
4、科研與工業(yè)應用
單克隆抗體生產(chǎn)：用于診斷試劑、治療性抗體（如抗癌藥物）開發(fā)。
免疫學研究：研究B細胞分化、抗體分泌機制。
癌癥模型：探究骨髓瘤發(fā)生機制及藥物篩選。
5、培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：常用RPMI 1640，添加10-20%胎牛血清（FBS）。
環(huán)境：37℃、5% CO?，懸浮或半貼壁生長。
注意事項：定期檢測支原體污染，避免細胞過度密集。
6、注意事項
倫理規(guī)范：涉及動物細胞的研究需符合實驗室動物倫理要求。
穩(wěn)定性：長期傳代可能導致細胞特性改變，需定期凍存原始細胞。
若有具體問題（如實驗設計、細胞培養(yǎng)細節(jié)），可進一步探討！
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