人皮脂腺細(xì)胞系的培養(yǎng)條件與注意事項(xiàng)及主要研究應(yīng)用！
小楊 / 2025-03-31 09:05:20
人皮脂腺細(xì)胞系是研究皮膚生理、皮脂分泌及相關(guān)疾?。ㄈ琊畀彛┑闹匾ぞ?。以下是關(guān)于該領(lǐng)域的系統(tǒng)整理：
一、常用人皮脂腺細(xì)胞系
來源：成人面部皮膚，通過HPV16 E6/E7基因永生化。
特點(diǎn)：
保留皮脂腺細(xì)胞特征（如脂質(zhì)合成、雄激素受體表達(dá)）。
需添加EGF、胰島素等生長因子維持增殖。
應(yīng)用：研究皮脂分泌調(diào)控、雄激素信號通路。
2、SEB-1細(xì)胞系
來源：鼻部皮膚，HPV永生化。
特點(diǎn)：
高增殖能力，常用于藥物篩選（如維甲酸、抗菌劑）。
對炎癥因子（如IL-1β）敏感，可模擬痤瘡炎癥。
應(yīng)用：測試抗痤瘡成分、氧化應(yīng)激研究。
3、Seb-E6/E7細(xì)胞系
來源：永生化方法類似，但脂質(zhì)合成更活躍。
特點(diǎn)：適合研究脂代謝（如甘油三酯合成）及痤瘡丙酸桿菌相互作用。
二、主要研究應(yīng)用
1、皮脂分泌機(jī)制
調(diào)控因子：雄激素（如雙氫睪酮）、PPARγ、SCD1酶。
檢測方法：油紅O染色（脂滴）、氣相色譜（脂質(zhì)組成）。
2、痤瘡病理模型
炎癥誘導(dǎo)：用P. acnes刺激細(xì)胞，檢測IL-6、IL-8釋放。
藥物評價：維A酸類藥物、過氧化苯甲酰對脂質(zhì)合成的影響。
3、藥物與化妝品開發(fā)
功效測試：控油成分（如水楊酸、鋅）、抗炎劑（如積雪草苷）。
三、培養(yǎng)條件與注意事項(xiàng)
培養(yǎng)基：DMEM/F12 + 10% FBS + 添加物（如5 μg/mL胰島素、10 ng/mL EGF）。
傳代：胰酶消化，1:3~1:4傳代，避免過度融合（影響分化）。
挑戰(zhàn)：
永生化影響：與原代細(xì)胞相比，可能喪失部分分化能力。
解決方案：3D培養(yǎng)（如類器官）或共培養(yǎng)體系（與角質(zhì)形成細(xì)胞）。
四、功能分析技術(shù)
1、脂質(zhì)分析
油紅O染色：定量脂滴面積（ImageJ分析）。
脂質(zhì)組學(xué)：LC-MS檢測脂肪酸、蠟酯等成分。
2、分子機(jī)制
qPCR/WB：檢測FASN、ACACA、AR等基因表達(dá)。
熒光報告基因：構(gòu)建PPARγ啟動子熒光素酶載體。
五、最新進(jìn)展與替代模型
1、CRISPR編輯細(xì)胞系：敲入痤瘡相關(guān)突變（如IL-1α過表達(dá)）。
2、iPSC衍生皮脂腺細(xì)胞：保留更高生理相關(guān)性，但成本較高。
3、微流體芯片：模擬皮脂腺-毛囊單元的動態(tài)微環(huán)境。
六、選擇細(xì)胞系的建議
基礎(chǔ)研究：SZ95（雄激素響應(yīng)）、Seb-E6/E7（高脂質(zhì)合成）。
藥物篩選：SEB-1（增殖快，適合高通量）。
復(fù)雜機(jī)制：優(yōu)先3D模型或共培養(yǎng)體系。
通過合理選擇細(xì)胞模型并結(jié)合多組學(xué)技術(shù)，
人皮脂腺細(xì)胞系在皮膚科研究和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中具有重要價值。
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