你知道如何選擇適合的培養(yǎng)基來培養(yǎng)腸道巴氏桿菌嗎？
小楊 / 2025-07-12 09:10:58
百歐博偉生物：選擇適合培養(yǎng)
腸道巴氏桿菌的培養(yǎng)基，需結合其生物學特性（如營養(yǎng)需求、代謝特點）和培養(yǎng)目的（如分離、純化、鑒定），以下是具體的選擇指南和推薦方案：
一、腸道巴氏桿菌的核心培養(yǎng)需求
營養(yǎng)要求較高：需富含蛋白質、氨基酸和生長因子（如血液、血清中的營養(yǎng)成分），普通基礎培養(yǎng)基（如
營養(yǎng)瓊脂）難以滿足其生長需求。
氧氣耐受性：可在有氧環(huán)境中生長，但部分菌株在微需氧或厭氧條件下生長更佳。
生化特性：氧化酶陽性、觸酶陽性，不發(fā)酵乳糖（多數(shù)菌株），可作為鑒別依據(jù)。
二、推薦培養(yǎng)基類型及適用場景
1、基礎增菌培養(yǎng)基：用于樣本中少量巴氏桿菌的富集
推薦：含血清的肉湯培養(yǎng)基
配方：普通肉湯（蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉）中添加 5%-10% 滅活動物血清（如牛血清、馬血清）或全血。
原理：血清提供生長因子（如維生素、氨基酸），促進巴氏桿菌增殖，尤其適用于糞便、腸道內容物等含雜菌較多的樣本，可先通過增菌提高檢出率。
培養(yǎng)條件：35-37℃，需氧或 5% CO?環(huán)境，培養(yǎng) 18-24 小時。
2、分離純化培養(yǎng)基：用于從混合菌中分離單個菌落
配方：基礎瓊脂 + 5%-10% 脫纖維羊血或兔血。
特點：腸道巴氏桿菌在血瓊脂上生長良好，形成圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊的小菌落（直徑 1-2mm），多數(shù)菌株不溶血（少數(shù)可能出現(xiàn) α- 溶血），可與溶血的致病菌（如鏈球菌）區(qū)分。
優(yōu)勢：操作簡便，適合初步分離，且能通過溶血特性初步鑒別。
推薦 2：
巧克力瓊脂（Chocolate Agar）
配方：血瓊脂經 80-90℃加熱使血紅蛋白釋放，形成褐色培養(yǎng)基。
特點：營養(yǎng)更豐富（加熱后的血液成分更易被利用），適合營養(yǎng)需求更高的巴氏桿菌菌株，尤其適用于樣本中菌量極少的情況。
3、選擇性培養(yǎng)基：用于抑制雜菌，提高分離效率
腸道巴氏桿菌對某些抗生素敏感，需謹慎選擇選擇性培養(yǎng)基（避免抑制目標菌），推薦：
改良麥康凱瓊脂（不含結晶紫或低濃度結晶紫）
原理：普通麥康凱瓊脂含結晶紫和膽鹽，可抑制革蘭氏陽性菌，但高濃度結晶紫可能抑制巴氏桿菌。改良后降低結晶紫濃度，既保留對雜菌的抑制，又允許巴氏桿菌生長（因巴氏桿菌不發(fā)酵乳糖，菌落呈無色透明）。
適用場景：樣本中革蘭氏陰性雜菌（如
大腸桿菌）較多時，可提高分離純度。
哥倫比亞血瓊脂 + 抗生素添加劑（如萬古霉素、桿菌肽）
原理：添加針對革蘭氏陽性菌的抗生素（萬古霉素等），抑制腸道中的葡萄球菌、鏈球菌等，而巴氏桿菌對其不敏感，可選擇性生長。
4、鑒別培養(yǎng)基：用于生化特性鑒定
結合腸道巴氏桿菌的生化反應（氧化酶陽性、不發(fā)酵乳糖等），可選用：
氧化酶試驗培養(yǎng)基：挑取菌落與氧化酶試劑反應，陽性（紫色）可初步確認（與
沙門氏菌、
大腸桿菌等氧化酶陰性菌區(qū)分）。
糖發(fā)酵管：檢測對葡萄糖、乳糖的發(fā)酵能力（多數(shù)巴氏桿菌發(fā)酵葡萄糖產酸不產氣，不發(fā)酵乳糖），與發(fā)酵乳糖的大腸桿菌區(qū)分。
三、選擇培養(yǎng)基的注意事項
優(yōu)先滿足營養(yǎng)需求：無論選擇哪種培養(yǎng)基，必須保證含血清或血液成分，否則腸道巴氏桿菌可能不生長或生長微弱。
避免過度抑制：選擇性培養(yǎng)基需先驗證，確保目標菌能生長，避免因抗生素濃度過高導致漏檢。
結合樣本類型：
若樣本為新鮮糞便（雜菌多）：先增菌（血清肉湯），再接種血瓊脂或改良選擇性培養(yǎng)基。
若樣本為純培養(yǎng)物（如菌落純化）：直接接種血瓊脂或巧克力瓊脂即可。
參考培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基需配合適宜的溫度（35-37℃）和氣體環(huán)境（需氧或微需氧），否則即使培養(yǎng)基合適，也可能影響生長。
四、總結
培養(yǎng)
腸道巴氏桿菌的核心是提供富含血清/血液的營養(yǎng)環(huán)境，首選血瓊脂平板（分離純化）和含血清的肉湯（增菌）；若需抑制雜菌，可選用改良的低選擇性培養(yǎng)基（如低結晶紫麥康凱瓊脂）。同時，需結合生化試驗（如氧化酶陽性）進一步確認，確保與其他腸道菌區(qū)分。
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