培養(yǎng)純凈水微生物時(shí)，應(yīng)該選擇哪些種類的培養(yǎng)基？
小楊 / 2025-10-21 09:30:55
百歐博偉生物：在純凈水的微生物培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的選擇需根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)（如菌落總數(shù)、致病菌、指示菌等）和微生物的營(yíng)養(yǎng)需求而定。以下是常見(jiàn)檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基種類及特點(diǎn)，涵蓋基礎(chǔ)計(jì)數(shù)、指示菌檢測(cè)和特定致病菌篩查等場(chǎng)景：
一、菌落總數(shù)檢測(cè)：通用營(yíng)養(yǎng)型培養(yǎng)基
菌落總數(shù)是評(píng)估純凈水微生物污染程度的基礎(chǔ)指標(biāo)，需選擇能支持多數(shù)異養(yǎng)微生物生長(zhǎng)的非選擇性培養(yǎng)基，常用以下兩種：
成分：含蛋白胨、牛肉膏、瓊脂等，提供碳源、氮源和維生素，營(yíng)養(yǎng)全面。
適用范圍：適用于大多數(shù)細(xì)菌（如革蘭氏陽(yáng)性菌、陰性菌）的生長(zhǎng)，是菌落總數(shù)檢測(cè)的國(guó)標(biāo)推薦培養(yǎng)基。
培養(yǎng)條件：36℃±1℃，有氧培養(yǎng) 48h±2h，形成可見(jiàn)菌落便于計(jì)數(shù)。
成分：含胰蛋白胨、大豆蛋白胨等，營(yíng)養(yǎng)更豐富，能支持部分營(yíng)養(yǎng)要求較高的微生物生長(zhǎng)。
適用場(chǎng)景：常用于國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)中的菌落總數(shù)檢測(cè)，尤其適合對(duì)營(yíng)養(yǎng)敏感的菌株（如某些革蘭氏陽(yáng)性球菌）。
二、指示菌檢測(cè)：選擇性 + 鑒別性培養(yǎng)基
指示菌（如
大腸菌群、
耐熱大腸菌群、
銅綠假單胞菌等）是評(píng)估純凈水衛(wèi)生安全的關(guān)鍵指標(biāo)，需用選擇性培養(yǎng)基抑制雜菌、同時(shí)通過(guò)特定生化反應(yīng)鑒別目標(biāo)菌：
1、大腸菌群及大腸埃希氏菌檢測(cè)
初篩：乳糖膽鹽發(fā)酵管（Lactose Bile Broth, LBB）
作用：含乳糖（碳源）和膽鹽（抑制革蘭氏陽(yáng)性菌），大腸菌群發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，用于初篩。
培養(yǎng)條件：36℃±1℃培養(yǎng) 24h±2h，觀察產(chǎn)氣情況。
分離與鑒別：伊紅美藍(lán)瓊脂（Eosin Methylene Blue Agar, EMB）
特性：選擇性成分（伊紅、美藍(lán)）抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，大腸埃希氏菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，形成紫黑色、有金屬光澤的菌落，其他大腸菌群形成粉紅色或紫紅色菌落，便于區(qū)分。
確認(rèn)：EC 肉湯（Escherichia coli Broth）
用途：用于耐熱大腸菌群的確認(rèn)，44.5℃±0.5℃培養(yǎng) 24h±2h，通過(guò)產(chǎn)氣判斷，特異性更高。
2、銅綠假單胞菌檢測(cè)（純凈水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)必檢項(xiàng)）
選擇性增菌：十六烷三甲基溴化銨瓊脂（Cetrimide Agar）
成分：含十六烷三甲基溴化銨（抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性菌）、乳糖等，銅綠假單胞菌可在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，形成綠色或藍(lán)綠色菌落（因產(chǎn)生綠膿素）。
培養(yǎng)條件：36℃±1℃培養(yǎng) 48h±2h，觀察菌落顏色和形態(tài)。
確認(rèn)：硝酸鹽蛋白胨水
用于檢測(cè)銅綠假單胞菌的硝酸鹽還原能力，輔助鑒別。
月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯
用于大腸菌群的富集培養(yǎng)，十二烷基硫酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，適合水樣中低濃度菌的檢出。
疊氮鈉葡萄糖瓊脂
含疊氮鈉（抑制革蘭氏陰性菌），用于腸球菌的分離，腸球菌可在此培養(yǎng)基上形成紅色菌落。
三、特定致病菌檢測(cè)：針對(duì)性培養(yǎng)基
若需篩查純凈水是否污染致病菌（如
沙門氏菌、
志賀氏菌等），需使用特異性更強(qiáng)的選擇性培養(yǎng)基：
1、沙門氏菌檢測(cè)
增菌：緩沖蛋白胨水（BPW）、四硫磺酸鈉煌綠肉湯（TTB），抑制雜菌并促進(jìn)沙門氏菌復(fù)蘇。
分離：SS 瓊脂（Salmonella-Shigella Agar），含膽鹽、煌綠等抑制非目標(biāo)菌，沙門氏菌形成無(wú)色、中心黑色的菌落。
2、志賀氏菌檢測(cè)
增菌：GN 增菌液（抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性菌）。
分離：伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）或麥康凱瓊脂，志賀氏菌不發(fā)酵乳糖，形成無(wú)色透明菌落。
四、特殊需求：低菌量水樣的富集培養(yǎng)基
純凈水微生物含量通常極低（如菌落總數(shù)≤10 CFU/mL），需通過(guò)富集培養(yǎng)基提高檢出率：
營(yíng)養(yǎng)肉湯（Nutrient Broth, NB）：液體培養(yǎng)基，無(wú)瓊脂，可大量富集細(xì)菌，常用于樣品預(yù)培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)種至固體培養(yǎng)基計(jì)數(shù)。
R2A 瓊脂：低營(yíng)養(yǎng)成分培養(yǎng)基，適合水中寡營(yíng)養(yǎng)微生物（如在貧營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中存活的細(xì)菌）生長(zhǎng)，比營(yíng)養(yǎng)瓊脂更敏感，尤其適合純凈水等低菌量樣品。
五、選擇原則總結(jié)
目標(biāo)導(dǎo)向：檢測(cè)菌落總數(shù)用通用培養(yǎng)基（NA、TSA）；檢測(cè)指示菌或致病菌用選擇性 + 鑒別性培養(yǎng)基。
靈敏度匹配：低菌量純凈水優(yōu)先選 R2A 瓊脂或富集培養(yǎng)基，提高檢出率。
標(biāo)準(zhǔn)合規(guī)性：優(yōu)先采用國(guó)標(biāo)（GB 4789 系列）或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（ISO）推薦的培養(yǎng)基，確保結(jié)果可追溯。
例如：按照《GB 17324-2023 包裝飲用水》要求，
菌落總數(shù)檢測(cè)用營(yíng)養(yǎng)瓊脂，
銅綠假單胞菌檢測(cè)用十六烷三甲基溴化銨瓊脂，
大腸菌群檢測(cè)用乳糖膽鹽發(fā)酵管和伊紅美藍(lán)瓊脂。
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