稀釋平板菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中哪些因素會(huì)影響菌落的生長(zhǎng)？
小楊 / 2025-10-25 09:43:11
百歐博偉生物：培養(yǎng)基特性、培養(yǎng)條件、操作細(xì)節(jié)及樣品本身狀態(tài)，是影響稀釋平板菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中菌落生長(zhǎng)的四大核心因素。
1、培養(yǎng)基相關(guān)因素
營(yíng)養(yǎng)成分：碳源、氮源、維生素等比例需匹配目標(biāo)微生物需求，營(yíng)養(yǎng)不足會(huì)導(dǎo)致菌落小、生長(zhǎng)緩慢。
物理狀態(tài)：瓊脂濃度（通常 1.5%-2%）需適宜，過(guò)軟易污染，過(guò)硬影響微生物擴(kuò)散生長(zhǎng)。
pH 值：需符合微生物最適生長(zhǎng)范圍（細(xì)菌多為 7.0-7.5，真菌多為 5.0-6.0），過(guò)酸或過(guò)堿會(huì)抑制生長(zhǎng)。
抑菌/促菌成分：培養(yǎng)基中若有雜菌抑制劑（如抗生素）或未去除的有害物質(zhì)，會(huì)直接抑制目標(biāo)菌生長(zhǎng)。
2、培養(yǎng)條件因素
溫度：需控制在目標(biāo)微生物最適生長(zhǎng)溫度（如
大腸桿菌 37℃、
酵母菌 28℃），溫度偏差會(huì)減緩生長(zhǎng)或?qū)е戮湫螒B(tài)異常。
氧氣環(huán)境：需區(qū)分好氧菌、厭氧菌或兼性厭氧菌，厭氧微生物需無(wú)氧培養(yǎng)裝置，否則無(wú)法生長(zhǎng)。
培養(yǎng)時(shí)間：細(xì)菌通常培養(yǎng) 18-24 小時(shí)，真菌需 2-3 天，時(shí)間不足菌落未形成，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)菌落重疊或老化。
濕度：培養(yǎng)環(huán)境濕度不適會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基失水干裂，影響微生物代謝和菌落形成。
3、操作過(guò)程因素
接種量與涂布均勻度：接種量過(guò)多易導(dǎo)致菌落重疊，涂布不均會(huì)使局部微生物濃度過(guò)高，影響單個(gè)菌落生長(zhǎng)。
稀釋過(guò)程：稀釋不徹底會(huì)導(dǎo)致微生物濃度過(guò)高，稀釋過(guò)快或移液污染可能引入雜菌，干擾目標(biāo)菌落生長(zhǎng)。
無(wú)菌操作：器材未滅菌、操作環(huán)境雜菌污染，會(huì)導(dǎo)致雜菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)，抑制目標(biāo)菌落生長(zhǎng)。
4、樣品本身因素
樣品中微生物活性：樣品儲(chǔ)存不當(dāng)（如高溫、干燥）會(huì)導(dǎo)致微生物死亡或活性降低，難以形成菌落。
樣品中的抑制物：若樣品本身含防腐劑、重金屬等物質(zhì)，會(huì)隨菌液接種到平板，抑制微生物生長(zhǎng)。
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