綜合馬鈴薯培養(yǎng)基的滅菌與保存方法及適合培養(yǎng)的微生物！
小楊 / 2025-11-05 09:25:09
綜合馬鈴薯培養(yǎng)基的保存方法
綜合馬鈴薯培養(yǎng)基的保存核心是“無菌密封 + 適宜溫濕度”，分未接種（空白培養(yǎng)基）和已接種（含菌種）兩種場景，具體方法如下：
1、空白培養(yǎng)基（未接種）保存
保存條件：密封后置于 4℃冰箱冷藏，避免冷凍（防止瓊脂破裂）。
密封要求：試管斜面需用石蠟或無菌膠塞密封管口，培養(yǎng)皿需用膜纏繞邊緣，隔絕空氣和雜菌。
保存期限：冷藏可保存 1-2 個月，期間需定期檢查，若出現(xiàn)渾濁、霉點或凝固狀態(tài)異常，需丟棄。
注意事項：使用前需提前取出，恢復至室溫后再接種，避免溫差導致培養(yǎng)基表面凝結水珠。
2、已接種培養(yǎng)基（含菌種）保存
短期保存（1-3 個月）：4℃冰箱冷藏，密封方式同空白培養(yǎng)基，適用于臨時使用的菌種。
中期保存（3-6 個月）：斜面菌種密封后冷藏，每 3 個月轉接一次新培養(yǎng)基，維持菌種活性。
長期保存（配合其他方法）：僅靠該培養(yǎng)基難以長期保存，需結合砂土管法、冷凍干燥法等，或定期轉接更新。
注意事項：避免反復溫差變化，冷藏時遠離冰箱門（減少溫度波動），保存期間禁止打開密封裝置。
3、通用保存關鍵要點
環(huán)境要求：保存環(huán)境需干燥、清潔，避免與腐蝕性物質或雜菌污染源共存。
檢查頻率：每周觀察一次，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基霉變、漏液或菌種異常，及時處理。
廢棄處理：過期或污染的培養(yǎng)基，需高壓滅菌（121℃，15 分鐘）后再丟棄，避免污染環(huán)境。
綜合馬鈴薯培養(yǎng)基的滅菌方法
1、核心滅菌方法：高壓蒸汽滅菌法（首選）
這是最常用且效果最可靠的方式，能徹底殺滅培養(yǎng)基中的細菌、真菌孢子等微生物。
操作步驟：將分裝完成的培養(yǎng)基（試管/三角瓶）放入高壓滅菌鍋，加水至指定水位，密封滅菌鍋。
滅菌參數(shù)：溫度 121℃、壓力 0.1MPa，維持 15-20 分鐘（體積大于 500mL 時可延長至 25-30 分鐘）。
關鍵注意：滅菌結束后需自然降壓至常壓，避免快速放氣導致培養(yǎng)基暴沸或瓊脂凝固異常；取出后及時冷卻，減少雜菌污染風險。
2、輔助滅菌方法（適配特殊場景）
煮沸滅菌法（應急備用）
適用情況：無高壓滅菌設備時，臨時處理少量培養(yǎng)基。
操作：將培養(yǎng)基放入鍋中，煮沸后維持 30-60 分鐘，可殺滅多數(shù)營養(yǎng)體，但無法徹底去除芽孢，僅適用于非嚴格無菌要求的培養(yǎng)。
間歇滅菌法（無高壓設備時的替代方案）
操作邏輯：分三次煮沸滅菌，每次煮沸 30 分鐘，間隔 24 小時，利用芽孢萌發(fā)為營養(yǎng)體后再滅菌的原理，實現(xiàn)徹底殺菌。
注意：每次滅菌后需置于 37℃環(huán)境培養(yǎng) 24 小時，讓芽孢萌發(fā)，再進行下一次滅菌，操作較繁瑣。
3、滅菌前準備與后續(xù)檢查
滅菌前：分裝時避免培養(yǎng)基沾污管口/瓶口，密封不宜過緊（留少量透氣空間，防止滅菌時容器破裂）。
滅菌后：冷卻凝固后檢查，若培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、霉點或異味，說明滅菌不徹底，需重新制備。
綜合馬鈴薯培養(yǎng)基適合培養(yǎng)的微生物
1、核心適配微生物類別
常見腐生真菌：如
青霉、
曲霉、
根霉、
毛霉等，能利用培養(yǎng)基中的淀粉、碳水化合物快速生長。
部分植物病原真菌：例如引起植物病害的
鐮刀菌、
炭疽菌等，可用于病害診斷和菌種培養(yǎng)。
其他異養(yǎng)真菌：多數(shù)不依賴特殊營養(yǎng)的真菌，均可在該培養(yǎng)基上生長，適用范圍廣泛。
2、不適配的微生物
細菌：培養(yǎng)基營養(yǎng)成分和 pH 值（6.0±0.2）更適配真菌，細菌多偏好中性或微堿性環(huán)境，且部分細菌需特定營養(yǎng)因子，該培養(yǎng)基無法滿足。
放線菌：需高碳氮比、偏堿性的培養(yǎng)基，與綜合馬鈴薯培養(yǎng)基的理化性質不符。
自養(yǎng)型微生物：無法利用培養(yǎng)基中的有機碳源，需依賴無機碳合成有機物，不適用于此培養(yǎng)基。
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