蛋白胨山梨醇膽鹽肉湯培養(yǎng)基的成分與作用原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象！
小楊 / 2026-01-13 09:33:53
蛋白胨山梨醇膽鹽肉湯是一種選擇性增菌培養(yǎng)基，主要用于
大腸埃希氏菌（尤其是致病性菌株如 O157:H7）的初步篩選與增菌，其核心設(shè)計圍繞營養(yǎng)供給、選擇性抑制、底物特異性反應(yīng)三個層面。
一、培養(yǎng)基主要成分及作用原理
1、蛋白胨
作為核心氮源，提供細(xì)菌生長所需的氨基酸、多肽及維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，滿足大腸埃希氏菌的增殖需求。
2、山梨醇
作為特異性碳源。絕大多數(shù)非致病性大腸埃希氏菌可以發(fā)酵山梨醇，產(chǎn)酸產(chǎn)氣；而致病性
大腸埃希氏菌 O157:H7 缺乏山梨醇發(fā)酵酶，無法利用該碳源。這是區(qū)分致病性與非致病性菌株的關(guān)鍵底物。
3、膽鹽
作為選擇性抑制劑。膽鹽能夠抑制革蘭氏陽性菌（如
葡萄球菌、
鏈球菌）及部分非目標(biāo)革蘭氏陰性菌的生長，僅允許大腸埃希氏菌等腸桿菌科細(xì)菌存活并繁殖，從而提高目標(biāo)菌的檢出率。
4、指示劑（常用溴甲酚紫）
溴甲酚紫的變色范圍為 pH 5.2（黃色）~6.8（紫色）。當(dāng)細(xì)菌發(fā)酵山梨醇產(chǎn)酸時，培養(yǎng)基 pH 下降，指示劑由紫色變?yōu)辄S色；若細(xì)菌不發(fā)酵山梨醇，培養(yǎng)基 pH 無明顯變化，指示劑保持紫色。
5、氯化鈉
維持培養(yǎng)基的滲透壓平衡，保證細(xì)菌正常生理活動。
二、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)果判斷
該培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象需結(jié)合細(xì)菌生長情況和指示劑顏色變化綜合判斷，具體如下：
1、接種與培養(yǎng)條件
將待檢樣品（如食品、糞便、水樣）接種至蛋白胨山梨醇膽鹽肉湯中，置于 36±1℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 18~24h。
2、陽性現(xiàn)象（非致病性大腸埃希氏菌生長）
培養(yǎng)基變渾濁，表示細(xì)菌大量增殖；
指示劑由初始紫色變?yōu)辄S色，部分菌株發(fā)酵山梨醇時還會產(chǎn)生氣體，若使用含小倒管的培養(yǎng)基，倒管內(nèi)會出現(xiàn)氣泡。
結(jié)果解讀：該菌株可發(fā)酵山梨醇，大概率為非致病性大腸埃希氏菌。
3、疑似目標(biāo)菌現(xiàn)象（致病性大腸埃希氏菌 O157:H7 生長）
培養(yǎng)基變渾濁，細(xì)菌正常增殖；
指示劑保持紫色不變，無酸產(chǎn)生，倒管內(nèi)無氣泡（或僅有極少量氣泡，非山梨醇發(fā)酵所致）。
結(jié)果解讀：該菌株不發(fā)酵山梨醇，為疑似致病性
大腸埃希氏菌 O157:H7，需進(jìn)一步通過血清學(xué)鑒定或分子生物學(xué)方法確認(rèn)。
4、陰性現(xiàn)象
培養(yǎng)基澄清無渾濁，指示劑保持紫色；
結(jié)果解讀：樣品中無大腸埃希氏菌生長，或生長的細(xì)菌被膽鹽抑制。
三、注意事項(xiàng)
膽鹽的濃度對選擇性影響較大，濃度過高會抑制目標(biāo)菌生長，濃度過低則無法有效抑制雜菌，需嚴(yán)格按照配方配制。
培養(yǎng)時間需控制在 18~24h，超過 24h 可能導(dǎo)致非目標(biāo)菌適應(yīng)膽鹽環(huán)境并緩慢生長，干擾結(jié)果判斷。
該培養(yǎng)基僅為初步篩選手段，疑似陽性菌株必須結(jié)合后續(xù)鑒定實(shí)驗(yàn)才能確診。
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