如何提高免疫學(xué)技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的準(zhǔn)確性和可靠性？
小楊 / 2026-01-29 09:54:46
百歐博偉生物：提高免疫學(xué)技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的準(zhǔn)確性和可靠性，需從樣品前處理、抗體質(zhì)量、實(shí)驗(yàn)操作、技術(shù)優(yōu)化、質(zhì)量控制、結(jié)果驗(yàn)證等全流程進(jìn)行系統(tǒng)把控，同時(shí)結(jié)合技術(shù)創(chuàng)新突破傳統(tǒng)局限。以下是具體實(shí)施策略：
一、優(yōu)化樣品前處理，降低基質(zhì)干擾
食品樣品基質(zhì)復(fù)雜（如高蛋白、高脂肪、高糖分食品），易干擾抗原 - 抗體特異性結(jié)合，導(dǎo)致假陽性/假陰性。需針對(duì)性優(yōu)化前處理方法：
1、精準(zhǔn)分離與富集目標(biāo)物
結(jié)合免疫磁珠分離技術(shù)（IMS），通過特異性抗體偶聯(lián)磁珠，高效捕獲目標(biāo)微生物，去除樣品中的蛋白、脂肪等干擾成分，尤其適用于復(fù)雜基質(zhì)（如肉類、乳制品）。
對(duì)于低濃度污染樣品，可采用離心濃縮、過濾富集或選擇性增菌培養(yǎng)（與免疫學(xué)技術(shù)聯(lián)用），提高目標(biāo)物濃度，降低檢測(cè)下限。
2、消除基質(zhì)抑制效應(yīng)
加入封閉劑（如牛血清白蛋白、脫脂奶粉）阻斷非特異性結(jié)合位點(diǎn)，減少基質(zhì)成分與抗體的非特異性反應(yīng)。
對(duì)高干擾樣品進(jìn)行脫脂、脫蛋白處理，或采用稀釋法降低基質(zhì)濃度，同時(shí)確保稀釋后目標(biāo)物仍在檢測(cè)范圍內(nèi)。
3、標(biāo)準(zhǔn)化前處理流程
針對(duì)不同食品類型（如谷物、生鮮肉、飲料）制定統(tǒng)一的前處理操作規(guī)范，明確樣品取樣量、均質(zhì)條件、離心參數(shù)、提取液配方等關(guān)鍵參數(shù)，避免人為操作差異。
二、提升抗體質(zhì)量，強(qiáng)化特異性與穩(wěn)定性
抗體是免疫學(xué)檢測(cè)的核心試劑，其性能直接決定檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需從研發(fā)、篩選到儲(chǔ)存全環(huán)節(jié)嚴(yán)格管控：
1、優(yōu)化抗體研發(fā)與篩選
采用單克隆抗體技術(shù)或基因工程抗體技術(shù)，研發(fā)高特異性抗體，減少與同源微生物或基質(zhì)成分的交叉反應(yīng)。
通過交叉反應(yīng)試驗(yàn)篩選特異性抗體，排除對(duì)結(jié)構(gòu)相似抗原的識(shí)別能力；采用梯度濃度抗原驗(yàn)證抗體的親和力，優(yōu)先選擇高親和力抗體。
針對(duì)變異菌株（如耐藥性
沙門氏菌、新型致病性
大腸桿菌），及時(shí)更新抗原免疫原，研發(fā)針對(duì)性抗體，避免因菌株變異導(dǎo)致的檢測(cè)失效。
2、嚴(yán)格抗體質(zhì)量檢測(cè)
對(duì)商業(yè)化抗體進(jìn)行批次驗(yàn)證，檢測(cè)其靈敏度、特異性、批間差和有效期，拒絕使用性能不達(dá)標(biāo)的試劑。
建立抗體質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，指標(biāo)包括抗體效價(jià)、非特異性結(jié)合率、熱穩(wěn)定性等，確保試劑一致性。
3、規(guī)范抗體儲(chǔ)存與使用
按照抗體說明書要求控制儲(chǔ)存條件（如 - 20℃冷凍、避免反復(fù)凍融），防止抗體降解失活。
稀釋后的抗體需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致活性下降。
三、標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)操作，減少人為誤差
實(shí)驗(yàn)操作的規(guī)范性是避免結(jié)果偏差的關(guān)鍵，需通過培訓(xùn)、流程管控降低人為因素影響：
1、強(qiáng)化操作人員培訓(xùn)
對(duì)檢測(cè)人員進(jìn)行系統(tǒng)培訓(xùn)，涵蓋技術(shù)原理、試劑使用、儀器操作、結(jié)果判讀等內(nèi)容，考核合格后方可上崗。
重點(diǎn)規(guī)范關(guān)鍵操作步驟，如加樣量精準(zhǔn)控制（使用移液槍校準(zhǔn)）、孵育溫度和時(shí)間的嚴(yán)格把控（采用恒溫水浴箱或酶標(biāo)儀精準(zhǔn)控溫）、洗滌步驟的徹底性（避免殘留試劑干擾顯色）。
2、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)反應(yīng)條件
針對(duì)不同檢測(cè)技術(shù)調(diào)整反應(yīng)參數(shù)：ELISA 需優(yōu)化抗原抗體濃度比例、酶標(biāo)記物用量、底物反應(yīng)時(shí)間；免疫膠體金技術(shù)需調(diào)控試紙條膜的孔徑、抗體包被濃度、緩沖液 pH 值，確保條帶清晰、無假陽性。
采用陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照同步實(shí)驗(yàn)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)操作失誤或試劑污染問題。
3、規(guī)范結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)
定性檢測(cè)明確判讀時(shí)間窗口（避免超時(shí)判讀導(dǎo)致假陽性）和條帶判定標(biāo)準(zhǔn)（如條帶強(qiáng)度閾值）。
定量檢測(cè)使用酶標(biāo)儀進(jìn)行客觀讀數(shù)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線定量，避免肉眼判讀的主觀性；定期校準(zhǔn)酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡等儀器，確保檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
四、技術(shù)聯(lián)用與創(chuàng)新，突破傳統(tǒng)局限
通過多技術(shù)融合彌補(bǔ)單一免疫學(xué)技術(shù)的缺陷，提升檢測(cè)性能：
1、免疫學(xué)技術(shù)與其他技術(shù)聯(lián)用
免疫 - 分子生物學(xué)聯(lián)用：結(jié)合免疫學(xué)的高特異性和 PCR 的高靈敏度，顯著降低檢測(cè)下限，適用于極低濃度微生物污染檢測(cè)；免疫 - 測(cè)序技術(shù)可精準(zhǔn)識(shí)別微生物菌株類型，減少誤判。
免疫 - 儀器分析聯(lián)用：如免疫磁珠結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)微生物的快速定量；免疫熒光技術(shù)結(jié)合共聚焦顯微鏡，提高微生物定位檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
2、研發(fā)新型檢測(cè)平臺(tái)
基于微流控技術(shù)開發(fā)微型化檢測(cè)芯片，減少試劑用量和反應(yīng)時(shí)間，同時(shí)降低基質(zhì)干擾，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、高通量檢測(cè)。
利用生物傳感器技術(shù)，將免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可量化的電信號(hào)或光信號(hào)，提高檢測(cè)靈敏度和穩(wěn)定性。
五、建立完善的質(zhì)量控制體系
通過全流程質(zhì)量管控確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性：
1、內(nèi)部質(zhì)量控制（IQC）
定期使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（如已知濃度的微生物抗原、標(biāo)準(zhǔn)菌株）進(jìn)行校準(zhǔn)，驗(yàn)證檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和精密度。
開展平行樣檢測(cè)和重復(fù)實(shí)驗(yàn)，控制實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)（CV），確保結(jié)果可重復(fù)；建立實(shí)驗(yàn)誤差允許范圍，超出范圍時(shí)及時(shí)溯源整改。
規(guī)范實(shí)驗(yàn)記錄，詳細(xì)記錄樣品信息、試劑批次、操作參數(shù)、檢測(cè)結(jié)果等，便于追溯問題。
2、外部質(zhì)量評(píng)估（EQA）
參與實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)試驗(yàn)（如國家食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)能力驗(yàn)證），與其他實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)自身技術(shù)短板并優(yōu)化。
采用權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)方法或試劑盒，確保檢測(cè)方法的合規(guī)性和準(zhǔn)確性。
六、加強(qiáng)結(jié)果驗(yàn)證與數(shù)據(jù)溯源
1、多方法交叉驗(yàn)證
對(duì)疑似陽性樣品，采用兩種及以上不同原理的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，避免單一技術(shù)的局限性導(dǎo)致誤判。
對(duì)于定量結(jié)果，可通過高效液相色譜（HPLC）等儀器分析方法進(jìn)行確認(rèn)，確保定量準(zhǔn)確性。
2、建立數(shù)據(jù)溯源體系
采用信息化管理系統(tǒng)記錄檢測(cè)數(shù)據(jù)，包括儀器校準(zhǔn)記錄、試劑使用記錄、操作日志等，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)全程可追溯。
定期對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，監(jiān)控結(jié)果趨勢(shì)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常數(shù)據(jù)并排查原因。
七、總結(jié)
提高免疫學(xué)技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的準(zhǔn)確性和可靠性，需以“全流程管控”為核心，從樣品前處理的標(biāo)準(zhǔn)化、抗體質(zhì)量的精準(zhǔn)化、實(shí)驗(yàn)操作的規(guī)范化入手，結(jié)合技術(shù)聯(lián)用創(chuàng)新突破局限，并通過完善的質(zhì)量控制體系和結(jié)果驗(yàn)證機(jī)制兜底。未來，隨著抗體工程、智能化檢測(cè)設(shè)備等技術(shù)的發(fā)展，將進(jìn)一步推動(dòng)免疫學(xué)檢測(cè)向更精準(zhǔn)、更穩(wěn)定、更高效的方向升級(jí)，為食品質(zhì)量安全提供更堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支撐。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有Biolog微生物鑒定系統(tǒng)，超低溫冰箱，生物安全柜等儀器設(shè)備可進(jìn)行對(duì)微生物分離、鑒定等常規(guī)的分子實(shí)驗(yàn)研究。對(duì)我國生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求進(jìn)行積極的面對(duì)社會(huì)乃至國外收集保藏提供微生物菌種資源。在保證生物安全和保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的前提下，為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供微生物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。
除此之外，我們還擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對(duì)購買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇耍本┌贇W博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長(zhǎng)期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：振蕩培養(yǎng)法和密封培養(yǎng)法的實(shí)踐場(chǎng)景分析及優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比！
下一篇：小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞在微環(huán)境互作研究中有哪些應(yīng)用？