PC-12(未分化型) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2016-05-05 11:29:56
細(xì)胞庫編號：KCB200735YJ
細(xì)胞株名稱：PC-12(未分化型) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞
種屬：大鼠 性別：雄性
細(xì)胞系特征：該細(xì)胞系來自可移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。 這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長因子(NGF)受體，NGF可誘導(dǎo)該細(xì)胞產(chǎn)生可逆性的神經(jīng)細(xì)胞表型。 此細(xì)胞不合成腎上腺素，但可產(chǎn)生兒茶酚胺、多巴胺和去甲腎上腺素。
組織來源：腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤
生長特性：成團(tuán)半懸浮和貼壁混合生長
微生物，支原體檢測：陰性
安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
培養(yǎng)條件：
完全培養(yǎng)基：含2mM L-谷氨酰胺，1.5克/升碳酸氫鈉的F12K或1640，85%；馬血清 10%；胎牛血清 5%。
培養(yǎng)溫度：37℃； CO2：5% 。
傳代方法：
收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
1.用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶，放入無菌工作臺中，嚴(yán)格無菌操作。
2.將培養(yǎng)液和細(xì)胞全部吸入離心管，離心（1000轉(zhuǎn)/min,10min）。
3.加入10ml新鮮的完全培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
拍打后還貼壁的細(xì)胞按以下步驟處理：
1. 收集培養(yǎng)液后，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后將培養(yǎng)瓶翻過來讓胰酶與細(xì)胞面接觸大約10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。
3. 按5ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。
4. 以后細(xì)胞傳代均按以上方法操作。
注：
1、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用, 請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
2、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
3、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請及時與我們聯(lián)系。
凍存方法：
凍存液：90%完全培養(yǎng)液或牛血清，10%DMSO ?，F(xiàn)用現(xiàn)配。
儲 存：液氮儲存
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