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32D小鼠IL-3依賴性細(xì)胞的培養(yǎng)方式與質(zhì)量檢測(cè)!
小楊 / 2023-06-29 08:39:21


一、細(xì)胞簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-69708
規(guī)格:1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息:32D/32D Clone 3
細(xì)胞名稱:32D(32D 小鼠 IL-3 依賴性細(xì)胞)
物種:大鼠
組織:骨、骨髓
細(xì)胞形態(tài):半貼壁半懸浮,淋巴細(xì)胞樣
細(xì)胞背景:32D 細(xì)胞是從小鼠骨髓中分離出來的淋巴細(xì)胞。
細(xì)胞描述:小鼠 IL-3 依賴性細(xì)胞 
細(xì)胞特性:懸浮生長(zhǎng) 
培養(yǎng)基:RPMI 1640+10%FBS+mouse IL3
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO2 
用途:鼠 國(guó)內(nèi)
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

二、培養(yǎng)方式
1、培養(yǎng)基:32D 細(xì)胞專用培養(yǎng)基【1640+10% FBS+1% P/S+10ng/mL mIL-3】
2、培養(yǎng)環(huán)境:37℃、5%CO2
3、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 4-6mL 完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6cm 皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
4、傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80%以上時(shí),可以進(jìn)行傳代,傳代比例 1:2~1:4,1~2 天傳代一次。
(1)用移液器吹打細(xì)胞,形成單細(xì)胞懸液,然后將其轉(zhuǎn)移到 15ml 的離心管,1000rpm 離心5min;
(2)離心完成后,吸出上清丟棄,再用移液管取 10ml 完全培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,輕輕吹打混勻;
(3)將細(xì)胞懸液分裝到兩個(gè)新的 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,放在 37℃的 CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5、細(xì)胞凍存:使用本公司無血清凍存液可直接將細(xì)胞凍存在-80℃(無需使用程序降溫盒),細(xì)胞在-80℃可保存 3 年,長(zhǎng)期保存建議使用液氮罐。 

三、質(zhì)量檢測(cè)
1、細(xì)胞鑒定:種屬正確
2、細(xì)菌檢測(cè):陰性
3、支原體檢測(cè):陰性

四、售后服務(wù)
1、收到細(xì)胞后請(qǐng)及時(shí)查看瓶身有無破損,是否漏液等現(xiàn)象;
2、用 75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶之后,放在培養(yǎng)箱中靜置 2-4 小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄,40 倍和 100 倍照片各一張(細(xì)胞在運(yùn)輸過程中存在少量的漂浮或者死亡屬于正?,F(xiàn)象);
3、原瓶中的培養(yǎng)基在細(xì)胞傳代之后不建議繼續(xù)使用,請(qǐng)配制新的完全培養(yǎng)基或者購買本公司的專用培養(yǎng)基;
4、建議定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拍照記錄;收到細(xì)胞后 7 天內(nèi),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)有任何問題,可申請(qǐng)售后。
5、強(qiáng)烈建議:在第一次細(xì)胞傳代時(shí),使用附贈(zèng)或者購買本公司配置的細(xì)胞培養(yǎng)瓶將細(xì)胞按照 1:2 進(jìn)行傳代,可以對(duì)比測(cè)試自配的培養(yǎng)基是否可以養(yǎng)好細(xì)胞。如果有以上任何問題,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系本公司。

五、注意事項(xiàng)
1、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2、收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3、由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
5、客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話:010-53515223,我們隨時(shí)給予解答。

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