金氏擬桿菌的保藏條件與注意事項(xiàng)及打管說(shuō)明！
小楊 / 2024-03-28 09:36:51
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Parabacteroides Goldsteinii
拉丁名稱：Parabacteroides goldsteinii
來(lái)源歷史：JCM
原始編號(hào)：WAL 12034
原產(chǎn)國(guó)：美國(guó)
模式菌株：是
生物安全級(jí)別：一級(jí)
其它保藏中心編號(hào)：JCM 13446=
ATCC BAA-1180=CCUG 48944=DSM 19448=KCTC 15612
培養(yǎng)基編號(hào)：35、177
培養(yǎng)基成分：EG GAM血平板
培養(yǎng)溫度：37℃
培養(yǎng)時(shí)間：24.0
需氧類型：專性厭氧
分離基物：人體組織
采集地：美國(guó)
保存方法：冷凍干燥管保藏
用途：教學(xué)，研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、培養(yǎng)基
*TSA+5%脫纖維蛋白羊血（血瓊脂平板）
*GAM 培養(yǎng)基（建議直接買成成品培養(yǎng)基）
三、保藏條件
培養(yǎng)物和安瓿凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶請(qǐng)放-20°C 保存。甘油請(qǐng)置于-80°C。
四、注意事項(xiàng)
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml-0.5ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無(wú)菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過(guò) 2 支平板，操作完畢后盡快置于厭氧環(huán)境下恒溫培養(yǎng)；若需接種液體培養(yǎng)基，制作培養(yǎng)液時(shí)，應(yīng)使用厭氧螺口試管，并利用高純氮?dú)馊コ嚬芎团囵B(yǎng)液中的氧氣）；
2）經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
4）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和
微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。
7）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏骄N后 2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
8）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
9）安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。
10）甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
五、凍干管打管說(shuō)明書
1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂（應(yīng)避免過(guò)多水蒸氣影響菌種的復(fù)蘇），用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml（建議勿超過(guò) 0.5ml）適宜的液體培養(yǎng)基(不添加瓊脂)，滴入管內(nèi)，輕輕振蕩，待安瓿管內(nèi)的菌體溶解呈懸浮狀，在用無(wú)菌吸管吸取全部菌懸液接在 1-2 支建議的培養(yǎng)基試管中（不超過(guò) 2 支，中國(guó)微生物菌種查詢網(wǎng)提供的培養(yǎng)基配方中有瓊脂，請(qǐng)務(wù)必做成試管斜面，配方中沒(méi)有瓊脂，試管中液體培養(yǎng)基不超過(guò) 5ml），并在建議的條件下靜止培養(yǎng)。
3、凍干管打開(kāi)后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管內(nèi)大部分是用牛奶做保護(hù)劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功。
4、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
5、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤上方進(jìn)行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
6、菌種復(fù)蘇時(shí)，請(qǐng)務(wù)必記錄好菌種的編號(hào)和制備批號(hào)，否則不予售后。
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