大鼠肺大靜脈平滑肌細胞的性質與用途及生產(chǎn)工藝！
小楊 / 2024-04-19 09:31:39
一、背景及概述
平滑肌細胞又叫平滑肌纖維，系構成平滑肌的纖維狀長細胞。由于平滑肌所分布的部位不同，平滑肌細胞的長度很不一致，在小血管壁上的平滑肌細胞長度僅有20μm左右，妊娠期子宮壁平滑肌細胞可長達500μm，位于一般器官平滑肌細胞的長度約200μm左右，此細胞的寬度在7μm以內。
平滑肌細胞多聚集成束，細胞輪廓不清，需用適當濃度的酸(堿)溶液將其分離，方可獲得外形完整的肌細胞。細胞內只有1個細胞核，呈橢圓形或長桿狀，位于細胞中段最寬的部分，長度與縱軸平行，核染色質為纖細網(wǎng)狀，可見2個以上核仁。
在制作切片標本時，如肌細胞收縮則可變粗，核也隨之變粗，甚至可出現(xiàn)螺旋形的扭曲。平滑肌細胞的胞質通常稱為肌漿。生活狀態(tài)下的胞質呈均質性，一般染色切片上不顯任何結構。應用特殊染色或用三氯醋酸溶液稍加浸泡，可在胞質內顯出縱列的細絲，稱肌原纖維。
平滑肌細胞外面包有1層肌膜。每個平滑肌細胞周圍有少量纖細的膠質纖維、彈力纖維及網(wǎng)狀纖維，包繞于肌膜的表面。平滑肌細胞可隨環(huán)境的改變伸長或縮短，有很大的彈性和韌力。
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。
肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán)，才能避免肺動脈內壓力升高。
二、細胞培養(yǎng)
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應，保持靜脈管腔的通暢，還是多數(shù)動脈疾病的靶細胞。
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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