短密青霉的菌落形態(tài)與分布范圍及微生物培養(yǎng)方法！
小楊 / 2024-06-05 09:58:04
短密青霉（Penicillium brevicompactum），在工業(yè)上主要用于生產霉酚酸（MPA），ATCC編號16024。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Penicillium Brevicompactum
拉丁學名：Penicillium brevicompactum
菌株來源：←廣州電器科學研究所←匈牙利
直接來源國家：匈牙利
保藏時間：8/25/1959
生物危害：四類
模式菌株：非模式菌株
菌株用途：國際電工學會規(guī)定試驗用菌
培養(yǎng)溫度：25-28℃
培養(yǎng)基：0015
提供形式：凍干物
用途：國際電工學會規(guī)定試驗用菌
注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）
二、菌落形態(tài)
在麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基（MEA）上生長較慢，25℃黑暗條件下培養(yǎng)5天，菌落僅少量生長，質地絨狀；產孢結構大量形成，孢子面青灰色；菌落背面淺褐色，無水溶性色素。
三、菌株分類
短密青霉屬殼霉目目，杯霉科科，拉丁名為Fungi Imperficti，主要分布在中國廣西。
拉丁綱名 Fungi Imperficti
中文綱名 半知菌綱
拉丁目名 Sphaeropsidales
中文目名 殼霉目
拉丁科名 Discellaceae
中文科名 杯霉科
拉丁名 Penicillium brevi-compactum
定名人 Dierchx
參考文獻 Discellaceae
四、微生物培養(yǎng)方法
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。
五、注意事項
1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支斜面或平板；或直接接種液體培養(yǎng)基，以不超過 5ml 為宜）；
2）經過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間； 若您收到的是已復蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根據需要轉接培養(yǎng)；如有不明白之處，請務必先咨詢我單位技術人員，避免不必要的損失；二次接種量要多，固體斜面培養(yǎng)基水分要少才能讓菌體長得比較明顯，液體培養(yǎng)要靜止培養(yǎng)；
3）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；
4）菌種操作應在無菌條件下進行；轉種完畢，應經滅菌再做丟棄處理；
5）應根據菌種狀況及時轉接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過程中如出現雜菌污染或菌種生產性能下降，應及時和
微生物菌種查詢網聯(lián)系；
7）如若有菌種復蘇不活或者污染等情況，請在收到菌鐘后 2 個月內聯(lián)系，逾期不予受理；
8）打管操作需由專業(yè)微生物技術人員在相應的防護設備中進行，生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作，打管時凍干管應遠離面部，保護眼睛；
9）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作；
10）甘油管使用：使用本甘油菌時可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數的增加，細菌的活力會逐漸下降。
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