苜蓿疫霉的培養(yǎng)方法與注意事項(xiàng)及凍干管打管說(shuō)明！
小楊 / 2024-06-18 09:18:34
苜蓿疫霉是Phytophthora屬的微生物，原產(chǎn)地為美國(guó)。卵菌，霜霉目。主要用途為研究。
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Phytophthora Medicaginis
拉丁學(xué)名：Phytophthora medicaginis
原始編號(hào)：CBS 117685
菌株來(lái)源：←CBS
保藏人：周宇光
直接來(lái)源國(guó)家：荷蘭
保藏時(shí)間：2/14/2007
生物危害：四類
模式菌株：非模式菌株
培養(yǎng)溫度：25℃
培養(yǎng)基：0014
分離源：苜蓿
采集地點(diǎn)：華盛頓
采集國(guó)家：美國(guó)
提供形式：凍干物
用途：研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用;
2、產(chǎn)品僅限用于科研本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強(qiáng)、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復(fù)活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢(shì)種群;
5、本品安全高效、無(wú)抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對(duì)多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時(shí)使用。
三、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，是為科研和生產(chǎn)提供微生物菌種資源共享服務(wù)的專業(yè)平臺(tái)。
2、國(guó)內(nèi)首創(chuàng)封閉管包裝，凍干后的菌株使用時(shí)添加配套的復(fù)蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。針對(duì)不同的菌株提供八種不同的培養(yǎng)方法，保證菌種的復(fù)蘇質(zhì)量。
3、嚴(yán)格的質(zhì)檢程序，確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
4、該類產(chǎn)品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè)，疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等，得到廣泛好評(píng)。
四、培養(yǎng)方法
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
五、注意事項(xiàng)
1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用 0.1-0.2ml 的培養(yǎng)液或無(wú)菌水溶解，接種在 2 支斜面上，因凍干粉處于休眠狀態(tài)，請(qǐng)勿接種多支斜面或平板，以避免因接種量不足而導(dǎo)致復(fù)蘇不成功；如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
2）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
3）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
4）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
5）菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和
微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。
六、單層凍干管打管說(shuō)明書(shū)
1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在 4-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥并抽真空保存的，開(kāi)啟后必須一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作為保護(hù)劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功；
3、凍干菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，有時(shí)延滯期較長(zhǎng)，如在說(shuō)明書(shū)建議的培養(yǎng)時(shí)間還未長(zhǎng)起來(lái)，請(qǐng)繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時(shí)或者更長(zhǎng)時(shí)間，直至菌種培養(yǎng)完成；有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)，一般來(lái)說(shuō)，菌種穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。暫不啟開(kāi)的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏（特殊除外）。凍干管打開(kāi)后需一次用完，不能留存。打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
歡迎訪問(wèn)
微生物菌種查詢網(wǎng)，本站隸屬于北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司，單位現(xiàn)提供微生物菌種及其細(xì)胞等相關(guān)產(chǎn)品查詢、咨詢、訂購(gòu)、售后服務(wù)！與國(guó)內(nèi)外多家研制單位，生物醫(yī)藥，第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)，科研院所有著良好穩(wěn)定的長(zhǎng)期合作關(guān)系！歡迎廣大客戶來(lái)詢！
下載附件
上一篇：紅酵母屬的培養(yǎng)條件與生理特性及分布范圍與影響能力！
下一篇：人肝竇狀小管內(nèi)皮細(xì)胞收到后的處理方法與培養(yǎng)步驟！