硒砷芽孢桿菌的特點與優(yōu)勢及微生物菌種培養(yǎng)方法！
小楊 / 2024-08-08 09:29:46
硒砷芽孢桿菌是Bacillus屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。主要用途為分類；研究。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Bacillus Selenatarsenatis
收藏時間：2006/7/22
原始編號：HYL8-26
原產(chǎn)國：中國
資源歸類編碼：15131311101
模式菌株：非模式菌株
主要用途：分類；研究；教學
特征特性：此菌從沙雅縣胡楊林土壤中分離，經(jīng)初步鑒定革蘭氏染色為陽性菌，菌落邊緣有一個透明圈，中間有一個白色凸起，向外擴展，齒狀，顏色呈白色，細胞形態(tài)為桿狀，生成孢子，可運動；在液體培養(yǎng)基中生長良好，均一，好氧，培養(yǎng)溫度是32℃，pH生長范圍在7.5-8.5之間。
具體用途：分類；研究；教學
生物危害程度：四類
致病對象：無
分離基物：土壤
采集地：新疆胡楊林地區(qū)
培養(yǎng)基編號：832
培養(yǎng)溫度：30℃
用途：研究
注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）
二、形態(tài)特征
16SrDNA序列收錄號：FJ161252、過氧化氫酶陽性、革蘭氏陽性、不能利用以下碳源：α-赤蘚糖醇、D-蜜二糖、L-組氨酸、D-果糖、順烏頭酸、衣康酸、肌苷、糊精、L-巖藻糖、D-阿洛酮糖、檸檬酸、D-半乳糖、α-D-乳糖；胸腺嘧啶、吐溫40、能利用：α-環(huán)糊精、α-酮基丁酸、L-亮氨酸、L-鳥氨酸、α-酮戊酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸。
三、產(chǎn)品特點
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應用;
2、產(chǎn)品僅限用于科研本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢種群;
5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時使用。
四、產(chǎn)品優(yōu)勢
1、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,是為科研和 提供微生物菌種資源共享服務的專業(yè)平臺。
2、國內(nèi)首創(chuàng)封閉管包裝,凍干后的菌株使用時添加配套的復蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。針對不同的菌株提供八種不同的培養(yǎng)方法,保證菌種的復蘇質(zhì)量。
3、嚴格的質(zhì)檢程序,確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
4、該類產(chǎn)品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè),疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等,得到廣泛好評。
五、微生物菌種培養(yǎng)方法
1、孢子制備
⑴放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵產(chǎn)品僅限用于科研霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
2、種子制備
⑴搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
六、注意事項
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支平板或者斜面，若接種液體培養(yǎng)基，則試管液體不超過 5ml 為宜）；
2）經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間；若您收到的是已復蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根據(jù)需要轉接培養(yǎng)如有不明白之處，請務必先咨詢我單位技術人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；
4）菌種操作應在無菌條件下進行；轉種完畢，應經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應根據(jù)菌種狀況及時轉接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或不活，請在收到后 2 個月內(nèi)和
微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系，逾期不予受理；
7）打管操作需由專業(yè)微生物技術人員在相應的防護設備中進行，生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作，打管時凍干管應遠離面部，保護眼睛。
8）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
9）甘油管使用：使用本甘油菌時可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細菌的活力會逐漸下降。
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