類布氏乳桿菌:用于乳酸發(fā)酵和利用果糖產(chǎn)甘露醇
小楊 / 2024-09-02 09:02:13
類布氏乳桿菌是Lactobacillus屬的微生物,原產(chǎn)地為中國。菌落微小,白色或乳白色邊緣整齊光滑。菌體桿狀,大多呈鏈狀。革蘭氏陽性,過氧化氫酶陰性,無芽孢,不運動。能利用葡萄糖、木糖產(chǎn)酸。主要用途為研究。
一、菌種簡介
提供形式:凍干物
拉丁屬名:Lactobacillus Parabuchneri
拉丁名稱:Lactobacillus parabuchneri
來源歷史:←上海工業(yè)試驗所←金培松分離
收藏時間:1952/11/30
資源歸類編碼:15131319101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究
特征特性:G+,菌體短桿狀,成對或成短鏈排列,無芽胞。菌落不規(guī)則形,擴(kuò)展,表面起皺,邊緣不齊,乳白色,不透明。發(fā)酵果糖、蔗糖、麥芽糖,不發(fā)酵甘露糖、木糖、乳糖。接觸酶陰性,從葡萄糖和葡萄糖酸鹽產(chǎn)酸產(chǎn)氣,牛奶產(chǎn)酸、酸凝,兼性厭氧。45℃不生長。
具體用途:利用果糖產(chǎn)甘露醇
生物危害程度:四類
培養(yǎng)基編號:CM0006
培養(yǎng)基名稱:MRS培養(yǎng)基
培養(yǎng)基成分:酪蛋白胨 10.0g,牛肉膏 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸鈉 5.0g,檸檬酸二銨 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH6.8。
*培養(yǎng)CICC 10774時pH需調(diào)至5.0.
培養(yǎng)溫度:30℃
需氧類型:好氧
分離基物:片狀表飛嗚
保存方法:真空冷凍干燥法
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
用途:利用果糖產(chǎn)甘露醇
注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))
二、產(chǎn)品特點
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用;
2、產(chǎn)品僅限用于科研本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強(qiáng)、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復(fù)活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢種群;
5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時使用。
三、產(chǎn)品優(yōu)勢
1、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,是為科研和生產(chǎn)提供微生物菌種資源共享服務(wù)的專業(yè)平臺。
2、國內(nèi)首創(chuàng)封閉管包裝,凍干后的菌株使用時添加配套的復(fù)蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。針對不同的菌株提供八種不同的培養(yǎng)方法,保證菌種的復(fù)蘇質(zhì)量。
3、嚴(yán)格的質(zhì)檢程序,確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
4、該類產(chǎn)品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè),疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等,得到廣泛好評。
四、微生物培養(yǎng)方法
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
五、注意事項
1)凍干首次活化,干粉要全部用完,不能預(yù)留,用 0.1-0.2ml 的培養(yǎng)液或無菌水溶解,接種在 2 個斜面上,因凍干粉處于休眠狀態(tài),請勿接種多支斜面或平板,以避免因接種量不足而導(dǎo)致復(fù)蘇不成功;如有不明白之處,請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員,避免不必要的損失;
2)微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退;
3)菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行;轉(zhuǎn)種完畢,應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理;
4)應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接,凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年;
5)菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降,應(yīng)及時和
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六、單層凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍,并保持在火焰旁操作。
2、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在 4-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥并抽真空保存的,開啟后必須一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作為保護(hù)劑,里面菌體為少數(shù),復(fù)蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上,否則可能造成復(fù)蘇不成功;
3、凍干菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),有時延滯期較長,如在說明書建議的培養(yǎng)時間還未長起來,請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間,直至菌種培養(yǎng)完成;有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,一般來說菌種穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。
4、暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏(特殊除外)。
5、凍干管打開后需一次用完,不能留存。
6、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部,保護(hù)眼睛。
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