ATCC 19907 微白黃鏈霉菌的培養(yǎng)與保存及應(yīng)用！
小楊 / 2024-09-02 08:52:31
微白黃鏈霉菌，牛奶大部分菌株胨化，不凝固(7967/54和6615/54凝固)，微黃色素。淀粉水解。纖維素上不生長。硝酸鹽還原弱或無。不產(chǎn)生類黑色素。大部分菌株抑制革蘭氏陽性細(xì)菌、酵母、絲狀真菌。
一、菌種簡介
提供形式：凍干物
拉丁屬名：Streptomyces Albidoflavus
拉丁學(xué)名：Streptomyces albidoflavus
原始編號：LMG 19895
菌株來源：←中國科學(xué)院微生物研究所←LMG
保藏人：黃英
直接來源國家：比利時
保藏時間：8/10/2004
其他保藏編號：=
ATCC 19907 =CBS 120.60 =DSM 40814 =ISP 5157 =JCM 9867 =NBRC 100770 =NRRL B-2593
生物危害：四類
模式菌株：非模式菌株
菌株用途：Type strain of Streptomyces globisporus subsp. caucasicus
培養(yǎng)溫度：28℃
培養(yǎng)基：0038
分離源：土壤
用途：模式菌株，Streptomyces Globisporus Subsp. Caucasicus
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、菌種的培養(yǎng)
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純 菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
四、保存方法
1、傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
2、液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
3、懸液保存法：
①蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
②糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
4、載體保存法：①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
5、常用的冷凍保存法：
①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③液氮保存法(-196℃):是適用范圍最廣的微生物保存法。
植物病害的綠色防控是我國現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的重要組成部分，利用微生物肥料或菌劑是其中的一種重要方式，其核心技術(shù)在于選育高效的微生物菌株資源。
本成果展示了一株從海洋污泥中分離篩選得到的微白黃鏈霉菌，其不僅可以產(chǎn)生具有幾丁質(zhì)酶活性的物質(zhì)，還含有豐富的次級代謝產(chǎn)物基因簇，具有廣譜的抑真菌活性；同時，在我國山西、山東、河北、河南等十個省市、連續(xù)多年的田間實(shí)驗(yàn)表明該菌株制劑可以有效防治多種植株土傳真菌病害，如甜瓜枯萎病、小麥根腐病、小麥全蝕病、棉花枯黃萎病、辣椒疫霉病等，具有很好的應(yīng)用前景。利用農(nóng)業(yè)廢棄物，我們開發(fā)了一套鏈霉菌固體生產(chǎn)技術(shù)，其孢子濃度可以達(dá)到1010個/g，具有規(guī)?；a(chǎn)的潛力。
目前我國登記在冊的微生物肥料產(chǎn)品中，鏈霉菌種類及產(chǎn)品數(shù)量非常少，市場上以鏈霉菌為主的產(chǎn)品量也遠(yuǎn)不及芽孢桿菌制品的1%，鑒于該鏈霉菌的防治效果和低廉的生產(chǎn)條件，其市場前景非常可觀。
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