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白腐殼座月孢的培養(yǎng)方法與單層凍干管打管說明書!
小楊 / 2024-09-05 08:44:50

 

一、菌種簡介
平臺編號:Bio-80771 
規(guī)格:培養(yǎng)物 
拉丁屬名:Coniella Diplodiella 
中文名稱:白腐殼座月孢
拉丁屬名:Coniella
種名加詞:diplodiella (Speg.) Petr. & Syd.
收藏時間*:2015/12/9
來源歷史:信陽農(nóng)林學院
產(chǎn)國:中國
資源歸類編碼:15151500000
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;教學 
生物危害程度:四類
寄主中文名稱:寄主拉丁名稱
致病對象:植物
致病名稱:枝枯病
分離基物:枯枝
采集地區(qū):信陽
采集具體地點:震雷山
培養(yǎng)基信息:培養(yǎng)基編號: 14 培養(yǎng)基名稱: PDA 培養(yǎng)溫度 25
資源保護類型:培養(yǎng)物
保藏方法:液氮超低溫凍結(jié)法
共享方式:公益性共享
提供形式:斜面培養(yǎng)物
實物狀態(tài):有實物
用途:研究
注意事項:僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準)
 
二、產(chǎn)品特點
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用;
2、產(chǎn)品僅限用于科研本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復(fù)活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢種群;
5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時使用。
 
三、產(chǎn)品優(yōu)勢
1、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,是為科研和生產(chǎn)提供微生物菌種資源共享服務(wù)的專業(yè)平臺。
2、國內(nèi)首創(chuàng)封閉管包裝,凍干后的菌株使用時添加配套的復(fù)蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。針對不同的菌株提供八種不同的培養(yǎng)方法,保證菌種的復(fù)蘇質(zhì)量。
3、嚴格的質(zhì)檢程序,確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
4、該類產(chǎn)品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè),疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等,得到廣泛好評。
 
四、微生物菌種培養(yǎng)方法
1、孢子制備
⑴放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵產(chǎn)品僅限用于科研霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
2、種子制備
⑴搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
 
五、注意事項
1)凍干首次活化,干粉要全部用完,不能預(yù)留,用 0.1-0.2ml 的培養(yǎng)液或無菌水溶解,接種在 2 個斜面上,因凍干粉處于休眠狀態(tài),請勿接種多支斜面或平板,以避免因接種量不足而導致復(fù)蘇不成功;如有不明白之處,請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員,避免不必要的損失;
2)微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時間過長會導致菌種衰退;
3)菌種操作應(yīng)在無菌條件下進行;轉(zhuǎn)種完畢,應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理;
4)應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接,凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年;
5)菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降,應(yīng)及時和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。
 
六、單層凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍,并保持在火焰旁操作。
2、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在 4-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥并抽真空保存的,開啟后必須一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作為保護劑,里面菌體為少數(shù),復(fù)蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上,否則可能造成復(fù)蘇不成功;
3、凍干菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),有時延滯期較長,如在說明書建議的培養(yǎng)時間還未長起來,請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間,直至菌種培養(yǎng)完成;有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,一般來說菌種穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。
4、暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏(特殊除外)。
5、凍干管打開后需一次用完,不能留存。
6、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護設(shè)備中進行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時凍干管應(yīng)遠離面部,保護眼睛。
 
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