ATCC 51580 沃氏嗜膽菌的性質(zhì)與用途及生產(chǎn)工藝！
小楊 / 2024-11-19 08:58:59
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：Freeze-Dried
拉丁屬名：Bilophila Wadsworthia
用途：ATCC原裝進(jìn)口
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、詳細(xì)描述
Bilophila wadsworthia Baron et al. 拉丁名
Strain Designations 菌種別 WAL 8571
Isolation 分離基物 Human abdominal fluid
Biosafety Level 生物安全等級(jí) 2
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
Product Format 提供形式 freeze-dried
Preceptrol? no
Type Strain 模式菌種 no
Medium 培養(yǎng)基 ATCC? Medium 1490: Modified chopped meat medium
Growth Conditions 生長(zhǎng)條件
Temperature 培養(yǎng)溫度: 37.0℃
Atmosphere 需氧情況: Anaerobic
Name of Depositor 寄存人 SM Finegold
Special Collection NCRR Contract
Isolation Human abdominal fluid
三、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱(chēng)種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純 菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類(lèi)孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類(lèi)的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4、過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
五、使用范圍
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,組成成分精確,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類(lèi)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類(lèi)培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類(lèi),或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類(lèi)培養(yǎng)基能更有效地滿(mǎn)足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。
六、注意事項(xiàng)
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無(wú)菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過(guò) 2 支平板或者斜面）；
2）經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢(xún)我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
4）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
7）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏骄N后 2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
8）打管操作需由專(zhuān)業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類(lèi)的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
9）安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。
10）甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
七、凍干管打管說(shuō)明書(shū)
1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉檫試凍干管表面進(jìn)行消毒，將管頂端于酒精燈外焰上均勻加熱；立即滴 2-3 滴無(wú)菌水于加熱部位，使管壁破裂；再用鑷子或其他適宜工具敲下破裂處。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可)于凍干管中將凍干菌粉全部溶解。將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻，可將殘留在吸管中 1-2 滴菌懸液轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)。以液體培養(yǎng)結(jié)果為準(zhǔn)。
3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在 2-8℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，延遲期較長(zhǎng)，需要轉(zhuǎn)接至 2-3 代恢復(fù)活力。
4、復(fù)蘇后的菌種在傳 1-2 代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏（特殊除外）。
6、凍干管打開(kāi)后需一次用完，不能留存。
7、打管操作需由專(zhuān)業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類(lèi)的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤(pán)上方進(jìn)行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
微生物菌種查詢(xún)網(wǎng)作為中國(guó)微生物菌種中心引航者，單位代為引進(jìn)美國(guó)ATCC微生物菌種保藏中心，德國(guó)DSMZ菌種保藏中心，荷蘭CBS菌種保藏中心，日本JCM微生物菌種保藏中心，包括其中的ATCC微生物細(xì)菌與噬菌體（18382）；細(xì)胞系和雜交瘤（4997）；真菌和酵母（58183）；原代細(xì)胞（146）；原生動(dòng)物和藻類(lèi)（2428）；干細(xì)胞（102）；載體，克隆與分子（18006）；病毒（3594）；核酸 - DNA / RNA（1350），引進(jìn)進(jìn)口微生物菌種貨期短，質(zhì)量保證，UPS國(guó)際快遞運(yùn)輸。
下載附件
上一篇：李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基的成份與用法及操作步驟與質(zhì)量控制！
下一篇：寒冷天氣下，生產(chǎn)車(chē)間霉菌污染風(fēng)險(xiǎn)及食品加工微生物控制策略！