H9c2大鼠心肌細(xì)胞的培養(yǎng)條件與分化誘導(dǎo)及應(yīng)用領(lǐng)域！
小楊 / 2025-04-14 08:57:14
大鼠心肌細(xì)胞系H9c2（也稱(chēng)為H9c2(2-1)）是心血管研究中廣泛使用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。以下是關(guān)于該細(xì)胞系的詳細(xì)信息，包括其特性、應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)：
一、細(xì)胞系背景
1、來(lái)源：H9c2細(xì)胞系源自胚胎期BD1X大鼠（Sprague-Dawley品系）的心臟組織，由Kimes和Brandt于1976年建立。
2、特性：
未分化時(shí)表現(xiàn)為成肌細(xì)胞形態(tài)（梭形、貼壁生長(zhǎng)），可誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞。
保留部分心肌細(xì)胞特征，如表達(dá)肌球蛋白輕鏈、腎上腺素受體等，但缺乏成熟心肌細(xì)胞的橫紋結(jié)構(gòu)和同步收縮能力。
增殖能力強(qiáng)，易于傳代培養(yǎng)，適用于高通量實(shí)驗(yàn)。
二、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基：高糖DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium），添加10%胎牛血清（FBS）和1%雙抗（青霉素/鏈霉素）。
2、培養(yǎng)環(huán)境：37°C、5% CO?，濕度飽和。
3、傳代方法：
吸除舊培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞。
加入0.25%胰酶（含EDTA）消化1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓后終止消化。
按1:3至1:6比例傳代，密度過(guò)低可能導(dǎo)致生長(zhǎng)停滯。
三、分化誘導(dǎo)
1、常用方法：
血清濃度降低法：將培養(yǎng)基更換為含1% FBS的DMEM，持續(xù)培養(yǎng)7-14天。
視黃酸（RA）誘導(dǎo)：在含1% FBS的培養(yǎng)基中加入10 μM全反式視黃酸，處理3-7天。
2、分化標(biāo)志：
形態(tài)變長(zhǎng)，出現(xiàn)多核肌管樣結(jié)構(gòu)。
上調(diào)心肌標(biāo)志物（如肌鈣蛋白I、α-肌動(dòng)蛋白、連接蛋白43）。
四、應(yīng)用領(lǐng)域
心血管疾病模型：模擬心肌缺血/再灌注損傷、心肌肥厚、缺氧等病理過(guò)程。
藥物篩選：評(píng)估藥物心臟毒性（如阿霉素誘導(dǎo)的凋亡）或潛在心臟保護(hù)劑。
分子機(jī)制研究：通過(guò)基因編輯（CRISPR、siRNA）研究信號(hào)通路（如AMPK、PI3K/AKT）對(duì)心肌細(xì)胞的影響。
五、注意事項(xiàng)
分化能力差異：不同實(shí)驗(yàn)室或傳代次數(shù)的H9c2分化效率可能不同，建議使用低傳代細(xì)胞（<20代）。
支原體污染：定期檢測(cè)，避免實(shí)驗(yàn)偏差。
功能驗(yàn)證：分化后需通過(guò)qPCR、Western blot或鈣離子成像確認(rèn)心肌特性。
六、與其他模型的對(duì)比
胞的培養(yǎng)條件與分化誘導(dǎo)及應(yīng)用領(lǐng)域.png)
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