假單胞菌熒光色素培養(yǎng)基配方與培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)！
小楊 / 2025-05-06 09:40:58
假單胞菌（如
銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa 和
熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens）產(chǎn)熒光色素的特性與其代謝產(chǎn)物（如綠膿菌素 pyocyanin 和熒光素 pyoverdine）密切相關(guān)。以下是為促進(jìn)這類(lèi)熒光色素產(chǎn)生而設(shè)計(jì)的常用培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法：
1、King's A 和 King's B 培養(yǎng)基
這兩種培養(yǎng)基廣泛用于
假單胞菌的熒光色素檢測(cè)和代謝研究：
(1) King's A 培養(yǎng)基
用途：促進(jìn) 綠膿菌素（pyocyanin） 的產(chǎn)生（
銅綠假單胞菌特有）。
配方（1L）：
蛋白胨（Proteose peptone）：20 g
甘油（Glycerol）：10 mL
無(wú)水硫酸鎂（MgSO?）：1.5 g
磷酸氫二鉀（K?HPO?）：1.5 g
瓊脂（可選）：15 g（固體培養(yǎng)基）
pH：7.2 ± 0.2
(2) King's B 培養(yǎng)基
用途：促進(jìn) 熒光素（pyoverdine） 的產(chǎn)生（多種假單胞菌均產(chǎn)）。
配方（1L）：
蛋白胨（Proteose peptone）：20 g
甘油（Glycerol）：10 mL
無(wú)水硫酸鎂（MgSO?）：1.5 g
磷酸氫二鉀（K?HPO?）：1.5 g
瓊脂（可選）：15 g（固體培養(yǎng)基）
pH：7.2 ± 0.2
2、培養(yǎng)方法
培養(yǎng)條件：
時(shí)間：24–48小時(shí)（熒光色素通常在18–24小時(shí)后可見(jiàn)）。
觀(guān)察方法：
在長(zhǎng)波紫外線(xiàn)下觀(guān)察菌落或液體培養(yǎng)物，熒光素會(huì)發(fā)出藍(lán)綠色熒光。
綠膿菌素（pyocyanin）為藍(lán)綠色色素，在可見(jiàn)光下可直接觀(guān)察。
3、其他可選培養(yǎng)基
假單胞菌分離瓊脂（Pseudomonas Isolation Agar, PIA）：
含 Irgasan（三氯生），選擇性抑制其他細(xì)菌，促進(jìn)假單胞菌生長(zhǎng)。
胰蛋白酶大豆瓊脂（TSA）或肉湯（TSB）：
通用培養(yǎng)基，假單胞菌可生長(zhǎng)并產(chǎn)熒光，但色素產(chǎn)量可能較低。
4、熒光色素的鑒別
同時(shí)產(chǎn) pyocyanin（藍(lán)綠色） 和 pyoverdine（黃綠色熒光）。
主要產(chǎn) pyoverdine，無(wú)綠膿菌素。
5、注意事項(xiàng)
紫外線(xiàn)防護(hù)：觀(guān)察熒光時(shí)需佩戴防紫外線(xiàn)護(hù)目鏡。
鐵限制條件：低鐵環(huán)境（如 King's B 培養(yǎng)基）可增強(qiáng)熒光素（pyoverdine）的合成。
商業(yè)化試劑：部分公司提供預(yù)制的假單胞菌選擇性培養(yǎng)基。
通過(guò)上述培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，可有效誘導(dǎo)
假單胞菌產(chǎn)熒光色素，用于菌種鑒定或次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究。
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