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腸道菌增菌液體培養(yǎng)基的原理和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及注意事項(xiàng)!
小楊 / 2025-06-04 08:56:30

 

腸道菌增菌液體培養(yǎng)基的原理和實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象如下:
 
一、原理
 
1、選擇性抑制
 
抑制劑:添加膽鹽、亮綠、亞硒酸鹽等成分,抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分非目標(biāo)革蘭氏陰性菌(如變形桿菌)。
 
作用機(jī)制:破壞雜菌細(xì)胞膜或干擾代謝,為目標(biāo)菌(如沙門(mén)氏菌、志賀氏菌)創(chuàng)造生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)。
 
2、營(yíng)養(yǎng)富集
 
高營(yíng)養(yǎng)基質(zhì):含蛋白胨、酵母提取物等,提供氨基酸、維生素等必需養(yǎng)分。
 
緩沖系統(tǒng):維持pH穩(wěn)定(通常7.0-7.4),適應(yīng)腸道菌生長(zhǎng)需求。
 
3、目標(biāo)菌特異性促進(jìn)
 
針對(duì)不同目標(biāo)菌優(yōu)化配方,例如:
 
TTB(四硫磺酸鹽煌綠增菌液):硫代硫酸鈉+碘→四硫磺酸鹽,抑制雜菌并促進(jìn)沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)。
 
SC(亞硒酸鹽胱氨酸增菌液):亞硒酸鹽抑制非沙門(mén)氏菌,胱氨酸中和毒性,增強(qiáng)沙門(mén)氏菌增殖。
 
二、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
 
1、渾濁度增加
 
陽(yáng)性結(jié)果:培養(yǎng)后培養(yǎng)基變渾濁(細(xì)菌大量繁殖)。
 
陰性結(jié)果:保持澄清(無(wú)菌或目標(biāo)菌未生長(zhǎng))。
 
2、產(chǎn)氣現(xiàn)象
 
部分腸道菌(如大腸桿菌)發(fā)酵產(chǎn)氣,可在杜氏管中觀察到氣泡聚集。
 
3、顏色變化
 
指示劑反應(yīng):若含pH指示劑(如酚紅),產(chǎn)酸時(shí)變黃(如大腸桿菌);產(chǎn)堿時(shí)變紅(如部分沙門(mén)氏菌)。
 
褪色:含亮綠的培養(yǎng)基可能因細(xì)菌代謝褪色。
 
4、菌膜/沉淀形成
 
志賀氏菌:可能在液面形成薄菌膜。
 
沙門(mén)氏菌:均勻渾濁或伴顆粒沉淀。
 
5、特殊代謝表現(xiàn)
 
硫化氫產(chǎn)生:沙門(mén)氏菌在TTB中生成黑色沉淀(FeS)。
 
三、典型應(yīng)用示例
 
 
四、結(jié)果解讀注意事項(xiàng)
 
渾濁≠目標(biāo)菌:需轉(zhuǎn)接選擇性平板進(jìn)一步分離鑒定。
 
無(wú)渾濁可能原因:樣本無(wú)菌、抑制劑過(guò)強(qiáng)、培養(yǎng)條件不當(dāng)。
 
需結(jié)合革蘭染色、生化試驗(yàn)或分子檢測(cè)確認(rèn)菌種。
 
通過(guò)選擇性抑制和營(yíng)養(yǎng)富集,增菌液顯著提高目標(biāo)菌濃度,為后續(xù)分離鑒定奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象需結(jié)合具體培養(yǎng)基配方和目標(biāo)菌特性綜合分析。
 
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