麥康凱液體培養(yǎng)基（MacConkey Broth）原理及使用方法！
小楊 / 2025-07-28 08:55:45
麥康凱液體培養(yǎng)基是一種選擇性兼鑒別性液體培養(yǎng)基，主要用于腸道致病菌（如沙門氏菌、志賀氏菌等）的增菌培養(yǎng)和初步鑒別，尤其適用于從含雜菌的樣本（如糞便、污水等）中分離腸道革蘭氏陰性菌。其核心原理基于選擇性抑制和生化反應(yīng)鑒別，使用時(shí)需遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作以保證培養(yǎng)效果。
一、培養(yǎng)基原理
麥康凱液體培養(yǎng)基的功能依賴于成分設(shè)計(jì)，核心原理包括選擇性抑制和生化鑒別兩方面：
1、選擇性抑制：抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)
培養(yǎng)基中添加了膽鹽（或結(jié)晶紫），這兩種成分能破壞革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，抑制其生長(zhǎng)繁殖；而腸道革蘭氏陰性菌（目標(biāo)菌）對(duì)膽鹽 / 結(jié)晶紫的耐受性較強(qiáng)，可在培養(yǎng)基中正常生長(zhǎng)，從而達(dá)到“篩選”目標(biāo)菌的目的。
2、生化鑒別：通過(guò)乳糖發(fā)酵區(qū)分細(xì)菌類型
培養(yǎng)基含乳糖（碳源）和pH 指示劑（如中性紅）：
若細(xì)菌能發(fā)酵乳糖（如大腸桿菌等非致病菌），會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物，使培養(yǎng)基 pH 下降，中性紅變色（由橙黃色變?yōu)榧t色），培養(yǎng)基整體可能呈現(xiàn)渾濁并伴顏色變化；
若細(xì)菌不能發(fā)酵乳糖（如沙門氏菌、志賀氏菌等致病菌），則不會(huì)產(chǎn)酸，培養(yǎng)基 pH 不變，顏色保持初始的橙黃色（僅因細(xì)菌生長(zhǎng)導(dǎo)致渾濁）。
這種顏色差異可初步區(qū)分“乳糖發(fā)酵菌”和“非乳糖發(fā)酵菌”，為后續(xù)鑒定提供依據(jù)。
二、培養(yǎng)基成分（典型配方）
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三、使用方法
（一）培養(yǎng)基制備（干粉配制）
稱量與溶解：按說(shuō)明書稱取麥康凱液體培養(yǎng)基干粉（如每 1000mL 蒸餾水加 50g 干粉），加入蒸餾水中，攪拌至完全溶解。
分裝：將溶液分裝至試管或錐形瓶（如試管每支裝 5-10mL），注意留有一定空間（避免培養(yǎng)時(shí)溢出）。
滅菌：121℃高壓蒸汽滅菌 15 分鐘（滅菌后 pH 約為 7.3±0.2）。
冷卻：滅菌后取出，自然冷卻至室溫（40-50℃以下），備用（可暫存于 4℃冰箱，有效期 1-2 周）。
（二）樣本接種與培養(yǎng)
樣本處理：待檢測(cè)樣本（如糞便、食品勻漿、污水等）需按比例接種（通常 1:10 稀釋，即 1g 樣本加入 9mL 培養(yǎng)基中），液體樣本可直接取 1mL 加入 9mL 培養(yǎng)基。
接種操作：用無(wú)菌吸管吸取樣本，加入滅菌后的麥康凱液體培養(yǎng)基中，輕輕混勻。
培養(yǎng)條件：將接種后的培養(yǎng)基置于36±1℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng) 18-24 小時(shí)（若樣本中菌量較少，可延長(zhǎng)至 48 小時(shí)）。
（三）結(jié)果觀察與后續(xù)處理
結(jié)果判斷：
若培養(yǎng)基渾濁（說(shuō)明有細(xì)菌生長(zhǎng)），且顏色變?yōu)榧t色（或局部變紅）：提示可能存在 “乳糖發(fā)酵菌”（如大腸桿菌）；
注：若培養(yǎng)基未渾濁，說(shuō)明無(wú)目標(biāo)菌生長(zhǎng)或菌量極少，需結(jié)合樣本情況判斷是否重新接種。
后續(xù)操作：對(duì)疑似“非乳糖發(fā)酵菌”的陽(yáng)性樣本，需轉(zhuǎn)種至麥康凱固體培養(yǎng)基進(jìn)行分離純化，再通過(guò)生化試驗(yàn)或血清學(xué)試驗(yàn)確認(rèn)菌種。
四、注意事項(xiàng)
無(wú)菌操作：制備、接種過(guò)程需嚴(yán)格無(wú)菌，避免雜菌污染（尤其是革蘭氏陽(yáng)性菌，可能干擾結(jié)果）。
滅菌控制：滅菌時(shí)間和溫度需準(zhǔn)確（過(guò)度滅菌可能破壞營(yíng)養(yǎng)成分，滅菌不足易污染）。
樣本新鮮度：樣本需盡快接種（如糞便樣本應(yīng)在采集后 2 小時(shí)內(nèi)處理，否則可能因雜菌過(guò)度繁殖影響結(jié)果）。
儲(chǔ)存條件：滅菌后的培養(yǎng)基需避光、4℃冷藏，避免反復(fù)凍融；若出現(xiàn)渾濁、沉淀或顏色異常，不可使用。
五、應(yīng)用場(chǎng)景
臨床檢驗(yàn)：糞便樣本中腸道致病菌的增菌（如沙門氏菌感染檢測(cè)）；
食品衛(wèi)生：食品、飲用水中腸道致病菌的篩查；
環(huán)境監(jiān)測(cè)：污水、土壤中革蘭氏陰性致病菌的初步分離。
通過(guò)選擇性抑制和生化鑒別，麥康凱液體培養(yǎng)基能高效富集目標(biāo)菌并初步區(qū)分類型，是腸道致病菌檢測(cè)的經(jīng)典前處理工具，其結(jié)果需結(jié)合固體培養(yǎng)基分離和進(jìn)一步鑒定才能最終確認(rèn)菌種。
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