微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中保存培養(yǎng)基和增菌培養(yǎng)基的特性與用途！
小楊 / 2025-08-22 09:56:11
百歐博偉生物：在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，保存培養(yǎng)基和增菌培養(yǎng)基是兩類用途不同的關(guān)鍵培養(yǎng)基，分別用于維持微生物的存活與遺傳穩(wěn)定性，以及富集目標(biāo)微生物（尤其是低濃度樣本中的微生物）。以下是兩類培養(yǎng)基的詳細(xì)介紹：
一、保存培養(yǎng)基（Preservation Media）
保存培養(yǎng)基的核心功能是為微生物提供適宜的環(huán)境，減緩其代謝活動(dòng)，延長存活時(shí)間，同時(shí)保持菌株的遺傳特性穩(wěn)定，避免變異或死亡。選擇時(shí)需根據(jù)微生物的種類（細(xì)菌、真菌、病毒等）和保存期限（短期、中期、長期）設(shè)計(jì)配方。
1、常用保存培養(yǎng)基類型及適用范圍
培養(yǎng)基名稱 主要成分 適用微生物 保存期限 特點(diǎn)
營養(yǎng)瓊脂斜面 蛋白胨、牛肉膏、瓊脂 多數(shù)異養(yǎng)細(xì)菌 1-3 個(gè)月（4℃） 成分簡單，制作方便，適合實(shí)驗(yàn)室短期傳代保存，需定期轉(zhuǎn)接以維持活力。
庖肉培養(yǎng)基 牛肉渣、肉湯、葡萄糖 厭氧細(xì)菌 1-6 個(gè)月（4℃） 牛肉渣提供厭氧環(huán)境和營養(yǎng)，適合厭氧菌的長期保存，減少氧氣對(duì)菌株的損傷。
馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA） 馬鈴薯浸出液、瓊脂 真菌（
酵母菌、
曲霉） 1-3 個(gè)月（4℃） 富含碳水化合物，適合真菌生長和保存，能維持孢子形成能力。
呂氏血清斜面 血清、瓊脂 苛養(yǎng)菌 1-2 個(gè)月（4℃） 血清提供復(fù)雜營養(yǎng)，滿足苛養(yǎng)菌對(duì)生長因子的需求，保持菌株毒力。
半固體瓊脂 蛋白胨、牛肉膏 細(xì)菌（如
志賀菌、
沙門菌） 1-6 個(gè)月（4℃） 低瓊脂含量形成半固體狀態(tài)，減少氧氣接觸，適合兼性厭氧菌的保存，抑制動(dòng)力強(qiáng)的細(xì)菌擴(kuò)散。
2、保存培養(yǎng)基的關(guān)鍵設(shè)計(jì)原則
營養(yǎng)適度：避免過高濃度營養(yǎng)導(dǎo)致微生物過度繁殖消耗資源，或過低營養(yǎng)導(dǎo)致菌株衰退（如添加基礎(chǔ)碳源、氮源，減少易分解糖類）。
環(huán)境調(diào)控：根據(jù)微生物的氧需求（厭氧、需氧、兼性）調(diào)整培養(yǎng)基狀態(tài)（如庖肉培養(yǎng)基的厭氧環(huán)境、半固體的低氧環(huán)境）。
滲透壓平衡：添加鹽類維持等滲環(huán)境，防止細(xì)胞因滲透壓失衡破裂（尤其對(duì)細(xì)菌和酵母菌重要）。
低溫協(xié)同：保存培養(yǎng)基通常需配合低溫（4℃、-20℃或 - 80℃）使用，低溫進(jìn)一步減緩代謝，延長保存時(shí)間（如斜面培養(yǎng)基 + 4℃是最常用的短期保存組合）。
二、增菌培養(yǎng)基（Enrichment Media）
增菌培養(yǎng)基用于從含少量目標(biāo)微生物的樣本（如食品、水、臨床標(biāo)本）中，通過提供適宜的營養(yǎng)和生長條件，促進(jìn)目標(biāo)微生物大量繁殖，同時(shí)抑制雜菌生長（選擇性增菌）或無選擇性地促進(jìn)所有微生物生長（非選擇性增菌），以便后續(xù)分離和鑒定。
1、非選擇性增菌培養(yǎng)基（通用增菌）
適用于樣本中微生物數(shù)量少但種類不明確的情況，目的是增加所有微生物的總量，為后續(xù)分離提供足夠菌量。
營養(yǎng)肉湯（Nutrient Broth）：
成分：蛋白胨、牛肉膏、NaCl、水（無瓊脂）。
適用：多數(shù)異養(yǎng)細(xì)菌（如
大腸桿菌、
葡萄球菌）的增菌，常用于食品、水樣本的前處理，培養(yǎng)后可轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基分離單菌落。
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）：
成分：胰蛋白胨、大豆蛋白胨、葡萄糖、NaCl 等。
適用：更廣泛的細(xì)菌增菌，包括苛養(yǎng)菌（如
鏈球菌），常用于藥品、化妝品的微生物限度檢查，營養(yǎng)更豐富，支持多種細(xì)菌生長。
2、選擇性增菌培養(yǎng)基（靶向增菌）
通過添加抑制劑（如抗生素、染料、膽鹽）抑制雜菌，同時(shí)添加目標(biāo)微生物偏好的營養(yǎng)物質(zhì)，實(shí)現(xiàn)對(duì)特定微生物的富集。
培養(yǎng)基名稱 主要成分及抑制劑 目標(biāo)微生物 作用機(jī)制
亞硒酸鹽胱氨酸肉湯 蛋白胨、乳糖、亞硒酸鈉 沙門菌屬 亞硒酸鈉抑制大腸桿菌等雜菌，乳糖和胱氨酸促進(jìn)沙門菌生長，常用于糞便、食品中沙門菌的增菌。
四硫磺酸鈉煌綠肉湯（TTB） 蛋白胨、膽鹽、煌綠 沙門菌屬 膽鹽和煌綠抑制革蘭陽性菌和部分革蘭陰性菌，硫代硫酸鈉提供還原環(huán)境，適合沙門菌的選擇性富集。
腸道菌增菌肉湯（EE 肉湯） 蛋白胨、乳糖、去氧膽酸鈉 大腸菌群 去氧膽酸鈉抑制革蘭陽性菌，乳糖促進(jìn)大腸菌群生長，用于水、食品中大腸菌群的增菌。
堿性蛋白胨水（APW） 蛋白胨、NaCl、NaOH 霍亂弧菌 高 pH 環(huán)境抑制多數(shù)雜菌，蛋白胨提供營養(yǎng)，適合霍亂弧菌在堿性條件下的快速繁殖。
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂（MYP） 甘露醇、卵黃、瓊脂 蠟樣芽胞桿菌 甘露醇發(fā)酵產(chǎn)酸使菌落變黃，卵黃反應(yīng)顯示卵磷脂酶活性，用于食品中該菌的增菌和分離。
3、增菌培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)要點(diǎn)
營養(yǎng)強(qiáng)化：針對(duì)目標(biāo)微生物的代謝需求添加特定營養(yǎng)（如沙門菌需要胱氨酸，霍亂弧菌偏好高鹽）。
抑制雜菌：通過調(diào)整 pH（如 APW 的堿性）、添加抗生素（如多粘菌素）或染料（如煌綠），選擇性抑制非目標(biāo)微生物。
培養(yǎng)條件配合：增菌效果需結(jié)合溫度和時(shí)間（如耐熱大腸菌群在 44.5℃增菌，沙門菌在 37℃培養(yǎng) 18-24 小時(shí)）。
三、兩類培養(yǎng)基的核心區(qū)別
維度 保存培養(yǎng)基 增菌培養(yǎng)基
核心目的 維持微生物存活和遺傳穩(wěn)定 促進(jìn)目標(biāo)微生物大量繁殖
營養(yǎng)水平 營養(yǎng)適度，避免過度代謝 營養(yǎng)豐富（或針對(duì)性添加特定成分）
抑制劑 通常不含抑制劑 選擇性增菌培養(yǎng)基含特定抑制劑
物理狀態(tài) 多為固體（斜面）或半固體 多為液體（便于大量繁殖）
培養(yǎng)時(shí)間 長期保存（數(shù)周至數(shù)月） 短期培養(yǎng)（數(shù)小時(shí)至 1-2 天）
理解兩類培養(yǎng)基的特性和用途，有助于在微生物檢測、菌種保藏等實(shí)驗(yàn)中正確選擇和使用，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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