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酒酒球菌的乳酸發(fā)酵工藝的具體操作步驟是怎樣的?
小楊 / 2025-09-08 09:04:42

 

蘋(píng)果酸 - 乳酸發(fā)酵(MLF)是葡萄酒釀造中利用酒酒球菌(Oenococcus oeni)將蘋(píng)果酸轉(zhuǎn)化為乳酸的關(guān)鍵工藝,其操作需結(jié)合酒精發(fā)酵進(jìn)程、環(huán)境控制及微生物管理,具體步驟如下:
 
一、前期準(zhǔn)備:確定 MLF 啟動(dòng)時(shí)機(jī)
 
1、酒精發(fā)酵末期啟動(dòng)(推薦)
 
傳統(tǒng)上在酒精發(fā)酵接近結(jié)束時(shí)(殘?zhí)墙抵?5 g/L 以下,酒精含量達(dá) 10%-12%)啟動(dòng) MLF,此時(shí)酒液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如氨基酸、維生素)較豐富,且酒精濃度尚未過(guò)高,利于酒酒球菌定植。
 
注:部分工藝會(huì)在酒精發(fā)酵中期啟動(dòng)(殘?zhí)?20-30 g/L),適用于高酸葡萄品種,可提前降低酸度壓力,但需避免酒精發(fā)酵與 MLF 過(guò)度重疊導(dǎo)致的酵母與乳酸菌競(jìng)爭(zhēng)。
 
2、酒液預(yù)處理
 
檢測(cè)基礎(chǔ)參數(shù):測(cè)定酒液 pH(需≥3.0,低于 3.0 需用碳酸鈣微調(diào)至 3.2-3.4,否則抑制乳酸菌)、總酸、酒精含量、二氧化硫(SO?)濃度。
 
二氧化硫控制:若酒精發(fā)酵后游離 SO?過(guò)高(>30 mg/L),需通過(guò)通風(fēng)或添加還原性物質(zhì)(如維生素 C)降低至 10-20 mg/L(避免殺死酒酒球菌)。
 
營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充:若酒液中氮源(氨基酸)或泛酸等維生素不足,可添加乳酸菌營(yíng)養(yǎng)劑(如酵母浸出物、肽類),促進(jìn)菌株生長(zhǎng)。
 
二、接種酒酒球菌
 
1、菌株選擇
 
根據(jù)酒液特性(如酒精含量、pH)選擇適配菌株:
 
高酒精(>14%)或低 pH(<3.2)酒液:選耐脅迫菌株;
 
追求特定風(fēng)味(如黃油香):選產(chǎn)酯能力強(qiáng)的菌株。
 
2、接種方法
 
活化接種:商用凍干菌株需用無(wú)菌水或酒液(稀釋 10 倍)在 25-30℃下活化 30-60 分鐘,恢復(fù)活性后按推薦比例(通常 10?-10? CFU/mL)加入酒液;
 
直接接種:部分即溶型菌株可直接撒入酒液,攪拌均勻。
 
三、發(fā)酵過(guò)程控制
 
1、溫度控制
 
最適溫度為 18-22℃:
 
低于 15℃:發(fā)酵速率減慢,可能停滯;
 
高于 25℃:易滋生雜菌(如醋酸菌),產(chǎn)生異味(醋酸味)。
 
可通過(guò)恒溫發(fā)酵罐或水浴控制溫度,紅葡萄酒可稍高(20-22℃),白葡萄酒稍低(16-18℃)以保持果香。
 
2、攪拌與通氣
 
定期攪拌(每天 1-2 次):使酒酒球菌與底物充分接觸,避免酵母泥沉降抑制乳酸菌;
 
輕微通氣(可選):低氧環(huán)境利于乳酸菌生長(zhǎng),過(guò)度通氣易導(dǎo)致氧化或雜菌污染。
 
3、過(guò)程監(jiān)測(cè)
 
關(guān)鍵指標(biāo)檢測(cè):
 
蘋(píng)果酸含量:初始通常 5-10 g/L,發(fā)酵終點(diǎn)降至 0.5 g/L 以下(通過(guò)高效液相色譜 HPLC 或試紙快速檢測(cè));
 
pH 變化:隨蘋(píng)果酸轉(zhuǎn)化為乳酸,pH 會(huì)上升 0.3-0.5 個(gè)單位(如從 3.3 升至 3.6-3.8);
 
乳酸菌數(shù)量:通過(guò)平板計(jì)數(shù)維持在 10?-10? CFU/mL,若數(shù)量下降需排查營(yíng)養(yǎng)或環(huán)境問(wèn)題。
 
異常處理:
 
發(fā)酵停滯:補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)劑、調(diào)整溫度至 20℃,或重新接種高活性菌株;
 
異味產(chǎn)生:立即終止發(fā)酵,添加 SO?(30-50 mg/L)抑制雜菌。
 
四、MLF 終點(diǎn)判斷與終止
 
1、終點(diǎn)標(biāo)志
 
蘋(píng)果酸含量<0.5 g/L,且連續(xù) 3 天檢測(cè)無(wú)明顯變化;
 
pH 穩(wěn)定,不再上升;
 
酒液口感柔和,尖銳酸度消失。
 
2、終止發(fā)酵
 
添加二氧化硫:加入 50-80 mg/L 游離 SO?,抑制酒酒球菌及其他微生物活性,防止后續(xù)變質(zhì);
 
低溫處理:將酒液降溫至 0-4℃,通過(guò)低溫抑制乳酸菌代謝(適用于對(duì) SO?敏感的酒款);
 
過(guò)濾 / 離心:去除菌體,終止代謝活動(dòng)(常用于白葡萄酒澄清工藝)。
 
五、后續(xù)處理
 
MLF 結(jié)束后,酒液需進(jìn)行澄清(下膠、過(guò)濾)、陳釀或裝瓶,期間需監(jiān)控 SO?濃度和微生物穩(wěn)定性,確保葡萄酒品質(zhì)。
 
總結(jié):MLF 的核心是通過(guò)控制溫度、pH、SO?及營(yíng)養(yǎng),為酒酒球菌創(chuàng)造適宜環(huán)境,其成功與否直接影響葡萄酒的酸度平衡與風(fēng)味復(fù)雜度,需結(jié)合葡萄品種、酒型及工藝目標(biāo)靈活調(diào)整參數(shù)。
 
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